目錄:廣州億寧生物技術有限公司>>細胞培養(yǎng)>>消化酶>> NC0206-1友康｜特異型干細胞溫和消化酶
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 500ml |
|---|---|---|---|
| 貨號 | NC0206-1 |
貨號：NC0206-1 | 規(guī)格：500 mL/瓶
新一代無動物源、化學成分明確的干細胞消化液，專為MSC、iPSC等貼壁干細胞的無血清培養(yǎng)體系設計，采用多組分復合酶靶向解離機制，實現溫和、高效、高活率的細胞傳代。
| 項目 | 參數 |
|---|---|
| 產品名稱 | 特異型干細胞溫和消化酶 |
| 品牌 | 友康生物（YOCON） |
| 貨號 | NC0206-1（同系列另有100 mL裝NC0206-2） |
| 規(guī)格 | 500 mL/瓶 |
| 保存溫度 | -20℃，避光保存 |
| 有效期 | 未開封12個月 |
| 適用范圍 | 人源及動物源貼壁干細胞（MSC、iPSC等）的日常傳代、凍存前處理及下游應用準備 |
| 適用場景 | 無血清培養(yǎng)體系、臨床級細胞制備、3D培養(yǎng)體系及對細胞表面標志物完整性要求較高的應用（如外泌體制備） |
| 法規(guī)狀態(tài) | 無動物源、化學成分明確，符合GMP級細胞制備要求，已獲FDA DMF備案（備案號：37790） |
| 目錄價 | ￥1028/500 mL（僅供參考） |
傳統(tǒng)胰-酶（Trypsin）屬于非特異性蛋白水解酶，會無差別攻擊細胞間連接蛋白（如E-cadherin）、細胞-基質粘附蛋白（如integrin）以及細胞外基質（ECM）成分，在拆解細胞的同時也會破壞細胞膜表面的關鍵受體和信號蛋白，導致重新貼壁能力弱、恢復周期長，對干細胞而言還可能引發(fā)非預期的應激反應或分化。
干細胞溫和消化酶的核心創(chuàng)新在于從“非特異性蛋白水解"轉向“靶向細胞連接解離"，通過優(yōu)化的多組分復合酶配方，主要作用于細胞外基質和特定的細胞間連接蛋白，最大限度保留細胞膜完整性、表面受體及功能蛋白，顯著降低消化應激。
干細胞溫和消化酶的技術突破點包括：
選擇性酶切：針對細胞連接蛋白特異性更高，減少對整聯(lián)蛋白等貼壁關鍵蛋白的破壞
pH與溫度穩(wěn)定性優(yōu)化：在37℃下活性平穩(wěn)，避免因局部溫度不均導致的消化不均
無動物源成分：避免外源病毒、支原體等污染風險
作用溫和持久：細胞逐漸變圓、間隙擴大，而非瞬間脫落，給予操作者充分的觀察與控制時間
| 賣點 | 優(yōu)勢說明 |
|---|---|
| ?? 定向精準消化，保護細胞功能 | 采用多組分復合酶體系，靶向作用于細胞外基質和細胞間連接蛋白，精準解離細胞，最大限度保留胞膜功能蛋白完整性。消化后細胞活率≥90%，24h細胞貼壁率更快，擴增能力優(yōu)于傳統(tǒng)酶類 |
| ? 高容錯性，操作友好 | 常規(guī)消化2-5分鐘，極限消化時間長達15-30分鐘仍保持高活率（持續(xù)消化30min細胞擴增倍數仍可達9倍，活率維持在90%以上）。對操作人員的技能要求更低，特別適合大規(guī)模生產場景 |
| ?? 無需終止，簡化步驟 | 消化后不需添加胰-酶抑制劑，僅需用新鮮完-全培養(yǎng)基或細胞培養(yǎng)上清稀釋即可，極大降低使用成本，節(jié)省操作步驟 |
| ?? 無人源無動物源，合規(guī)性高 | 人工重組體系，無人源無動物源，所有組分明確，成分完-全限定。內毒素＜0.25 EU/mL，已獲美國FDA DMF備案（備案號：37790），可支持中美聯(lián)合細胞藥物申報 |
