產(chǎn)品概述

兔抗WDR5抗體親和純化是一款由艾美捷Bethyl Laboratories推出的針對人、小鼠、大鼠源WDR5（WD重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白5）的高親和力兔多克隆抗體（貨號：A302-430A）。該抗體經(jīng)抗原親和層析純化，以完整IgG形式提供，濃度為200 µg/ml，適用于免疫組織化學(xué)（IHC）和免疫印跡（WB）實(shí)驗(yàn)，是研究組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物組裝的理想工具。

技術(shù)參數(shù)詳解

基本特性

靶點(diǎn)蛋白：WDR5（WD重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白5）

反應(yīng)種屬：大鼠、小鼠、人

宿主來源：兔

克隆類型：多克隆

抗體形式：全分子IgG

亞型：IgG

標(biāo)記：非偶聯(lián)

免疫原信息

該抗體識別的表位位于人WDR5蛋白第50–100位氨基酸殘基區(qū)域，具體對應(yīng)NP_060058.1（GeneID 11091）編號系統(tǒng)中的第75–125位區(qū)間（免疫原為固相載體上固定化的WDR5特異性表位，位于75至125位殘基之間）。該區(qū)域避開了WD重復(fù)的高度保守結(jié)構(gòu)，有助于提高抗體的特異性識別能力。

純化與濃度

純化方式：抗原親和純化

濃度測定：采用比爾定律，1 mg/ml IgG在280 nm波長下的吸光度為1.4

純度：抗原親和純化級

儲存與穩(wěn)定性

參數(shù) | 條件

儲存溫度 | 2 – 8 °C

有效期 | 收貨之日起1年

緩沖液 | Tris緩沖鹽水，含0.1% BSA和0.09%疊d化鈉

注意事項(xiàng)：疊d化鈉作為防腐劑，可能干擾細(xì)胞培養(yǎng)或體內(nèi)注射實(shí)驗(yàn)。如需進(jìn)行此類應(yīng)用，請通過透析或超濾去除。

應(yīng)用與方法參數(shù)

推薦工作濃度

應(yīng)用 | 推薦稀釋度

免疫組織化學(xué)（IHC） | 1:200 – 1:1000

免疫印跡（WB） | 1:2000 – 1:10000

免疫印跡（WB）操作要點(diǎn)

1. 封閉與稀釋液：5% 脫脂牛奶-TBST

2. 一抗孵育：過夜孵育（推薦4°C）

3. 檢測二抗：使用山羊抗兔IgG重輕鏈抗體（A120-101P）

免疫組織化學(xué)（IHC）操作要點(diǎn)

福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）切片：推薦使用pH 6.0的檸檬酸鹽緩沖液進(jìn)行抗原修復(fù)

稀釋范圍：1:200 – 1:1000，建議初次實(shí)驗(yàn)從1:500開始摸索最佳條件

檢測系統(tǒng)：建議使用相應(yīng)的HRP/AP標(biāo)記的二抗及顯色底物

靶點(diǎn)生物學(xué)功能

WDR5是屬于WD重復(fù)蛋白家族的一員。WD重復(fù)結(jié)構(gòu)由四個(gè)或更多重復(fù)單元組成，每個(gè)單元約40個(gè)氨基酸，以保守的色氨酸-天冬氨酸（WD）結(jié)尾。WD重復(fù)通常作為銜接蛋白的蛋白-蛋白相互作用位點(diǎn)，促進(jìn)多蛋白復(fù)合物的組裝。

結(jié)構(gòu)與功能特征

WD重復(fù)數(shù)量：WDR5含有7個(gè)WD重復(fù)

核心復(fù)合物：是哺乳動物MLL和SET1組蛋白H3賴氨酸4（H3K4）甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物的核心亞基

主要功能：協(xié)助MLL和SET1染色質(zhì)修飾復(fù)合物的組裝，是組蛋白甲基化調(diào)控的關(guān)鍵因子

別名

BIG-3（BMP2誘導(dǎo)的3 kb基因蛋白）

CFAP89（纖毛及鞭毛相關(guān)蛋白89）

SWD3（Set1c WD40重復(fù)蛋白同源物）

BMP2-induced 3-kb gene protein

質(zhì)量保證

該抗體采用表位特異性親和純化工藝，針對人WDR5蛋白第50–100位殘基之間的獨(dú)特表位進(jìn)行富集。該區(qū)域不與其他WD重復(fù)蛋白產(chǎn)生顯著同源性，確保了高特異性。每批次產(chǎn)品均經(jīng)過質(zhì)控驗(yàn)證，符合研究用標(biāo)準(zhǔn)。

應(yīng)用場景建議

1. 表觀遺傳學(xué)研究：利用WB或IHC檢測WDR5在不同細(xì)胞類型或組織中的表達(dá)水平，分析其與MLL/SET1復(fù)合物其他亞基的共表達(dá)關(guān)系

2. 染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）：配合特異性二抗可用于ChIP實(shí)驗(yàn)，研究WDR5在基因組特定區(qū)域的富集情況

3. 蛋白相互作用分析：通過免疫共沉淀（需自行驗(yàn)證IP適用性）研究WDR5與組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶的相互作用

4. 發(fā)育與疾病模型：在大鼠、小鼠或人組織切片中進(jìn)行IHC定位，探索WDR5在發(fā)育、干細(xì)胞維持及腫瘤發(fā)生中的分布變化

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

物種交叉反應(yīng)性：經(jīng)驗(yàn)證對人、小鼠、大鼠均有效，其他物種需自行測試

抗原修復(fù)：IHC實(shí)驗(yàn)中強(qiáng)烈推薦使用檸檬酸鹽緩沖液（pH 6.0）進(jìn)行熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)，以提高染色信號

背景控制：多克隆抗體可能產(chǎn)生非特異性染色，建議設(shè)置同型對照或免疫前血清對照

抗體稀釋液：WB實(shí)驗(yàn)中使用5%脫脂牛奶-TBST可獲得較低的背景；IHC實(shí)驗(yàn)中可嘗試含BSA的PBS以降低組織背景

*本產(chǎn)品僅供研究使用，不用于診斷程序。