伯樂(lè)的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)(以TC20系列為代表),整體上自動(dòng)化程度很高,操作也比較簡(jiǎn)單。但要確保它長(zhǎng)期穩(wěn)定、準(zhǔn)確地工作,有幾個(gè)技術(shù)上的關(guān)鍵點(diǎn)還是值得留意的。我把它們總結(jié)為“一個(gè)絕對(duì)不"、“兩個(gè)必須調(diào)"、“三個(gè)定期做"和“四種要警惕的硬件故障",這樣比較好記。
一、嚴(yán)禁自行拆機(jī)
這是一個(gè)非常重要的安全和技術(shù)紅線(xiàn)。
1、嚴(yán)禁拆機(jī):請(qǐng)絕對(duì)不要嘗試自行拆卸或維修儀器。內(nèi)部有高壓部件,存在觸電風(fēng)險(xiǎn),自行拆機(jī)也可能導(dǎo)致硬件損壞并失去保修資格。
2、違規(guī)使用:切勿在設(shè)備旁邊存放或操作液體(如水槽旁),也應(yīng)避免使用非伯網(wǎng)認(rèn)證的計(jì)數(shù)板,這都可能損壞硬件。
二、兩個(gè)必須調(diào):根據(jù)樣本“量體裁衣"
1、必須調(diào)用“直徑分選"模式:在自動(dòng)模式下,TC20可能會(huì)無(wú)差別地計(jì)數(shù)所有顆粒,在復(fù)雜的樣本(如原代細(xì)胞、PBMCs)中,這可能無(wú)法準(zhǔn)確反映你想研究的特定細(xì)胞群體。
解決方法:此時(shí),必須激活“用戶(hù)自定義門(mén)限"(User defined gates)功能,手動(dòng)輸入或利用柱狀圖圈定目標(biāo)細(xì)胞的直徑范圍。這樣儀器就只會(huì)計(jì)數(shù)這個(gè)范圍內(nèi)的細(xì)胞,結(jié)果也更精準(zhǔn)。
2、優(yōu)化細(xì)胞濃度:TC20的有效濃度范圍是 5×10? 至 1×10? 細(xì)胞/毫升。
解決方法:如果濃度過(guò)高(例如>1x10?/ml)導(dǎo)致細(xì)胞堆積或檢測(cè)超時(shí),可以進(jìn)行適當(dāng)稀釋?zhuān)蝗绻麧舛冗^(guò)低(例如<5x10?/ml),樣本則過(guò)稀,計(jì)數(shù)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)可靠性會(huì)下降。此外,若使用臺(tái)盼藍(lán)染色,必須在5分鐘內(nèi)完成計(jì)數(shù),以防染料毒性導(dǎo)致活細(xì)胞也被染色,影響存活率判斷。
三、三個(gè)定期做:確保長(zhǎng)期性能穩(wěn)定
盡管TC20被設(shè)計(jì)為低維護(hù)設(shè)備,但以下維護(hù)是保障其長(zhǎng)期性能穩(wěn)定的關(guān)鍵。
1、定期清潔機(jī)身和鏡頭:關(guān)閉并斷開(kāi)電源后,使用柔軟、微濕的無(wú)絨布擦拭外表面和鏡頭區(qū)域。對(duì)于熱敏打印機(jī),如果打印內(nèi)容錯(cuò)位或模糊,可在斷電后打開(kāi)倉(cāng)蓋,用干棉簽輕輕擦拭打印頭。
2、定期執(zhí)行系統(tǒng)驗(yàn)證:使用隨附的驗(yàn)證玻片定期執(zhí)行系統(tǒng)驗(yàn)證測(cè)試。如果測(cè)試失敗,說(shuō)明儀器可能需要進(jìn)一步排查或由專(zhuān)業(yè)工程師介入。
3、定期檢查數(shù)據(jù)記錄:對(duì)于日常檢查,用戶(hù)可以定期查看計(jì)數(shù)圖像,判斷細(xì)胞邊緣是否清晰;同時(shí)留意計(jì)數(shù)結(jié)果是否存在異常波動(dòng),并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)品(如3μm/10μm標(biāo)準(zhǔn)微球)進(jìn)行驗(yàn)證。
四、四種要警惕的硬件故障
偶爾出現(xiàn)的硬件相關(guān)錯(cuò)誤代碼需要警惕:
1、步進(jìn)電機(jī)錯(cuò)誤 (Stepper motor error):通常與載物臺(tái)或鏡頭移動(dòng)相關(guān),設(shè)備重啟后若反復(fù)出現(xiàn),需聯(lián)系技術(shù)支持。
2、通信錯(cuò)誤 (SPI/CPLD/FPGA communication error):代表內(nèi)部電路板之間通信異常,單次出現(xiàn)可重啟,若頻發(fā)則需聯(lián)系技術(shù)支持。
3、明場(chǎng)LED/CMOS故障 (Bright field LED/CMOS not working):直接影響成像,需聯(lián)系技術(shù)支持進(jìn)行專(zhuān)業(yè)診斷。
4、內(nèi)部存儲(chǔ)錯(cuò)誤 (Flash memory corrupted):若出現(xiàn)“存儲(chǔ)結(jié)果失敗"(Store results failed)等提示,且導(dǎo)出數(shù)據(jù)后問(wèn)題依舊,可能需要技術(shù)干預(yù)。
此外,良好的環(huán)境與數(shù)據(jù)管理也很重要。應(yīng)將儀器放置于室內(nèi)干燥、平整的表面,遠(yuǎn)離水槽、強(qiáng)震動(dòng)源和灰塵大的區(qū)域。數(shù)據(jù)方面,建議定期導(dǎo)出重要數(shù)據(jù),并確保用于U盤(pán)更新固件或?qū)С鰯?shù)據(jù)時(shí)使用的是FAT32格式。