產(chǎn)品概述

本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊源抗小鼠免疫球蛋白G（IgG）重鏈和輕鏈多克隆抗體（貨號：A90-516P），經(jīng)抗原親和純化及多物種交叉吸附處理，可識別小鼠IgG的完整分子（包括重鏈和輕鏈）。未標記形式適用于ELISA、免疫細胞化學、免疫組織化學及免疫印跡等多種檢測體系，是檢測小鼠IgG總抗體或作為二抗系統(tǒng)核心組件的可靠工具。

基本規(guī)格參數(shù)

參數(shù) 具體信息

靶標 小鼠IgG重鏈和輕鏈

反應種屬 小鼠

宿主 山羊

克隆性 多克隆

形式 全IgG

自身抗體亞型 IgG

標記物 未標記

純度 抗原親和純化

抗原種屬 小鼠

濃度 0.5 mg/ml

保存溫度 2 - 8 °C

有效期 自收貨之日起1年

緩沖液 含0.09%疊氮鈉的磷酸鹽緩沖鹽水

生產(chǎn)與純化工藝

該抗體的生產(chǎn)采用了多物種交叉吸附預處理工藝。具體而言，抗血清先經(jīng)過牛、雞、馬、人、豬、兔和大鼠免疫吸附劑進行交叉吸附，以去除可能存在的交叉反應性抗體。隨后，通過親和層析技術，將小鼠IgG抗原偶聯(lián)至瓊脂糖凝膠珠，從處理后的抗血清中特異性分離目標抗體。

免疫球蛋白濃度的測定依據(jù)比爾定律：1 mg/ml IgG在280 nm波長下的吸光度（A280）為1.4。本品最終濃度為0.5 mg/ml，即用型設計降低了使用前稀釋的工作量。

特異性與交叉反應性驗證

經(jīng)免疫電泳和酶聯(lián)免疫吸附測定驗證，該抗體對小鼠IgG具有特異性反應，同時識別其他小鼠免疫球蛋白亞類共有的輕鏈（κ和λ）。重要的是，該抗體與小鼠非免疫球蛋白血清蛋白無任何反應。

交叉吸附效果：經(jīng)過7種物種（牛、雞、馬、人、豬、兔、大鼠）免疫吸附劑的處理，本品與上述物種IgG的交叉反應性均低于1%。這一特性顯著降低了在含有多物種蛋白樣本（如胎牛血清、人血清蛋白等）背景下的非特異性信號風險。

需注意：該抗體仍可能與其他未列明物種的IgG發(fā)生交叉反應，建議在涉及非模式物種的實驗中進行平行陰性對照。

產(chǎn)品設計原理與生物學背景

抗重鏈和輕鏈抗體的設計目標是與完整的Ig分子（包括Fab和Fc區(qū)域）發(fā)生反應。免疫球蛋白G廣泛存在于所有體液中，是機體抵御感染的主要手段。由于H+L抗體的識別表位涵蓋重鏈和輕鏈的多個保守區(qū)域，其對小鼠IgG的檢測靈敏度通常高于僅針對重鏈或Fc片段的抗體。同時，這也帶來了潛在的跨物種交叉反應性——本品通過嚴格的交叉吸附將常見物種的交叉反應控制在極低水平，在靈敏度與特異性之間取得了良好平衡。

應用與推薦稀釋比例

以下推薦稀釋比例為起始參考值。需注意，并非所有列出的應用均已在本實驗室完成具體驗證，建議用戶在s次使用時根據(jù)樣本類型和實驗體系進行梯度優(yōu)化。

應用 推薦稀釋比例 備注

酶聯(lián)免疫吸附測定 1:1000 - 1:20,000 用于包被酶標板時推薦1:50 - 1:250

免疫細胞化學 1:200 - 1:2,000

免疫組織化學 1:200 - 1:2,000

免疫印跡 1:1000 - 1:20,000

典型應用場景：

ELISA：作為檢測抗體檢測小鼠IgG總水平，或用于夾心法捕獲小鼠單克隆抗體。

免疫印跡：識別還原或非還原條件下的小鼠IgG重鏈（約55 kDa）和輕鏈（約25 kDa）。

IHC/ICC：檢測組織切片或細胞樣本中產(chǎn)生或結合的小鼠IgG。

使用與保存注意事項

保存條件：請于2-8°C條件下豎直保存，避免冷凍。反復凍融會導致抗體變性失效。在指定條件下，自收貨之日起1年內穩(wěn)定有效。

防腐劑提示：緩沖液含0.09%疊氮鈉，作為抗菌防腐劑。如后續(xù)實驗涉及細胞培養(yǎng)或對疊氮鈉敏感的酶學檢測（如HRP偶聯(lián)前的處理），請通過透析、脫鹽柱或超濾去除疊氮鈉。

稀釋緩沖液建議：推薦使用含1% BSA或正常血清的PBS/TBS作為稀釋液，以降低非特異性吸附。

陽性和陰性對照：建議設置已知小鼠IgG陽性樣本及同型對照（如正常山羊IgG）以評估背景信號。對于多物種樣本，建議同時檢測交叉吸附效果。

總結

本產(chǎn)品是一款經(jīng)多物種交叉吸附、抗原親和純化的山羊抗小鼠IgG（H+L）多克隆抗體，濃度為0.5 mg/ml。其核心優(yōu)勢在于：識別小鼠完整IgG分子（重鏈+輕鏈），檢測靈敏度高；與牛、雞、馬、人、豬、兔、大鼠IgG的交叉反應性<1%，背景控制優(yōu)異；覆蓋ELISA、ICC、IHC、WB四大應用場景，稀釋窗口寬泛。適用于小鼠IgG總抗體檢測、單克隆抗體篩選、免疫組化信號放大及蛋白免疫印跡體系，是實驗室免疫檢測工具箱中靈活、可靠的基礎試劑。