實(shí)驗(yàn)室純水主要應(yīng)用生命科學(xué)、分析及常規(guī)應(yīng)用領(lǐng)域,結(jié)合用戶的需求不同,實(shí)驗(yàn)室純水的應(yīng)用領(lǐng)域與水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)各不相同,常見的實(shí)驗(yàn)室用水包括(不限于)下表列舉內(nèi)容:
| 應(yīng)用 | 一級水 (超純水) | 二級水 (EDI水) | 三級水 (RO水) |
| 緩沖液和培養(yǎng)基的制備 | √ | ||
| 電化學(xué) | √ | √ | |
| 環(huán)境測試艙和植物生長室 | √ | ||
| 蒸餾器進(jìn)水 | √ | ||
| 超純水系統(tǒng)進(jìn)水 | √ | √ | |
| 火焰原子吸收光譜法 (F-AAS) | √ | ||
| 氣質(zhì)聯(lián)用法 (GC-MS) | √ | ||
| 普通化學(xué) | √ | ||
| 石墨爐原子吸收分光光度法 (GF-AAS) | √ | ||
| 玻璃器皿清洗 | √ | √ | |
| 高效液相色譜法 (HPLC) | √ | ||
| 電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法 (ICP-AES) | √ | ||
| 電感耦合等離子體質(zhì)譜法 (ICP-MS) | √ | ||
| 離子色譜法 (IC) | √ | ||
| 定性分析 | √ | ||
| 樣品稀釋和試劑制備 | √ | √ | |
| 固相萃取 | √ | ||
| 分光光度測定法 | √ | ||
| 蒸汽發(fā)生器 | √ | ||
| TOC分析 | √ | ||
| 痕量金屬檢測 | √ | ||
| 水分析 | √ | ||
| 細(xì)菌培養(yǎng) | √ | ||
| 臨床化學(xué) | √ | ||
| 電泳 | √ | ||
| 電生理 | √ | ||
| 酶聯(lián)免疫吸附測定法 (ELISA) | √ | ||
| 內(nèi)鏡檢查 | √ | ||
| 細(xì)菌內(nèi)毒素分析 | √ | ||
| 模式動(dòng)物飼養(yǎng) | √ | ||
| 組織學(xué) | √ | ||
| 雜交 | √ | ||
| 水培法 | √ | ||
| 免疫細(xì)胞化學(xué) | √ | ||
| 哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) | √ | ||
| 培養(yǎng)基制備 | √ | ||
| 微生物分析 | √ | ||
| 分子生物學(xué) | √ | ||
| 單克隆抗體 | √ | ||
| 聚合酶鏈反應(yīng) (PCR) | √ | ||
| 植物組織培養(yǎng) | √ | ||
| 放射性免疫測定 | √ |
1、質(zhì)譜分析用水:質(zhì)譜能對混合物進(jìn)行痕量分析,由于其高靈敏度,所以要求最高純度的一級水。所有的樣本制備、樣本的前處理,例如固相萃取都需要超純水。要求水中雜質(zhì)在ppt級水平,進(jìn)行有機(jī)物分析要求電阻率18.2MΩ?cm,非常低的TOC,一般指標(biāo)小于3μg/L。雙柱的中間水質(zhì)監(jiān)測提供更進(jìn)一步的水質(zhì)保證,最終的水質(zhì)指標(biāo)是由良好設(shè)計(jì)的預(yù)處理系統(tǒng),加上連續(xù)循環(huán)流路和純水的超純化而實(shí)現(xiàn)。
2、植物組織培養(yǎng)用水:微繁殖技術(shù)允許大量克隆某種植物和大量繁殖無病害植物。為使?jié)撛诘纳锘钚晕镔|(zhì)的影響最小化,推薦使用少熱原的超純水。
3、蒸汽發(fā)生器用水:蒸汽發(fā)生器的應(yīng)用范圍包括無塵室增濕、保濕、直接蒸汽加熱、高壓滅菌器和消毒器。大部分蒸汽發(fā)生器由預(yù)處理過的飲用水供水,以避免細(xì)菌孳生、污染物沉淀,從而減少維護(hù)保養(yǎng),增強(qiáng)系統(tǒng)性能和提高清潔水平。蒸汽發(fā)生器可使用通過反滲透方式制成的一級水,電導(dǎo)率范圍1~50μS/cm。
