產(chǎn)品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的組蛋白H3多克隆抗體（貨號A300-823A）是一款針對組蛋白H3蛋白的兔源多克隆抗體，適用于小鼠及人類樣本中組蛋白H3的檢測。該抗體經(jīng)抗原親和純化，以未標記的完整IgG形式提供，廣泛應(yīng)用于免疫印跡、免疫沉淀及免疫組織化學(xué)等實驗場景。

產(chǎn)品核心規(guī)格

參數(shù) 詳細信息

靶標 組蛋白H3

反應(yīng)性 小鼠、人類

宿主 兔

克隆性 多克隆

免疫原 第86位氨基酸至C端區(qū)域

抗體形式 完整IgG

同型 IgG

偶聯(lián)物 未偶聯(lián)

純度 抗原親和純化

抗原種屬 人類

濃度 200 µg/ml

緩沖液 Tris緩沖鹽水，含0.1% BSA及0.09%疊d化鈉

儲存條件 2 - 8 °C

保質(zhì)期 到貨后1年

免疫原與特異性

A300-823A抗體采用固定在固相載體上的組蛋白H3特異性表位進行親和純化。該抗體識別的表位位于人類組蛋白H3蛋白的第100位氨基酸至C端（第135位氨基酸）之間（參考編號NP_003520.1，GeneID 8350）。免疫球蛋白濃度依據(jù)比爾定律測定，其中1 mg/mL IgG在A280波長的吸光度為1.4。

應(yīng)用方法與推薦稀釋比例

免疫印跡（WB）

推薦稀釋范圍為1:2,000至1:10,000。所有免疫印跡分析均使用5% Milk-TBST作為封閉液及抗體稀釋液，一抗孵育過夜。

重要提示：細胞裂解液的Western blot檢測采用山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號A120-101P）。免疫沉淀物的Western blot檢測則使用兔IgG輕鏈HRP偶聯(lián)抗體，并在封閉緩沖液中加入5%正常豬血清（貨號S100-020）。

免疫沉淀（IP）

推薦用量為6 µg抗體/mg細胞裂解物。

免疫組織化學(xué)（IHC）

推薦稀釋范圍為1:100至1:500。對于福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片，建議使用pH 6.0的檸檬酸鹽緩沖液或pH 9.0的Tris-EDTA緩沖液進行抗原修復(fù)。

免疫組織化學(xué)-免疫熒光（IHC-IF）

推薦稀釋范圍為1:100至1:500。

靶點背景：組蛋白H3

別名

H3 histone family member A、H3/A、H3FA、histone 1 H3a、histone cluster 1 H3a、histone H3.1、histone H3/a、histone H3/b、histone H3/c、histone H3/d、histone H3/f、histone H3/h、histone H3/i、histone H3/j、histone H3/k、histone H3/l

儲存與穩(wěn)定性

抗體應(yīng)在2-8°C條件下儲存，自到貨之日起可穩(wěn)定保存1年。緩沖液中含0.09%疊d化鈉作為防腐劑，含0.1% BSA作為穩(wěn)定劑。請勿冷凍，以免影響抗體活性。

操作注意事項

1. 免疫印跡檢測：檢測免疫沉淀物時務(wù)必使用輕鏈特異性二抗，以避免重鏈信號的干擾。添加正常豬血清可降低非特異性背景。

2. 免疫組織化學(xué)：抗原修復(fù)步驟對FFPE切片的染色效果至關(guān)重要，建議根據(jù)組織類型優(yōu)化修復(fù)條件（pH 6.0或pH 9.0）。

3. 抗體稀釋：建議使用含5% Milk-TBST的封閉液進行稀釋，以獲得最佳信噪比。

4. 質(zhì)量控制：每批次抗體均經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制測試，確保批間一致性。

應(yīng)用場景建議

表觀遺傳學(xué)研究：作為總組蛋白H3的內(nèi)參抗體，用于檢測各修飾位點抗體的歸一化

染色質(zhì)免疫沉淀：適用于ChIP及ChIP-seq實驗中的組蛋白H3富集

組織定位：通過IHC/IHC-IF實現(xiàn)組蛋白H3在組織切片中的空間分布分析

蛋白互作：結(jié)合免疫沉淀技術(shù)，研究組蛋白H3與其他染色質(zhì)調(diào)控因子的相互作用