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產(chǎn)品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體(貨號(hào):A120-201P)是一款經(jīng)交叉吸附和抗原親和層析純化的多克隆二抗。該抗體可識(shí)別兔IgG的完整分子,包括重鏈和輕鏈,適用于ELISA、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)、免疫組織化學(xué)(IHC)和免疫印跡(WB)等多種檢測(cè)平臺(tái)。濃度為0.5 mg/ml,以PBS緩沖液配制,含0.09%疊d化鈉作為防腐劑。
技術(shù)參數(shù)
參數(shù) | 詳細(xì)信息
靶點(diǎn) | 兔IgG重鏈和輕鏈
反應(yīng)種屬 | 兔
宿主 | 山羊
克隆性 | 多克隆
抗體形式 | 完整IgG
亞型 | IgG
標(biāo)記 | 非偶聯(lián)(未 conjugated)
純化方式 | 抗原親和純化
抗原種屬 | 兔
濃度 | 0.5 mg/ml
儲(chǔ)存溫度 | 2 – 8 °C
有效期 | 收貨之日起2年
緩沖液 | 磷酸鹽緩沖液(PBS),含0.09%疊d化鈉
特異性與交叉反應(yīng)性
目標(biāo)識(shí)別
該抗體通過(guò)免疫電泳和ELISA驗(yàn)證,與兔IgG重鏈和輕鏈均有反應(yīng)。
同時(shí)識(shí)別其他兔免疫球蛋白(如IgA、IgM)所共有的輕鏈,因此適用于檢測(cè)所有含有κ或λ輕鏈的兔抗體分子。
非特異性排除
未檢測(cè)到針對(duì)兔非免疫球蛋白血清蛋白的抗體,背景風(fēng)險(xiǎn)低。
交叉反應(yīng)水平
與牛、雞、馬、人、小鼠、豬和大鼠IgG的交叉反應(yīng)率均低于1%,表明交叉吸附工藝有效。
注意事項(xiàng):該抗體仍可能與其他未測(cè)試物種(如非人靈長(zhǎng)類、狗、貓等)的IgG發(fā)生交叉反應(yīng),使用前建議自行驗(yàn)證。
應(yīng)用與推薦稀釋度
注意:并非所有列出的應(yīng)用均經(jīng)過(guò)生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)室的直接測(cè)試。以下稀釋度為起始參考范圍,用戶需根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行優(yōu)化。
應(yīng)用 | 推薦稀釋范圍 | 備注
ELISA | 1:1000 – 1:20,000 | 作為檢測(cè)抗體
ELISA(包被用) | 1:50 – 1:250 | 將抗體直接包被于微孔板時(shí)使用
免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC) | 1:100 – 1:1000 | 需配合熒光或酶標(biāo)記的二抗檢測(cè)系統(tǒng)
免疫組織化學(xué)(IHC) | 1:100 – 1:1000 | 適用于福爾馬林固定、冷凍切片等
免疫印跡(WB) | 1:1000 – 1:20,000 | 轉(zhuǎn)膜后作為檢測(cè)抗體
產(chǎn)品類型說(shuō)明
該抗體為抗重鏈和輕鏈(H+L)類型,與完整IgG分子反應(yīng),并識(shí)別輕鏈。其優(yōu)勢(shì)在于可以檢測(cè)到一抗的完整分子,靈敏度高;潛在劣勢(shì)是可能與一抗的輕鏈發(fā)生非預(yù)期結(jié)合(例如在IP-WB實(shí)驗(yàn)中,若一抗變性后產(chǎn)生輕鏈片段,會(huì)被本抗體識(shí)別)。此外,由于經(jīng)過(guò)了多物種交叉吸附,背景顯著降低,適用于包含多種物種樣本的多重檢測(cè)。
儲(chǔ)存與穩(wěn)定性
儲(chǔ)存條件:2–8°C,切勿冷凍。冷凍會(huì)導(dǎo)致抗體聚集和活性喪失。
有效期:自收貨之日起2年,在未受污染且按推薦條件儲(chǔ)存的情況下。
防腐劑:0.09%疊d化鈉。注意:疊d化鈉會(huì)抑制過(guò)氧化物酶活性,若需使用HRP標(biāo)記的三抗進(jìn)行檢測(cè),請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)前通過(guò)透析或超濾去除本抗體中的疊d化鈉;若僅作為一抗使用(后續(xù)用標(biāo)記三抗檢測(cè)),則疊d化鈉不影響,因?yàn)榻?jīng)多次洗滌后殘留量極低。
使用注意事項(xiàng)
1. 未直接標(biāo)記:本產(chǎn)品為非偶聯(lián)形式,必須配合酶標(biāo)或熒光標(biāo)記的抗山羊IgG二抗(如兔抗山羊、驢抗山羊)使用。
2. 物種交叉反應(yīng):雖然已吸附7種常見(jiàn)物種,但對(duì)其他物種(如豚鼠、倉(cāng)鼠、猴等)的IgG仍可能存在一定交叉反應(yīng),建議設(shè)置適當(dāng)?shù)年幮詫?duì)照。
3. 避免反復(fù)取用:建議分裝保存于無(wú)菌容器中,避免反復(fù)開(kāi)蓋造成污染或降解。
4. 疊d化鈉毒性:請(qǐng)注意疊d化鈉為有毒物質(zhì),操作時(shí)佩戴手套,按危險(xiǎn)化學(xué)品處理。
典型應(yīng)用場(chǎng)景
免疫印跡信號(hào)放大:使用兔來(lái)源的一抗(1:1000)檢測(cè)目標(biāo)蛋白,隨后用本抗體(1:5000)孵育,再以HRP標(biāo)記的抗山羊IgG檢測(cè)化學(xué)發(fā)光信號(hào)。
ELISA體系建立:在開(kāi)發(fā)兔抗體滴度測(cè)定試劑盒時(shí),本抗體作為通用的檢測(cè)二抗,與HRP標(biāo)記的三抗聯(lián)用。
免疫組化雙標(biāo):配合不同種屬的一抗(例如小鼠抗A蛋白 + 兔抗B蛋白),使用本抗體(非標(biāo)記)加上三抗體系檢測(cè)兔來(lái)源的一抗,另一通道使用直接標(biāo)記的抗小鼠二抗。
總結(jié)
本山羊抗兔IgG(H+L)抗體經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的交叉吸附和親和純化,在保持高靈敏度的同時(shí)大幅降低了與非目標(biāo)物種的交叉反應(yīng),是人、小鼠、大鼠等常見(jiàn)模型體系中檢測(cè)兔源一抗的可靠工具。其0.5 mg/ml的濃度和2年貨架期,配合ELISA、WB、IHC和ICC的寬泛稀釋范圍,可滿足常規(guī)至高通量檢測(cè)需求。用戶s次使用時(shí),建議針對(duì)具體實(shí)驗(yàn)進(jìn)行稀釋度的梯度優(yōu)化。
*本產(chǎn)品僅供研究使用,不用于診斷程序。
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