產(chǎn)品概述

本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊源抗鳥類免疫球蛋白G（IgG）重鏈和輕鏈多克隆抗體（貨號：A140-110P），經(jīng)抗原親和純化，以未標(biāo)記形式提供。該抗體通過多種鳥類（鴿、鴨、麻雀、雞）純化IgG免疫誘導(dǎo)產(chǎn)生，可識別鳥類IgG的完整分子（包括重鏈和輕鏈），覆蓋至少10種常見鳥類物種。適用于酶聯(lián)免疫吸附測定、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)及免疫印跡等多種檢測體系，是禽類免疫學(xué)研究、鳥類疾病監(jiān)測及抗體藥物開發(fā)中重要的檢測工具。

基本規(guī)格參數(shù)

參數(shù) 具體信息

靶標(biāo) 鳥類IgG重鏈和輕鏈

反應(yīng)種屬 鳥類

宿主 山羊

克隆性 多克隆

形式 全IgG

自身抗體亞型 IgG

標(biāo)記物 未標(biāo)記

純度 抗原親和純化

抗原種屬 鳥類

濃度 1 mg/ml

保存溫度 2 - 8 °C

有效期 自收貨之日起2年

緩沖液 含0.09%疊氮鈉的磷酸鹽緩沖鹽水

生產(chǎn)與純化工藝

本抗體的生產(chǎn)采用多物種免疫原策略。具體流程如下：

1. 免疫原制備：從鴿、鴨、麻雀和雞的血清中分別純化IgG，混合后作為免疫原。

2. 免疫程序：使用上述混合抗原對山羊進行多次免疫，誘導(dǎo)產(chǎn)生廣譜識別鳥類IgG的抗血清。

3. 親和純化：將抗原（混合鳥類IgG）偶聯(lián)至瓊脂糖凝膠珠，通過親和層析從抗血清中特異性分離目標(biāo)抗體。

4. 濃度測定：依據(jù)比爾定律，1 mg/ml IgG在280 nm波長下的吸光度（A280）為1.4。本品最終濃度為1 mg/ml，即用型設(shè)計。

該多物種免疫策略確保了抗體對多種鳥類IgG的廣譜識別能力，同時保留了親和純化的高純度特性。

特異性驗證

經(jīng)免疫電泳和酶聯(lián)免疫吸附測定驗證，本抗體對以下鳥類IgG具有特異性反應(yīng)：

經(jīng)驗證明確識別的物種 可檢測的物種（經(jīng)文獻或內(nèi)部驗證）

鴨、麻雀、鴿、雞 火雞、鴕鳥、鴯鹋、鵪鶉、金剛鸚鵡、雞尾鸚鵡

關(guān)鍵特性：

不識別鳥類血清中的非免疫球蛋白成分（如白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等）

與鳥類免疫球蛋白輕鏈（κ/λ）及重鏈恒定區(qū)均有反應(yīng)，保證對完整IgG分子的高靈敏度識別

可能與其他未列明物種的IgG發(fā)生交叉反應(yīng)，建議在使用新物種樣本前進行預(yù)實驗

交叉反應(yīng)性說明：由于本品識別的是保守的IgG重鏈和輕鏈表位，它與親緣關(guān)系較近的物種（如爬行類或部分哺乳類）可能產(chǎn)生交叉反應(yīng)。需要嚴(yán)格種屬特異性時，建議設(shè)置平行陰性對照。

產(chǎn)品設(shè)計原理與生物學(xué)背景

抗重鏈和輕鏈（H+L）抗體的設(shè)計目標(biāo)是識別完整的Ig分子，同時覆蓋Fab段和Fc段。與傳統(tǒng)僅針對Fc段的抗體相比，H+L抗體具有以下優(yōu)勢：

信號增強：每個IgG分子有兩個輕鏈和兩個重鏈，H+L抗體可結(jié)合更多表位，在免疫印跡和免疫組化中通常產(chǎn)生更強的信號。

適用范圍廣：無論目標(biāo)IgG的亞類或Fc段是否被修飾（如還原處理），輕鏈表位通常保持可識別狀態(tài)，適用于變性條件下的免疫印跡實驗。

在禽類免疫學(xué)研究中，鳥類IgG（也稱IgY）的結(jié)構(gòu)與哺乳動物IgG存在差異（如缺少鉸鏈區(qū)）。本品在設(shè)計時采用了多種鳥類IgG混合免疫，提高了對不同鳥類IgG結(jié)構(gòu)變異的包容性。

應(yīng)用與推薦稀釋比例

以下推薦稀釋比例為起始參考值。需注意，并非所有列出的應(yīng)用均已在本實驗室完成具體驗證，建議用戶在s次使用時根據(jù)樣本類型和實驗體系進行梯度優(yōu)化。

應(yīng)用 推薦稀釋比例 備注

酶聯(lián)免疫吸附測定 1:1000 - 1:30,000 用于包被酶標(biāo)板時推薦1:100 - 1:500

免疫細(xì)胞化學(xué) 1:200 - 1:2,000

免疫組織化學(xué) 1:200 - 1:2,000

免疫印跡 1:1000 - 1:30,000 適用于還原和非還原條件

典型應(yīng)用場景：

ELISA：檢測禽類血清、卵黃或組織勻漿中的總IgG水平，適用于疫苗免疫效果評價、禽病血清學(xué)調(diào)查。

免疫印跡：鑒定重組表達(dá)的禽類抗體或抗原-抗體復(fù)合物，區(qū)分重鏈（約65-70 kDa）和輕鏈（約25-28 kDa）。

IHC/ICC：檢測禽類組織切片或細(xì)胞樣本中沉積或產(chǎn)生的IgG，用于研究局部免疫反應(yīng)或感染灶的抗體分布。

使用與保存注意事項

保存條件：請于2-8°C條件下豎直保存，避免冷凍。反復(fù)凍融會導(dǎo)致抗體變性失效。在指定條件下，自收貨之日起2年內(nèi)穩(wěn)定有效。

防腐劑提示：緩沖液含0.09%疊氮鈉作為抗菌防腐劑。如后續(xù)實驗涉及細(xì)胞培養(yǎng)、活細(xì)胞染色或?qū)ΟB氮鈉敏感的酶促反應(yīng)（如HRP偶聯(lián)前的處理），請通過透析、脫鹽柱或超濾去除疊氮鈉。

稀釋緩沖液建議：推薦使用含1% BSA或正常山羊血清的PBS/TBS作為稀釋液。對于禽類組織樣本，建議添加0.1% Triton X-100以增強滲透性（適用于IHC/ICC）。

陰性對照設(shè)置：建議設(shè)置兩種陰性對照——使用正常山羊IgG替代一抗，以及使用未經(jīng)免疫的禽類血清樣本，以區(qū)分特異性信號與背景吸附。

交叉物種使用注意：若應(yīng)用于其他非鳥類物種（如爬行類），建議進行預(yù)實驗并設(shè)置梯度稀釋，評估背景信號水平。