產(chǎn)品核心規(guī)格

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的抗CP110抗體（貨號A301-343A）是一款靶向中心體蛋白CP110（又稱CCP110、Cep110）的兔多克隆抗體。該抗體經(jīng)抗原親和純化，以Whole IgG形式提供，未偶聯(lián)標記，適用于免疫沉淀（IP）和免疫印跡（WB）檢測人源樣本。關鍵參數(shù)匯總?cè)缦拢?/span>

參數(shù) 詳細信息

靶點 CP110 / CCP110（中心體卷曲螺旋蛋白110 kDa）

反應性 人

應用 IP、WB

宿主 兔

克隆性 多克隆

格式 Whole IgG

濃度 200 µg/ml

純化方式 抗原親和純化

同種型 IgG

偶聯(lián)物 未偶聯(lián)

免疫原與表位特異性

該抗體通過針對人CP110蛋白內(nèi)部區(qū)域的特異性表位進行親和純化獲得。具體而言，識別表位位于第575位至第625位殘基之間（對應蛋白序列編號基于CAH18111.1，GeneID 9738）。免疫原為人CP110蛋白的該區(qū)域（600-650區(qū)間）。

技術要點：CP110分子量約110 kDa，其C末端包含卷曲螺旋結構域，參與蛋白二聚化和與中心體其它組分的相互作用。靶向575-625區(qū)域（位于CP110中部偏C端）的抗體可特異性識別全長CP110，同時避免與N端其他中心體蛋白發(fā)生交叉反應。該區(qū)域包含可能的磷酸化位點和SCF泛素化連接酶的識別基序，適用于研究CP110的細胞周期依賴性調(diào)控。生產(chǎn)中采用固相固定化表位親和純化，確保高特異性和低背景?？贵w濃度通過比爾定律測定，以1 mg/ml IgG在A280吸光度1.4為標準。

儲存與穩(wěn)定性

儲存條件：2 8°C

有效期：自收貨之日起1年

緩沖液組成：Tris緩沖鹽水，含0.1% BSA及0.09%疊d化鈉（防腐劑）

應用與實驗方案

通用方法

所有免疫印跡實驗均使用5% Milk-TBST作為封閉液和抗體稀釋液。一抗孵育條件為過夜（推薦4°C搖動孵育）。

檢測體系

實驗類型 推薦檢測抗體

細胞裂解液Western Blot 羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體（A120-101P）

免疫沉淀物Western Blot 抗兔IgG輕鏈HRP偶聯(lián)抗體，封閉緩沖液中添加5%正常豬血清（貨號S100-020）

推薦工作濃度

應用 推薦稀釋度/用量

免疫沉淀（IP） 6 µg/mg裂解物

免疫印跡（WB） 1:2000 1:10000

詳細實驗提示：

免疫印跡（WB）：推薦起始稀釋比為1:2000。CP110分子量約為110 kDa，在多數(shù)人細胞系（如HeLa、HEK293T、U2OS）中表達水平中等。若信號過強可提高至1:5000-1:10000；若信號弱可降至1:1000。建議使用HeLa細胞全裂解液作為陽性對照。注意CP110在細胞周期中表達水平波動：G1期較低，S期升高，G2/M期達到峰值，有絲分裂后期被降解。使用同步化細胞可獲得更一致的信號。轉(zhuǎn)膜后使用5% Milk-TBST室溫封閉1小時，一抗4°C孵育過夜，二抗室溫孵育1小時，ECL化學發(fā)光檢測。

免疫沉淀（IP）：按照6 µg抗體/mg總蛋白裂解物的比例加入抗體。由于CP110參與中心體復合物，推薦使用溫和裂解條件（如含50 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、1% NP-40、0.5%脫氧膽酸鈉及蛋白酶抑制劑）以保持蛋白相互作用。避免使用SDS或強變性劑?？贵w與裂解物在4°C旋轉(zhuǎn)孵育2-4小時或過夜，然后加入Protein A/G磁珠，繼續(xù)孵育1-2小時。用裂解緩沖液洗滌3-5次后，用1× SDS上樣緩沖液95°C加熱5分鐘洗脫免疫復合物。

IP后WB檢測：推薦使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯(lián)抗體（配合5%正常豬血清封閉）進行檢測。CP110分子量（~110 kDa）與兔IgG重鏈（~55 kDa）無重疊，因此使用常規(guī)抗重輕鏈二抗也可接受。但輕鏈特異性HRP可消除IP洗脫液中可能存在的重鏈降解片段或非特異性沉淀的背景信號，提高數(shù)據(jù)質(zhì)量。若使用常規(guī)二抗，目標條帶區(qū)域（100-120 kDa）通常不會受重鏈干擾。

別名

centriolar coiled-coil protein 110kDa、centriolar coiled-coil protein of 110 kDa、centrosomal protein CP110、centrosomal protein of 110 kDa、Cep110、CP110

產(chǎn)品優(yōu)勢總結

特異性表位親和純化：靶向575-625區(qū)域（CP110中部偏C端），區(qū)別于靶向N端或C端卷曲螺旋結構域的抗體，適用于檢測全長蛋白及可能的磷酸化/泛素化修飾形式。

寬工作濃度范圍：WB稀釋比1:2000-1:10000，兼容從高表達（同步化S/G2期細胞）到低表達（G1期細胞）樣本的相對定量分析。

高效IP性能：6 µg/mg裂解物的推薦用量確保高效捕獲內(nèi)源性CP110及其互作蛋白（如Cep97、Cep290、SCF復合物組分）。

親和純化高濃度：200 µg/ml濃度，經(jīng)抗原親和純化去除血清蛋白和非特異性抗體，確保低背景和高信噪比。

穩(wěn)定儲存：2-8°C年效期，無需分裝或-20°C冷凍，避免反復凍融導致的效價損失，保障批次間實驗重現(xiàn)性。