產(chǎn)品概述

本產(chǎn)品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的針對人源AMPK alpha 1蛋白催化亞基的兔多克隆抗體，貨號A300-507A?？贵w以未標(biāo)記的完整IgG形式提供，適用于免疫組化（IHC）、免疫沉淀（IP）和蛋白質(zhì)印跡（WB）應(yīng)用。該抗體經(jīng)抗原親和純化，特異性識別AMPK alpha 1蛋白中部區(qū)域（第375-425位氨基酸殘基之間的表位），對人源和小鼠源AMPK alpha 1均有反應(yīng)性，可用于能量代謝調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及相關(guān)疾病（如糖尿病、肥胖、癌癥）研究。

核心參數(shù)

參數(shù) 詳細(xì)信息

靶標(biāo) AMPK alpha 1（PRKAA1）

反應(yīng)種屬 小鼠、人

應(yīng)用 IHC, IP, WB

宿主 兔

克隆性 多克隆

形式 完整IgG

免疫原區(qū)域 第375-425位氨基酸（參考序列BAA36547.1）

同型 IgG

偶聯(lián)物 未偶聯(lián)

純度 抗原親和純化

濃度 1000 µg/ml

保存條件 2 8 °C

有效期 收貨后1年

緩沖液 Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊d化鈉

制備與純化

本抗體采用固相固定化技術(shù)，使用特異性針對AMPK alpha 1蛋白的表位進(jìn)行親和純化。具體而言，識別表位定位于人源5'-AMP活化蛋白激酶催化亞基alpha-1鏈（AMPK alpha 1）的第375至425位氨基酸區(qū)域（基于GeneID 5562，序列編號BAA36547.1）。免疫球蛋白濃度通過比爾定律測定，設(shè)定1 mg/mL IgG在A280波長的吸光度為1.4。

應(yīng)用與推薦稀釋度

蛋白質(zhì)印跡（Western Blot, WB）

推薦稀釋度：1:10,000 – 1:25,000

操作規(guī)范：

所有WB實(shí)驗(yàn)均使用5% Milk-TBST作為封閉液和抗體稀釋液

一抗孵育條件：過夜孵育

細(xì)胞裂解液的WB檢測：使用山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號A120-101P）

免疫沉淀物的WB檢測：使用HRP標(biāo)記的抗兔IgG輕鏈抗體，并在封閉緩沖液中添加5%正常豬血清（貨號S100-020）

免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）

推薦用量：6 µg抗體 / mg裂解液蛋白

免疫組化（Immunohistochemistry, IHC）

推薦稀釋度：1:1000 – 1:5000

抗原修復(fù)： 對于福爾馬林固定、石蠟包埋（FFPE）組織切片，推薦使用檸檬酸緩沖液（pH 6.0）進(jìn)行熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)。

產(chǎn)品特性說明

特異性與靈敏度

本抗體經(jīng)親和純化，特異識別AMPK alpha 1蛋白的第375-425位區(qū)域，該區(qū)域位于激酶結(jié)構(gòu)域與C端調(diào)控結(jié)構(gòu)域之間，避免了與其他AMPK家族成員（如AMPK alpha 2）的高度同源區(qū)段的交叉反應(yīng)。由于為多克隆抗體，可識別目標(biāo)抗原上的多個(gè)表位，具有較高的檢測靈敏度，適用于檢測低表達(dá)水平的AMPK alpha 1。經(jīng)驗(yàn)證，抗體對人源和小鼠源AMPK alpha 1均有良好的反應(yīng)性，可用于跨物種實(shí)驗(yàn)。

工作濃度與經(jīng)濟(jì)性

WB推薦稀釋范圍高達(dá)1:10,000-1:25,000，屬于高稀釋度抗體，單次實(shí)驗(yàn)每毫升抗體可檢測大量膜條，顯著降低單樣本檢測成本。IHC推薦稀釋范圍為1:1000-1:5000，可根據(jù)組織類型和固定條件靈活調(diào)整。IP推薦用量明確為6 µg/mg裂解液，便于用戶計(jì)算所需抗體量，避免浪費(fèi)。

儲存穩(wěn)定性

在2-8°C條件下可穩(wěn)定保存1年（自收貨之日起）。緩沖液中含0.09%疊d化鈉作為防腐劑，注意疊氮化物會抑制過氧化物酶活性，若計(jì)劃進(jìn)行HRP偶聯(lián)二抗檢測，需在實(shí)驗(yàn)前通過透析或脫鹽柱去除。

別名： 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-1; ACACA kinase; acetyl-CoA carboxylase kinase; AMPK alpha 1; AMPK subunit alpha-1; AMPKa1; HMGCR kinase; tau-protein kinase PRKAA1

核心功能：

能量代謝調(diào)控：AMPK是細(xì)胞內(nèi)能量狀態(tài)的中央感受器。當(dāng)ATP水平下降、AMP/ATP比值升高時(shí)（如饑餓、運(yùn)動、缺氧等代謝應(yīng)激），AMPK被上游激酶（如LKB1、CaMKK2）磷酸化激活。激活的AMPK磷酸化下游靶蛋白，關(guān)閉合成代謝通路（如脂肪酸合成、膽固醇合成、蛋白質(zhì)合成），同時(shí)開啟分解代謝通路（如脂肪酸氧化、糖酵解、自噬），以恢復(fù)ATP水平。

脂肪酸與膽固醇合成調(diào)控：AMPK alpha 1直接磷酸化并失活乙酰輔酶A羧化酶（ACC）和羥甲基戊二酰輔酶A還原酶（HMGCR），從而抑制脂肪酸和膽固醇的生物合成。這一機(jī)制使其成為代謝綜合征、非酒精性脂肪肝、高脂血癥的藥物靶點(diǎn)。

細(xì)胞生長與自噬：通過磷酸化TSC2和Raptor抑制mTORC1通路，抑制蛋白質(zhì)合成并誘導(dǎo)自噬。

葡萄糖穩(wěn)態(tài)：增強(qiáng)胰島素敏感性，促進(jìn)葡萄糖攝取（如通過促進(jìn)GLUT4轉(zhuǎn)位）。

組織分布與病理意義：

AMPK alpha 1在全身廣泛表達(dá)，而alpha 2主要在骨骼肌和心臟中高表達(dá)。PRKAA1基因多態(tài)性與2型糖尿病、肥胖、高血壓等代謝性疾病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。AMPK活性下降是胰島素抵抗和衰老的標(biāo)志之一。此外，AMPK在多種癌癥中表現(xiàn)出雙向作用：在早期抑制腫瘤生長（通過抑制mTOR誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯），但在代謝應(yīng)激下可幫助腫瘤細(xì)胞適應(yīng)低營養(yǎng)環(huán)境，因此成為癌癥治療的熱點(diǎn)靶點(diǎn)。