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豬傳染性胸膜肺炎ELISA抗體檢測試劑盒說明書
【獸藥名稱】
通用名 豬傳染性胸膜肺炎ELISA抗體檢測試劑盒
商品名 無
英文名 Actinobacillus pleuropneumoniae ELISA Antibody Kit
漢語拼音 Zhuxiongmofeiyanfangxianganjun ELISA Kangtijiance Shijihe
【主要成分與含量】
組分 | 含量 | 含量 | 含量 |
(1)抗原包被板 | 1板 | 2板 | 5板 |
(2)陽性對照 | 1ml*1(藍蓋) | 1.5ml*1 | 2ml*1 |
(3)陰性對照 | 1ml*1(紅蓋) | 1.5ml*1 | 2ml*1 |
(4)酶標記物 | 11ml*1(綠蓋) | 25ml*1 | 60ml*1 |
(5)樣品稀釋液 | 25ml*1(藍蓋) | 50ml*1 | 150ml*1 |
(6)20倍濃縮洗滌液 | 25ml*1 (黃蓋) | 50ml*1 | 150ml*1 |
(7)底物顯色液 | 11ml*1(棕蓋) | 20ml*1 | 50ml*1 |
(8)終止液 | 6ml*1 (紅蓋) | 11ml*1 | 26ml*1 |
(9)血清稀釋板 | 1板 | 2板 | 5板 |
(10)說明書 | 1份 | 1份 | 1份 |
【作用與用途】 用于檢測豬血清中的豬傳染性胸膜肺炎抗體。
【樣品處理】 取豬全血,待血液凝固后4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘,收集上清。也可采集血液,待凝固后自然析出血清,要求血清清亮,無溶血。
【洗滌液配制】 使用前,將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水或純水作20倍稀釋(例如:10ml的濃縮洗滌液加190ml純水),混勻,置2~8℃可保存7日。
【樣品初步稀釋】 先將待檢血清樣品在血清稀釋板中按1:200的比例稀釋(例如:在血清稀釋板中先加入300μl樣品稀釋液,再加1.5μl待檢血清)。不同的樣品要注意換吸頭。樣品在稀釋過程中要充分混勻。
【操作步驟】
1 取抗原包被板(根據(jù)樣品多少,可拆開分次使用),用稀釋好的洗滌液洗板1次(300µl/孔)后拍干。在抗原包被板中分別加入稀釋好的血清樣品100μl,充分混勻。對照各設2孔,待檢樣品設1孔,輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),置25℃溫箱孵育30分鐘。
2 棄去孔中的液體,每孔加入稀釋好的洗滌液300μl,棄去洗滌液,并在吸水紙上拍干,共計洗滌5次。
3 每孔加酶結(jié)合物100μl,置室溫25℃溫箱孵育30分鐘。
4 棄去孔中的液體,洗滌5次,方法同2。
5 每孔先加入底物顯色液100μl,置室溫(20~25℃)下避光顯色10分鐘。
6 每孔加終止液50μl,混勻后測定結(jié)果。
【結(jié)果判定】
在酶標儀上測各孔的OD450nm值。試驗成立的條件是:陰性對照孔平均OD450nm值應<0.5,陽性對照孔平均OD450nm值應>0.6。
S為樣品孔OD450nm值,P為陽性對照孔平均OD450nm值,計算樣品S/P值。
若S/P值≥0.3時判為陽性;若S/P值<0.3時判為陰性。
【注意事項】
(1) 各液體試劑使用前應充分搖勻。
(2) 不同批號試劑盒的試劑組份不能混用。
(3) 酶標板拆封后應避免受潮。
(4) 使用者應遵守國家有關(guān)無害化處理等相關(guān)法律、法規(guī)。
(5) 使用完畢后,將所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都進行滅活處理。
【規(guī)格】 96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒
【貯藏與有效期】 2~8℃保存,有效期為12個月。
僅供科研使用
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