4、樣本稀釋和制備試劑用水:在制備樣本、空白、試劑和標(biāo)準(zhǔn)樣時(shí)都會用到稀釋。用于稀釋的純水其純度必須保證不破壞或影響后續(xù)的分析。普通化學(xué)實(shí)驗(yàn)涉及的緩沖液、空白和標(biāo)準(zhǔn)樣,對于被分析物在1mg/L以上的,采用電阻率大于1MΩ?cm,TOC小于50μg/L,低細(xì)菌含量的實(shí)驗(yàn)室二級水就可以滿足需要并帶來理想的分析結(jié)果。對ppb級水平或更低的痕量分析,需要超純水用于空白和標(biāo)準(zhǔn)樣的制備。
5、微生物分析用水:常規(guī)的微生物分析要求實(shí)驗(yàn)室二級水。應(yīng)該有較低的細(xì)菌污染和低水平離子、有機(jī)物和顆粒雜質(zhì)。電阻率大于1MΩ?cm,TOC小于50μg/L 以及細(xì)菌含量小于1CFU/mL。
6、水栽法用水:在水培應(yīng)用中水源要足夠純,不僅保證添加的礦物和營養(yǎng)物質(zhì)濃度的準(zhǔn)確,而且要防止污染物引起的間接影響。舉例來說,高水平的溶解成分特別是鈣和鎂能造成高堿度改變水的硬度。高濃度的鈉和氯化物也會導(dǎo)致直接毒性,并會通過妨礙鈣、鎂、硝酸鹽和痕量元素的吸收而造成間接破壞。水栽推薦使用低離子、低有機(jī)物和低細(xì)菌污染水平的實(shí)驗(yàn)室二級水。
7、生物組織學(xué)用水:由于大部分生物組織學(xué)工作的性質(zhì),其細(xì)胞是固定和不繁殖的,應(yīng)使用實(shí)驗(yàn)室二級水。典型的電阻率為大于1MΩ?cm,TOC小于50μg/L 以及細(xì)菌含量小于1CFU/mL。
8、普通化學(xué)用水:普通化學(xué)實(shí)驗(yàn)推薦用水等級為電阻率>1MΩ?cm,TOC<50μg/L以及細(xì)菌含量低于10CFU/mL的實(shí)驗(yàn)室二級水。
9、細(xì)菌內(nèi)毒素分析用水:分離到細(xì)胞培養(yǎng)的各種用水應(yīng)用領(lǐng)域都要求規(guī)定細(xì)菌內(nèi)毒素指標(biāo),細(xì)菌內(nèi)毒素最大指標(biāo)范圍從0.25EU/mL到0.03EU/mL。對細(xì)菌內(nèi)毒素分析,適用少細(xì)菌內(nèi)毒素的超純水,通常是0.05EU/mL或更小。超濾是制造少細(xì)菌內(nèi)毒素超純水的必需手段,而且可以結(jié)合UV 燈進(jìn)行光氧化。
10、免疫細(xì)胞化學(xué)用水:對于免疫細(xì)胞化學(xué),用抗體監(jiān)測特殊蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)移會被來自微生物和相關(guān)生物活性細(xì)胞的碎片和代謝物污染所干擾。推薦使用少細(xì)菌內(nèi)毒素的超純水。
11、臨床生物化學(xué)用水:臨床實(shí)驗(yàn)室用水應(yīng)依照相應(yīng)的水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn),其中相關(guān)的是美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)中的I級水,美國、日本、歐洲的藥典也是很常用的標(biāo)準(zhǔn)。臨床分析儀或在任何制備和分析程序中的用水,都應(yīng)使用結(jié)合多種純化技術(shù)制成的高品質(zhì)純水。臨床分析儀用水純度要求依據(jù)分析儀制造商的設(shè)置而定,但通常電阻率應(yīng)大于10MΩ?cm,TOC小于50μg/L以及細(xì)菌水平小于5CFU/mL。
12、緩沖液和介質(zhì)制備用水:不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康撵`敏度要求不同,它決定了試劑制備或稀釋用純水的等級。對很多普通化學(xué)應(yīng)用,靈敏度不是首要因素,實(shí)驗(yàn)室二級水就已經(jīng)具備了足夠的純度。在此基礎(chǔ)上結(jié)合去離子技術(shù)就可得到很低離子含量的超純水,結(jié)合 UV 燈、過濾和循環(huán)管路等手段,還可以很好地控制有機(jī)物和微生物水平。先進(jìn)的現(xiàn)代分析儀器不斷提升分析的靈敏度。痕量元素現(xiàn)在通過使用諸如ICP-MS 技術(shù),可測定在 ppt 級和亞 ppt 級水平的物質(zhì)。
