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產(chǎn)品概述
兔抗HCF1抗體親和純化是一款由艾美捷Bethyl Laboratories推出的針對(duì)人源HCF1(宿主細(xì)胞因子C1)的高親和力兔多克隆抗體(貨號(hào):A301-400A)。該抗體經(jīng)抗原親和層析純化,以完整IgG形式提供,濃度為200 µg/ml,適用于免疫沉淀(IP)和免疫印跡(WB)實(shí)驗(yàn)。
技術(shù)參數(shù)詳解
基本特性
靶點(diǎn)蛋白:HCF1(宿主細(xì)胞因子1)
反應(yīng)種屬:人
宿主來源:兔
克隆類型:多克隆
抗體形式:全分子IgG
亞型:IgG
標(biāo)記:非偶聯(lián)(未 conjugated)
免疫原信息
該抗體識(shí)別的表位位于人HCF1蛋白第1985位氨基酸殘基與C末端之間的區(qū)域,具體對(duì)應(yīng)NP_005325.2(GeneID 3054)編號(hào)系統(tǒng)中的第1985-2035位殘基區(qū)間。免疫原為固相載體上固定化的HCF1特異性表位。
純化與濃度
純化方式:抗原親和純化
濃度測(cè)定:采用比爾定律,1 mg/ml IgG在280 nm波長(zhǎng)下的吸光度為1.4
純度:抗原親和純化級(jí)
儲(chǔ)存與穩(wěn)定性
參數(shù) | 條件
儲(chǔ)存溫度 | 2 8 °C
有效期 | 收貨之日起1年
緩沖液 | Tris緩沖鹽水,含0.1% BSA和0.09%疊d化鈉
注意:疊d化鈉作為防腐劑,在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中如需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或動(dòng)物注射,請(qǐng)務(wù)必通過透析或超濾去除。
應(yīng)用與方法參數(shù)
推薦工作濃度
應(yīng)用 | 推薦用量/稀釋度
免疫沉淀(IP) | 6 µg/mg 裂解液
免疫印跡(WB) | 1:2000 1:10000
免疫印跡(WB)操作要點(diǎn)
1. 封閉與稀釋液:5% 脫脂牛奶-TBST
2. 一抗孵育:過夜孵育
3. 細(xì)胞裂解液WB檢測(cè):使用山羊抗兔IgG重輕鏈抗體(A120-101P)
4. 免疫沉淀物WB檢測(cè):使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯(lián)抗體,封閉緩沖液中需添加5%正常豬血清(貨號(hào)S100-020)
免疫沉淀(IP)注意事項(xiàng)
該抗體在IP實(shí)驗(yàn)中使用時(shí),后續(xù)WB檢測(cè)建議使用抗兔IgG輕鏈特異性二抗,以避免與IP抗體的重鏈產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
靶點(diǎn)生物學(xué)功能
HCF1最初被發(fā)現(xiàn)是單純皰疹病毒(HSV)利用的宿主細(xì)胞因子,參與病毒轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)。在正常細(xì)胞中,HCF1作為轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)因子,主要涉及以下生物學(xué)過程:
組蛋白修飾:參與染色質(zhì)表觀遺傳調(diào)控
細(xì)胞周期進(jìn)程:調(diào)控細(xì)胞周期相關(guān)基因表達(dá)
轉(zhuǎn)錄共激活/抑制:與多種轉(zhuǎn)錄因子協(xié)同作用
別名
C1 factor, CFF, HCF, HCF1, HCF-1, HFC1, MRX3, PPP1R89(蛋白磷酸酶1調(diào)節(jié)亞基89), VCAF, VP16 accessory protein(VP16輔助蛋白)
質(zhì)量保證
該抗體采用表位特異性親和純化工藝,針對(duì)HCF1蛋白C端附近(1985-2035位殘基)的獨(dú)特表位進(jìn)行富集,確保了高特異性和低交叉反應(yīng)性。每批次產(chǎn)品均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè),符合實(shí)驗(yàn)室研究用標(biāo)準(zhǔn)。
應(yīng)用范圍建議
1. 蛋白-蛋白相互作用研究:利用IP技術(shù)分析HCF1與VP16或其他轉(zhuǎn)錄因子的復(fù)合物形成
2. 細(xì)胞周期調(diào)控研究:檢測(cè)不同細(xì)胞周期階段HCF1的表達(dá)水平變化
3. 表觀遺傳學(xué)分析:結(jié)合染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)技術(shù)研究HCF1對(duì)組蛋白修飾的影響
4. 病毒感染機(jī)制研究:分析HSV感染過程中HCF1的招募與功能
*本產(chǎn)品僅供研究使用,不用于診斷程序。
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