| ?? 保存更便捷 | 產品為即用型液體，可直接使用，無需配制?！??L?】 |
| ?? 適配性強 | 適用于無血清培養(yǎng)基體系，完-美適配NC0106、NC0107等系列培養(yǎng)基。消化后僅需用PBS直接稀釋離心去除即可，無需終止 |
| 應用領域 | 說明 |
|---|---|
| ?? 間充質干細胞（MSC）傳代 | 專為人源及動物源間充質干細胞（臍帶、骨髓、脂肪來源）的日常傳代和消化，細胞活率更高，表型正常，后續(xù)傳代不受影響 |
| ?? iPSC/ESC維持培養(yǎng) | 適用于誘導多能干細胞（iPSC）和胚胎干細胞（ESC）的溫和消化傳代，最大限度保護多能性，降低非預期分化風險 |
| ?? 臨床級細胞制備 | 無動物源成分，GMP體系適配，滿足干細胞藥物申報的嚴苛要求，已獲FDA DMF備案可支持中美聯(lián)合申報 |
| ?? 外泌體制備 | 對細胞表面標志物完整性要求較高的應用場景（如外泌體收獲），避免消化過程中表面蛋白受損，保障外泌體質量 |
| ?? 大規(guī)模工業(yè)化生產 | 極限消化時間長，容錯性高，解決了傳統(tǒng)胰-酶在大規(guī)模培養(yǎng)中消化過度、難以控制的工藝難題，降低細胞培養(yǎng)失敗率 |
| ?? 3D細胞培養(yǎng) | 適用于微載體、水凝膠等3D培養(yǎng)體系中干細胞的溫和解離，維持細胞活性與功能 |
| ?? 通用貼壁細胞傳代 | 除干細胞外，亦可應用于需溫和處理的各類貼壁細胞系的常規(guī)傳代消化 |
| 對比指標 | 傳統(tǒng)胰-酶 | 特異型干細胞溫和消化酶（NC0206-1） |
|---|---|---|
| 消化機制 | 非特異性蛋白水解，無差別攻擊細胞膜蛋白 | 靶向細胞連接解離，精準切割，保護膜蛋白 |
| 正常消化活率 | 約83% | 95%以上 |
| 超時消化活率 | 約60% | 95%以上 |
| 極限消化15min活率 | 0～10% | 90%以上 |
| 極限消化30min活率 | 無法收獲細胞 | 活率＞90%，細胞數仍可達9倍 |
| 消化后是否需要終止 | 是（需血清或抑制劑） | 否（培養(yǎng)上清稀釋即可） |
| 保存溫度 | -20℃，需冷凍 | 2-8℃，即取即用 |
| 動物源成分 | 含豬/牛源成分 | 無動物源，化學成分完-全限定 |
| 動物病毒檢測 | 高成本（需檢測豬口蹄疫、牛瘋牛病等） | 零-成-本（無動物源成分） |
| 藥物申報難度 | 雜質組分不明，難以證明殘留影響 | 成分明確，均為人工合成組分，申報難度小 |
| FDA DMF備案 | 不支持 | 已獲FDA DMF備案（37790） |
| 最佳適配體系 | 含血清體系 | 無血清培養(yǎng)體系 |
| 配套產品 | 品牌/貨號 | 用途 | 推薦理由 |
|---|---|---|---|
| 間充質干細胞無血清培養(yǎng)基 | 友康 / NC0106+NC0106.S | MSC擴增與傳代 | 完-美適配，無血清體系下可配套使用，消化后無需終止，PBS稀釋離心即可 |
| GMP級玻璃化細胞凍存液 | 友康 / NC1011 | 干細胞長期保存 | 無蛋白、無DMSO、無動物源，成分明確，無需程序降溫，與消化酶體系配套使用 |
| DPBS（無鈣鎂） | 友康 / BS0301 | 細胞清洗 | 傳代前清洗細胞，去除殘留血清蛋白和鈣鎂離子，為消化創(chuàng)造最佳條件 |