13、痕量金屬監(jiān)測用水:痕量分析工作需要不含可測定成分的純水,并且水質(zhì)要求適用于嚴(yán)格靈敏的 ICP-MS工作。因此,空白試劑、標(biāo)準(zhǔn)樣稀釋和樣本制備均需要純度最高的水,甚至需要在無塵室中操作。
14、供應(yīng)超純水系統(tǒng)用水:用飲用水或相應(yīng)水源生產(chǎn)超純水(18.2MΩ?cm,TOC<5μg/L)通常由兩個(gè)階段完成——預(yù)處理和超純化處理。預(yù)處理減少所有大量雜質(zhì)——無機(jī)物、有機(jī)物、微生物和顆粒——大約超過95%被去除,可使用反滲透、反滲透結(jié)合離子交換或EDI有效地實(shí)現(xiàn)以上目的。也可以單獨(dú)采用離子交換純化飲用水,但不能使有機(jī)物、細(xì)菌和顆粒雜質(zhì)的指標(biāo)達(dá)到同等水準(zhǔn)。預(yù)處理水質(zhì)越好,超純水的出水水質(zhì)越有保障。
15、分子生物學(xué)用水:分子生物學(xué)研究的焦點(diǎn)集中在核酸、蛋白質(zhì)和酶。微生物以及相關(guān)生物活性細(xì)胞的碎片和代謝物污染對其有嚴(yán)重影響。推薦使用少熱原的超純水。
16、分光光度測定用水:推薦至少使用實(shí)驗(yàn)室二級水用于分光光度測定,要求無機(jī)物、有機(jī)物或凝膠污染均較低,電阻率大于1MΩ?cm,低TOC含量(小于 50μg/L)。在配有UV檢測器的儀器中尤為重要,因?yàn)槿芙庑杂袡C(jī)物可能會干擾其檢測。
17、定性分析用水:定性分析方法應(yīng)該使用實(shí)驗(yàn)室二級水,其電阻率大于1MΩ?cm,TOC小于50μg/L以及較低的顆粒性雜質(zhì)和細(xì)菌含量。不過,對靈敏度高的分析技術(shù),如ICP-MS,需要最佳指標(biāo)的超純水,無機(jī)物雜質(zhì)在ppt水平,電阻率18.2MΩ?cm 和較低的TOC。
18、電泳分析用水:電泳用水最重要的要求是生物活性物質(zhì),諸如細(xì)菌內(nèi)毒素(通常小于0.005EU/mL),核糖核酸酶和蛋白酶(不可測定)的去除。最好用電阻率18.2MΩ?cm,TOC小于10μg/L,經(jīng)0.1μm或更小孔徑的微濾以及細(xì)菌含量低于1CFU/mL 的超純水作為供水。
19、生理學(xué)用水:生理學(xué)技術(shù)通常很敏感,水中無機(jī)污染物對其會造成很大干擾。推薦使用至少電阻率大于1MΩ?cm(25℃),TOC小于50μg/L以及細(xì)菌含量低于1CFU/mL的實(shí)驗(yàn)室二級水。
20、電化學(xué)用水:建議用于電化學(xué)的水等級至少電阻率大于5MΩ?cm,無機(jī)物、有機(jī)物和凝膠污染物含量較低,TOC含量小于50μg/L以及細(xì)菌含量低于1CFU/mL的實(shí)驗(yàn)室二級水。對超痕量電化學(xué)分析儀,需用超純水。
21、單克隆抗體研究用水:細(xì)菌培養(yǎng)用水至少應(yīng)該是實(shí)驗(yàn)室二級水,電阻率大于10MΩ?cm,TOC小于50μg/L以及細(xì)菌含量小于1CFU/mL。對敏感的哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),推薦使用少熱原的超純水。它由經(jīng)過去離子、反滲透或蒸餾方式純化的純水再經(jīng)過超純化柱制成,超濾將確保去除其中的核酸酶和細(xì)菌內(nèi)毒素。
22、玻璃器皿的清洗沖洗用水:玻璃器皿的清洗是大多實(shí)驗(yàn)室每天的例行公事,它對水等級的要求依據(jù)實(shí)際應(yīng)用的不同而定??紤]到成本,適用于大部分常規(guī)用途的玻璃器皿的清洗可用三級水。對比較敏感的分析或遺傳實(shí)驗(yàn)來說,適用實(shí)驗(yàn)室二級水,通常電阻率水平在1~15MΩ?cm。對于鑒定應(yīng)用,諸如痕量分析技術(shù)(如ICP-MS)、高靈敏的細(xì)胞培養(yǎng)和嚴(yán)格的臨床應(yīng)用,其玻璃器皿應(yīng)該用超純水清洗,特別是最后一次沖洗,電阻率應(yīng)為 18.2MΩ?cm,TOC小于10μg/L以及細(xì)菌含量低于 1CFU/mL。
23、TOC分析用水:TOC分析是一種非特定的分析方法,定量分析有機(jī)物全部碳含量。當(dāng)前的應(yīng)用范圍從廢水的高水平到超純水的亞ppb級水平,在此技術(shù)中水也被用于稀釋樣本,制備試劑和標(biāo)準(zhǔn)樣。對高含量物的測量中,實(shí)驗(yàn)室二級水即適用,痕量工作需用超純水。
