本抗體為艾美捷Bethyl Laboratories推出的兔源多克隆抗體（貨號：A300-604A），特異性識別CAP-D3蛋白的C末端區(qū)域（第1450位至C末端）。經(jīng)抗原親和純化，提供完整IgG分子形式，未偶聯(lián)任何標(biāo)記物（Unconjugated），濃度為200 µg/mL。適用于免疫沉淀（IP）和蛋白質(zhì)印跡（WB），反應(yīng)種屬為人。

產(chǎn)品規(guī)格與理化參數(shù)

參數(shù)項目 詳細(xì)規(guī)格

目標(biāo)抗原 CAP-D3（染色體相關(guān)蛋白D3）

反應(yīng)種屬 人

宿主來源 兔

克隆類型 多克隆

抗體形式 完整IgG

免疫原 第1448位至C末端之間的區(qū)域

亞型 IgG

偶聯(lián)物 無

純度 抗原親和純化

抗原物種 人

濃度 200 µg/mL

保存條件 2–8 °C

有效期限 自收貨起1年

緩沖體系 Tris緩沖鹽水，含0.1% BSA和0.09%疊d化鈉

濃度測定依據(jù)：采用比爾定律（Beer’s Law），標(biāo)準(zhǔn)為1 mg/mL IgG在280 nm波長處的吸光值（A280）為1.4。

抗原背景：CAP-D3與凝縮蛋白II復(fù)合物

CAP-D3（Chromosome-Associated Protein D3）是非SMC凝縮蛋白II復(fù)合物亞基D3，也稱為NCAPD3、hCAP-D3或hHCP-6。它是凝縮蛋白II復(fù)合物（condensin II complex）的五個亞基之一。

凝縮蛋白復(fù)合物的功能：

染色體凝縮：在細(xì)胞分裂過程中參與染色體的凝縮，通過促進(jìn)拓?fù)洚悩?gòu)酶I和II介導(dǎo)的正超螺旋和打結(jié)作用，實現(xiàn)DNA的壓縮

姐妹染色單體分離：確保有絲分裂和減數(shù)分裂中姐妹染色單體的正確分離

著絲粒解離：CAP-D3受蛋白磷酸酶2A（PP2A）調(diào)控，可能參與著絲粒的分辨（centromere resolution）

凝縮蛋白II復(fù)合物的組成：

兩個SMC亞基：SMC2和SMC4

三個非SMC亞基：CAP-D3、CAP-G2、CAP-H2

本抗體的靶向優(yōu)勢：識別CAP-D3的C末端區(qū)域（1450–1498），可檢測內(nèi)源性CAP-D3蛋白，適用于研究凝縮蛋白II復(fù)合物的組裝、細(xì)胞周期依賴性表達(dá)及磷酸化調(diào)控（C末端為PP2A調(diào)控區(qū)域）。

別名：CAPD3、hCAP-D3、hcp-6、hHCP-6、MCPH22（小頭畸形22型相關(guān)）。

生產(chǎn)與純化流程

1. 免疫原設(shè)計：選擇人CAP-D3蛋白C末端第1448位至第1498位之間的合成肽段或重組片段（該區(qū)域在CAP-D3中高度特異）

2. 免疫方案：免疫兔，誘導(dǎo)產(chǎn)生多克隆抗血清

3. 親和純化：將表位特異性肽段固定在固相支持物上，從抗血清中親和捕獲特異性抗體，去除與其他凝縮蛋白亞基或非特異性序列的交叉反應(yīng)

4. 濃度標(biāo)定：A280法，1 mg/mL對應(yīng)吸光值1.4

5. 緩沖體系：Tris緩沖鹽水（TBS）含0.1%牛血清白蛋白（BSA）作為穩(wěn)定蛋白，以及0.09%疊d化鈉作為防腐劑

注：本品濃度較低（200 µg/mL），但經(jīng)過親和純化后特異性高，推薦稀釋倍數(shù)在WB中可達(dá)1:2,000–1:10,000，IP中固定使用6 µg/毫克裂解液（需按體積計算用量）。

適用范圍與推薦使用條件

> 重要說明：本抗體的應(yīng)用經(jīng)驗集中于免疫沉淀（IP）和Western blot（WB）。使用前建議根據(jù)細(xì)胞系、細(xì)胞周期同步化狀態(tài)和表達(dá)豐度進(jìn)行預(yù)實驗優(yōu)化。

應(yīng)用技術(shù) 推薦使用條件 備注

免疫沉淀（IP） 6 µg抗體/毫克裂解液 按總蛋白質(zhì)量計算抗體用量

蛋白質(zhì)印跡（WB） 1:2,000 – 1:10,000 推薦起始稀釋度1:5,000

濃度換算：本品濃度為200 µg/mL，即0.2 µg/µL。進(jìn)行IP時，如需6 µg抗體/毫克裂解液，則需加入30 µL抗體原液/毫克裂解液。

儲存與穩(wěn)定性

儲存條件：

溫度：2–8°C（嚴(yán)禁冷凍）

防腐劑：0.09%疊d化鈉抑制細(xì)菌生長

穩(wěn)定蛋白：0.1% BSA有助于防止低濃度抗體（200 µg/mL）在儲存過程中吸附損失

分裝建議：本品濃度較低，不建議過度分裝，避免表面吸附。如需長期保存，可無菌分裝為50 µL/管，仍儲存于2–8°C

有效期：自收貨之日起12個月。

產(chǎn)品優(yōu)勢總結(jié)

特性 功能優(yōu)勢

C末端特異性 識別CAP-D3第1450–1498位區(qū)域，遠(yuǎn)離SMC相互作用域，避免干擾復(fù)合物研究

親和純化 高特異性，低背景，適合IP-MS等下游應(yīng)用

雙重應(yīng)用（IP+WB） 同一抗體可用于免疫沉淀和Western blot，實驗體系一致性強(qiáng)

寬稀釋范圍（WB 1:2,000–1:10,000） 即使?jié)舛容^低（200 µg/mL），效價仍然良好，節(jié)省抗體用量

含BSA穩(wěn)定劑 保護(hù)低濃度抗體在儲存期間的穩(wěn)定性，減少吸附損失

提供IP后WB優(yōu)化方案 輕鏈特異性二抗+5%正常豬血清可進(jìn)一步降低背景，提升信噪比

典型工作流程：

細(xì)胞培養(yǎng) → 紫杉醇同步化（可選）→ 收集細(xì)胞 → 核裂解 → 蛋白定量 →

IP（6–10 µg抗體/mg裂解液，4°C過夜）→ 蛋白A/G珠捕獲 → 洗滌 →

洗脫 → SDS-PAGE（6–8%凝膠）→ 轉(zhuǎn)膜（濕轉(zhuǎn)，PVDF）→ 封閉 →

一抗孵育（本抗體，1:5,000，過夜）→ 二抗孵育（抗兔H+L HRP或輕鏈HRP）→

ECL檢測 → 顯影分析