| 臍帶MSC原代分離套裝 | 友康 / NC0103+NC0103.S | MSC原代分離 | 從組織塊中原代分離MSC，與消化酶配合使用 |
| GMP級細胞凍存液 | 友康 / NC1010 | 細胞凍存 | 配合消化酶用于細胞收獲后的GMP級別凍存 |
以T25培養(yǎng)瓶為例，細胞融合度達80-90%時進行傳代：
清洗：吸去舊培養(yǎng)基，加入5 mL無鈣鎂的DPBS（如友康BS0301），輕輕晃動后吸去。若原用含血清培養(yǎng)基，需清洗3次；若為無血清培養(yǎng)基，清洗1次即可。
消化：加入1 mL特異型干細胞溫和消化酶，在室溫下消化。
觀察：約2-5分鐘，在顯微鏡下觀察到細胞變圓、間隙擴大，輕拍瓶壁細胞呈流沙狀脫落。
終止：立即加入2 mL新鮮完-全培養(yǎng)基或細胞培養(yǎng)上清進行稀釋。（無需額外添加胰-酶抑制劑）
收集：將細胞懸液轉移至離心管，300g（約1300rpm）離心5分鐘。
重懸：吸去上清，用新鮮培養(yǎng)基（細胞傳代）或細胞凍存液（細胞凍存）重懸細胞，按所需比例接種。
| 貨號 | 規(guī)格 | 保存溫度 | 目錄價 | 適用場景 |
|---|---|---|---|---|
| NC0206-1 | 500 mL/瓶 | -20℃，避光 | ￥1028 | 大批量、GMP級細胞生產、日常傳代 |
| NC0206-2 | 100 mL/瓶 | -20℃，避光 | ￥262 | 常規(guī)科研使用、小規(guī)模驗證 |
本品經友康生物嚴格按照GMP標準生產，主要質控指標如下：
| 質控項目 | 標準 |
|---|---|
| 外觀 | 無色透明液體 |
| pH（25℃） | 7.0-7.4 |
| 滲透壓 | 270-350 mOsm/Kg |
| 內毒素 | ＜0.25 EU/mL |
| 無菌檢測 | 符合《中國藥典》無菌檢測要求 |
| 支原體檢測 | 陰性 |
| 細胞毒性 | 符合USP生物相容性標準 |
| 穩(wěn)定性 | 有效期后1個月內仍保持各項性狀穩(wěn)定性 |
1. 儲存要求：請嚴格于 -20℃ 避光保存，可保持產品穩(wěn)定性。
2. 溫度警告：請勿將產品置于2-8℃長期保存，否則可能導致蛋白酶活性下降或失活，影響消化效果。請勿反復凍融，凍融會導致蛋白活性下降、消化時間延長。
3. 耗材匹配：下表為不同規(guī)格培養(yǎng)瓶的推薦使用量：
| 培養(yǎng)瓶規(guī)格 | 推薦消化酶用量 | 推薦稀釋液體積 |
|---|---|---|
| T25 | 1 mL | 2 mL |
| T75 | 2-3 mL | 4-6 mL |
| T175 | 5-7 mL | 10-14 mL |
| 多層細胞工廠 | 按底面積比例調整 | 按底面積比例調整 |
4. 常見問題解答：
為什么使用干細胞溫和消化酶？ 消化過度是干細胞培養(yǎng)失敗的主要原因之一。在大規(guī)模生產中，消化過度尤其難以控制。溫和消化酶極限消化時間長達15-30分鐘，活率仍保持90%以上，顯著降低操作風險。
離心后可以不洗直接傳代嗎？ 不可以。殘留的消化酶會影響后續(xù)干細胞的貼壁和形態(tài)。
用含血清和無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，使用上有什么區(qū)別？ 相同之處在于消化前都需用無鈣鎂緩沖液沖洗細胞。不同之處在于：若使用無血清培養(yǎng)基，清洗1次即可；若使用血清培養(yǎng)基，必須連續(xù)清洗3次，確保無血清殘留，否則消化時間會變長。
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