24、放射免疫分析(RIA)和酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)用水:在ELISA中的抗體反應(yīng)很強(qiáng)烈,在大部分分析中不需要最高純度的水,實(shí)驗(yàn)室二級水就可適用。其電阻率大于 10MΩ?cm,TOC小于50μg/L以及細(xì)菌含量低于1CFU/mL。
25、IC離子質(zhì)譜用水:IC通過直接注射10~50mL 樣本用于少量和大量成分測定(比如低至0.1μg/L),高純度的純水用于空白、標(biāo)準(zhǔn)樣和洗脫液制備。對此類應(yīng)用如果運(yùn)行成本是個(gè)問題的話,實(shí)驗(yàn)室二級水大致適合,否則超純水更優(yōu)選??梢酝ㄟ^離子交換柱預(yù)濃縮被測離子并將其注入洗脫液,用IC進(jìn)行分離和分析,這樣就可以將IC的監(jiān)測下限提高到ppt級。50mL或100mL 樣品就可以用這種方法進(jìn)行分析。這種方式要求純度很高的水,其雜質(zhì)在ppt級水平,電阻率 18.2MΩ?cm和較低的TOC。雙柱之間的中間水質(zhì)監(jiān)測儀提供更進(jìn)一步的水質(zhì)保證,最終的水質(zhì)指標(biāo)是由良好設(shè)計(jì)的預(yù)處理系統(tǒng),加上連續(xù)循環(huán)流路和純水的超純化而實(shí)現(xiàn)。
26、電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)用水:ICP-MS可被用于測定在 ppt 級水平(ng/L)的元素。對這種靈敏的ICP-MS分析工作水純度的要求非常嚴(yán)格,要求水中雜質(zhì)在ppt級水平,電阻率18.2MΩ?cm 和較低的TOC。雙柱之間的中間水質(zhì)監(jiān)測儀提供更進(jìn)一步的水質(zhì)保證,最終的水質(zhì)指標(biāo)是由良好設(shè)計(jì)的預(yù)處理系統(tǒng),加上連續(xù)循環(huán)流路和純水的超純化而實(shí)現(xiàn)。
27、電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(ICP-AES)用水:在ICP-AES應(yīng)用中,對不同元素的靈敏度明顯不同,但金屬、過渡金屬、磷和硫監(jiān)測下限都在 ppb 級(μg/L)范圍內(nèi)。ICP-AES對水的純度要求相當(dāng)嚴(yán)格,電阻率大于18MΩ?cm 的超純水儀是必須的,TOC的要求一般不太重要,前處理要求反滲透或離子交換。
28、石墨爐原子吸收分光光度法用水:GFAAS與其他原子吸收光譜測定(AAS)的不同之處是,其火焰爐被電子發(fā)熱石墨管或棒替代,其能在元素分析中達(dá)到很高的靈敏度。GFAAS要求頂級純水系統(tǒng),提供ppt級的雜質(zhì)水平,18.2MΩ?cm的電阻率和低TOC指標(biāo),內(nèi)置監(jiān)測儀提供純度保證,最終的水質(zhì)指標(biāo)是由良好設(shè)計(jì)的預(yù)處理系統(tǒng),加上連續(xù)循環(huán)流路和純水的超純化而實(shí)現(xiàn)。
29、氣質(zhì)聯(lián)用法(GC-MS)用水:對于GC應(yīng)用,純水經(jīng)常被用于制備空白對照組、標(biāo)準(zhǔn)樣和樣本的預(yù)處理,諸如固相萃取。氣質(zhì)聯(lián)用的靈敏度非常高,其對高純度水的純度要求是非常嚴(yán)格的。TOC水平盡可能低,通常小于3μg/L,以RO 水為進(jìn)水的低TOC水平的超純水可以滿足要求。必須嚴(yán)格按操作說明使用超純水儀以確保持續(xù)的高品質(zhì)產(chǎn)水。
30、F-AAS火焰原子吸收光譜法(F-AAS)用水:雖然F-AAS技術(shù)與多元素分析的ICP-MS和ICP-ES有些重疊,但由于其適宜的成本,AAS還是非常廣泛地用于較小的實(shí)驗(yàn)室或特殊分析,其元素的監(jiān)測下限從ppb級到ppm級不等。實(shí)驗(yàn)室II級水的純度通常足以滿足大部分常規(guī)的AAS分析,它不要求低水平的有機(jī)物和細(xì)菌含量。
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