產(chǎn)品概述

本產(chǎn)品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊抗小鼠免疫球蛋白G（IgG）重鏈和輕鏈的多克隆抗體，貨號(hào)A90-116P?？贵w以未標(biāo)記的完整IgG形式提供，可識(shí)別小鼠IgG的重鏈和輕鏈，同時(shí)與其他小鼠免疫球蛋白（IgA、IgM等）的輕鏈有交叉反應(yīng)。該抗體適用于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）、免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）、免疫組化（IHC）及蛋白質(zhì)印跡（WB）等多種檢測(cè)平臺(tái)，作為通用型二抗或捕獲抗體使用，廣泛應(yīng)用于小鼠免疫球蛋白的定性和定量分析。

核心參數(shù)

參數(shù) 詳細(xì)信息

靶標(biāo) 小鼠IgG重鏈和輕鏈

反應(yīng)種屬 小鼠

應(yīng)用 ELISA, ICC, IHC, WB

宿主 山羊

克隆性 多克隆

形式 完整IgG

同型 IgG

偶聯(lián)物 未偶聯(lián)

純度 抗原親和純化

濃度 1 mg/ml

保存條件 2 8 °C

有效期 收貨后2年

緩沖液 磷酸鹽緩沖液（PBS），含0.09%疊d化鈉

制備與純化

本抗體采用抗原親和層析法進(jìn)行純化。將小鼠IgG抗原偶聯(lián)至瓊脂糖凝膠珠上，裝柱后使山羊抗血清通過(guò)親和柱，特異性結(jié)合的抗體被洗脫收集。免疫球蛋白濃度通過(guò)比爾定律測(cè)定，設(shè)定1 mg/mL IgG在A280波長(zhǎng)的吸光度為1.4。

經(jīng)免疫電泳和ELISA驗(yàn)證，該抗體與小鼠IgG具有特異性反應(yīng)，同時(shí)可與其它小鼠免疫球蛋白（IgA、IgM、IgD、IgE）共有的輕鏈結(jié)合。未檢測(cè)到針對(duì)非免疫球蛋白血清蛋白的抗體。該抗體可能與其他物種（如大鼠、人、兔等）的IgG發(fā)生交叉反應(yīng)，具體需由用戶驗(yàn)證。

應(yīng)用與推薦稀釋度

下列推薦稀釋度為起始參考值，用戶需根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行優(yōu)化。部分應(yīng)用尚未經(jīng)我們實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格驗(yàn)證。

應(yīng)用 推薦稀釋度 備注

ELISA 1:1000 – 1:30,000（檢測(cè)用）<br>1:100 – 1:500（包板用） 作為檢測(cè)抗體時(shí)按高稀釋度使用；作為包被抗體時(shí)按低稀釋度使用

免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC） 1:200 – 1:2,000 適用于細(xì)胞爬片或培養(yǎng)細(xì)胞的固定后染色

免疫組化（IHC） 1:200 – 1:2,000 適用于石蠟切片或冰凍切片，需優(yōu)化封閉條件

蛋白質(zhì)印跡（WB） 1:1,000 – 1:30,000 用于檢測(cè)轉(zhuǎn)移至膜上的小鼠IgG或含IgG融合蛋白

產(chǎn)品特性說(shuō)明

特異性與交叉反應(yīng)

本抗體為抗重鏈和輕鏈（H+L）類型，識(shí)別小鼠IgG的完整分子。其優(yōu)勢(shì)在于可同時(shí)結(jié)合IgG的重鏈（約50 kDa）和輕鏈（約25 kDa），因此無(wú)論在小鼠IgG的天然構(gòu)象還是變性還原條件下均能有效識(shí)別。由于輕鏈在小鼠各免疫球蛋白亞類中高度保守，該抗體也會(huì)與小鼠IgA、IgM等其他免疫球蛋白發(fā)生反應(yīng)，這一點(diǎn)在檢測(cè)含有多種免疫球蛋白的樣本時(shí)需注意。

可能存在的種屬交叉反應(yīng)：基于序列同源性，該抗體可能與其它哺乳動(dòng)物（如大鼠、人、兔）的IgG或有交叉，建議在異種樣本中使用時(shí)設(shè)置適當(dāng)?shù)年幮詫?duì)照和特異性驗(yàn)證。

未偶聯(lián)形式的靈活性

本抗體為未偶聯(lián)形式（Unconjugated），用戶可根據(jù)下游檢測(cè)需要自行標(biāo)記酶（HRP、AP）、生物素、熒光染料（FITC、Cy3、Alexa Fluor系列）或納米顆粒。未偶聯(lián)抗體避免了預(yù)標(biāo)記可能導(dǎo)致的活性損失，提供了最大的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)靈活性。

儲(chǔ)存穩(wěn)定性

在2-8°C條件下可穩(wěn)定保存2年（自收貨之日起）。緩沖液為含0.09%疊d化鈉的PBS，疊d化鈉作為防腐劑可抑制微生物生長(zhǎng)。注意：若計(jì)劃將本抗體用于細(xì)胞培養(yǎng)或體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，需通過(guò)透析或脫鹽柱去除疊d化鈉，因其對(duì)細(xì)胞具有毒性。

本抗體常用于以下場(chǎng)景：

ELISA：作為檢測(cè)抗體，夾心法檢測(cè)小鼠單克隆抗體雜交瘤上清中的抗體含量。

蛋白質(zhì)印跡：檢測(cè)表達(dá)的重組小鼠IgG融合蛋白或免疫沉淀后的小鼠IgG。

免疫組化/免疫細(xì)胞化學(xué)：檢測(cè)小鼠來(lái)源的一抗在組織或細(xì)胞上的結(jié)合（需注意一抗宿主種屬與二抗匹配）。

質(zhì)量控制：定量分析生物制品（如治療性單抗）中殘留的小鼠IgG雜質(zhì)。

總結(jié)：本山羊抗小鼠IgG（H+L）親和純化抗體具有寬反應(yīng)譜、高純度和長(zhǎng)有效期（2年）的特點(diǎn)，適用于ELISA、ICC、IHC和WB等多種免疫檢測(cè)技術(shù)?？贵w濃度為1 mg/ml，推薦稀釋度范圍寬廣（WB/ELISA最高可達(dá)1:30,000），兼顧經(jīng)濟(jì)性和信號(hào)強(qiáng)度。作為未偶聯(lián)形式，用戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活標(biāo)記不同檢測(cè)標(biāo)簽。需注意該抗體識(shí)別輕鏈，因此會(huì)與小鼠其他免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)；同時(shí)可能與其他物種IgG有交叉，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)需酌情驗(yàn)證和優(yōu)化。本抗體是檢測(cè)總小鼠IgG、篩選雜交瘤克隆、分析免疫沉淀復(fù)合物以及進(jìn)行小鼠免疫應(yīng)答研究的基礎(chǔ)工具之一。