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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>山羊抗人白蛋白抗體IgG片段,DD/IEP原液即用,沉淀線清晰
產(chǎn)品概述
本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊源多克隆抗體(貨號:A80-129P),特異性靶向人血清白蛋白(Human Albumin)。經(jīng)DEAE離子交換層析純化獲得IgG組分,以完整IgG形式提供,適用于雙擴(kuò)散(DD)和免疫電泳(IEP)等沉淀性凝膠反應(yīng)。本品經(jīng)驗(yàn)證可特異性識別人源白蛋白,與其他血清蛋白無交叉反應(yīng),為臨床檢驗(yàn)和免疫學(xué)分析提供了可靠工具。
靶點(diǎn)背景:人血清白蛋白的生理功能
人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA)是血漿中含量豐富的蛋白質(zhì),由肝細(xì)胞合成,具有多重生理功能。
別名: HSA、PRO0883、PRO0903、PRO1341
主要功能:
pH維持:作為血漿中最重要的緩沖物質(zhì),參與酸堿平衡調(diào)節(jié)
物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn):結(jié)合并運(yùn)輸多種內(nèi)源性和外源性化合物,包括脂肪酸、氨基酸、激素、膽紅素、鈣離子及多種藥物
膠體滲透壓調(diào)節(jié):通過結(jié)合水分子,維持血管內(nèi)外滲透壓平衡,防止血漿外滲
抗氧化作用:含有游離巰基,可捕獲活性氧自由基
臨床意義: 血清白蛋白水平降低常見于肝功能不全、腎病綜合征、營養(yǎng)不良及炎癥狀態(tài),是臨床重要的生化檢測指標(biāo)。
抗體特性規(guī)格
參數(shù) 規(guī)格
靶點(diǎn) 人血清白蛋白
宿主 山羊
克隆性 多克隆
形式 完整IgG
同種型 IgG
偶聯(lián)物 非偶聯(lián)
純度 IgG組分(DEAE純化)
抗原物種 人
反應(yīng)性 人(經(jīng)驗(yàn)證)
免疫原與生產(chǎn)流程:
免疫原:從血清或血漿來源純化的人白蛋白
免疫動物:山羊
純化方法:抗血清經(jīng)分級沉淀后,通過DEAE離子交換層析獲得IgG組分
質(zhì)控數(shù)據(jù):
經(jīng)免疫電泳驗(yàn)證,該抗血清特異性識別人白蛋白
與其他血清蛋白無交叉反應(yīng)(未檢測到抗體)
儲存與穩(wěn)定性
儲存溫度:2-8°C(請勿冷凍)
有效期:自收貨之日起2年(較常規(guī)抗體有效期更長)
緩沖液:磷酸鹽緩沖液(PBS),含0.09%疊氮鈉
> 注意:疊氮鈉作為防腐劑。本品有效期為2年,建議在有效期內(nèi)使用,避免反復(fù)開啟導(dǎo)致污染或活性下降。
應(yīng)用方法與實(shí)驗(yàn)條件
適用技術(shù)平臺
本產(chǎn)品專門設(shè)計用于沉淀性凝膠反應(yīng),主要包括以下三種技術(shù):
應(yīng)用 推薦稀釋度 說明
雙擴(kuò)散(DD,Ouchterlony) 原液(Neat) 適用于抗原-抗體在瓊脂糖凝膠中的雙向往擴(kuò)散形成沉淀線
免疫電泳(IEP) 原液(Neat) 結(jié)合電泳分離與免疫沉淀,鑒定抗原成分
免疫固定電泳(IFE) 需自行優(yōu)化 雖未明確列出,但同類產(chǎn)品常用于IFE
重要提示:
上述應(yīng)用并非全部經(jīng)過生產(chǎn)廠商實(shí)驗(yàn)室的專門測試
最佳工作稀釋度應(yīng)由研究者根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行優(yōu)化
推薦以原液(未稀釋)作為起始濃度,若沉淀線過強(qiáng)或出現(xiàn)非特異性,可嘗試適當(dāng)稀釋(如1:2或1:4)
雙擴(kuò)散(Ouchterlony)實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)
原理:抗原和抗體在瓊脂糖凝膠中各自從孔中向外擴(kuò)散,在濃度比例合適處形成可見的白色沉淀線。
操作建議:
制備1%瓊脂糖凝膠(溶于PBS或巴b妥緩沖液)
打孔:中心孔加抗體(原液),周圍孔加倍比稀釋的抗原(人血清或純化白蛋白)
濕盒中室溫孵育24-48小時
觀察沉淀線形成,可用考馬斯亮藍(lán)染色增強(qiáng)可見度
陽性對照:正常人血清(稀釋1:2-1:8)或純化人白蛋白(0.1-1 mg/ml)
陰性對照:其他物種血清(如牛血清白蛋白),應(yīng)無沉淀線
免疫電泳(IEP)實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)
原理:先將抗原樣本進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分離,然后在電泳槽側(cè)槽加入抗體,通過雙向擴(kuò)散形成弧形沉淀線。
操作建議:
在瓊脂糖凝膠板上打孔,加入待測樣本(如人血清)
進(jìn)行電泳(恒壓,約10 V/cm,時間40-60分鐘)
電泳后,在凝膠兩側(cè)的槽中加入抗體(原液)
濕盒中室溫擴(kuò)散24-48小時
觀察沉淀弧,可染色保存
結(jié)果判讀:白蛋白因分子量較小、電荷較高,遷移速率最快,應(yīng)在陽極近端形成單一、致密的沉淀弧。
其他潛在應(yīng)用
雖然本產(chǎn)品主要設(shè)計用于沉淀反應(yīng),但高純度的抗人白蛋白IgG也可用于以下場景(需自行驗(yàn)證):
免疫比濁法(檢測血清白蛋白濃度)
蛋白質(zhì)印跡(WB)——但需注意沉淀反應(yīng)抗體未必適合WB,建議先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)
免疫親和層析(制備去除白蛋白的血清樣本)
相關(guān)產(chǎn)品推薦
抗人白蛋白HRP偶聯(lián)抗體——用于WB或ELISA檢測
正常山羊血清——用于封閉非特異性結(jié)合
瓊脂糖(Agarose)——制備凝膠擴(kuò)散板
b比妥緩沖液(Barbital buffer)——用于免疫電泳的電泳緩沖液
考馬斯亮藍(lán)染色液——用于沉淀線染色和保存
研究及臨床檢驗(yàn)應(yīng)用場景
本抗體適用于以下領(lǐng)域:
臨床免疫學(xué)檢驗(yàn):用于免疫電泳或免疫固定電泳鑒定M蛋白血癥患者血清中的白蛋白異常(如雙白蛋白血癥、無白蛋白血癥等)
抗原-抗體系統(tǒng)教學(xué):雙擴(kuò)散和免疫電泳是經(jīng)典的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),本產(chǎn)品可作為演示抗原抗體反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)化試劑
免疫化學(xué)質(zhì)量控制:作為已知特異性抗體,用于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室的瓊脂糖凝膠擴(kuò)散技術(shù)及結(jié)果判讀能力
去除血清白蛋白:利用本品偶聯(lián)至固相載體(如Sepharose),制備免疫親和層析柱,用于從血清樣本中去除高豐度白蛋白,富集低豐度蛋白
免疫比濁法開發(fā):用于建立或驗(yàn)證血清白蛋白定量檢測試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品
白蛋白結(jié)合研究:通過免疫沉淀研究白蛋白與藥物或其他小分子化合物的結(jié)合特性
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