產(chǎn)品概述

本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的針對(duì)PPP6C（蛋白磷酸酶6催化亞基）的兔多克隆抗體，貨號(hào)A300-844A。該抗體可識(shí)別人及小鼠來(lái)源的PPP6C，適用于免疫沉淀（IP）和蛋白質(zhì)印跡（WB）檢測(cè)?？贵w經(jīng)抗原親和純化，濃度高達(dá)1000 µg/ml，為細(xì)胞周期調(diào)控及NF-κB信號(hào)通路研究提供了高靈敏度、高特異性的檢測(cè)工具。

核心規(guī)格參數(shù)

項(xiàng)目 | 詳細(xì)信息

靶點(diǎn) | PPP6C

反應(yīng)性 | 小鼠、人

應(yīng)用 | IP, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第255位至C末端（第305位）區(qū)域

亞型 | IgG

偶聯(lián)物 | 非偶聯(lián)

純度 | 抗原親和純化

抗原物種 | 人

濃度 | 1000 µg/ml

保存條件 | 2 - 8 °C

有效期 | 收貨之日起1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊d化鈉

應(yīng)用方法與推薦稀釋度

蛋白質(zhì)印跡（WB）

所有WB實(shí)驗(yàn)使用含5%脫脂牛奶的TBST作為封閉液及抗體稀釋液。一抗孵育條件為過(guò)夜孵育。

細(xì)胞裂解液WB：使用山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號(hào)A120-101P）作為二抗。

免疫沉淀產(chǎn)物WB：使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯(lián)抗體，封閉液中需添加5%正常豬血清（貨號(hào)S100-020）以降低輕鏈非特異性信號(hào)。

推薦稀釋度：1:1000 - 1:10,000

免疫沉淀（IP）

推薦用量：6 µg 抗體 / mg 細(xì)胞裂解液

操作要點(diǎn)：

1. 將6 µg抗體與含1 mg蛋白的細(xì)胞裂解液混合

2. 4°C孵育1-2小時(shí)或過(guò)夜

3. 加入蛋白A/G瓊脂糖珠，繼續(xù)孵育1-2小時(shí)

4. 充分洗滌沉淀復(fù)合物（建議4-5次）

5. 使用SDS上樣緩沖液洗脫，煮沸變性后進(jìn)行WB檢測(cè)

產(chǎn)品背景信息

蛋白功能概述

PPP6C（蛋白磷酸酶6催化亞基）是絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶大家族（PPP家族）的成員之一，屬于2A型磷酸酶，在結(jié)構(gòu)上與PP2A和PP4密切相關(guān)。PPP6C作為催化亞基，通常與不同的調(diào)節(jié)亞基形成全酶復(fù)合物，靶向特定的底物和細(xì)胞區(qū)室。

分子機(jī)制與生理功能

1. 細(xì)胞周期調(diào)控：PPP6C通過(guò)調(diào)控細(xì)胞周期蛋白D1（cyclin D1）的穩(wěn)定性參與細(xì)胞周期進(jìn)程。研究表明，PP6磷酸酶活性可去磷酸化cyclin D1，影響其在G1期的積累和降解，從而控制細(xì)胞增殖。

2. NF-κB信號(hào)通路的負(fù)調(diào)控：PPP6C參與NF-κB和TAK1活化的負(fù)向控制。TAK1（轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激酶1）是NF-κB和MAPK通路的上游激酶，PPP6C可通過(guò)去磷酸化TAK1或其相關(guān)信號(hào)分子來(lái)限制炎癥反應(yīng)的過(guò)度激活。

3. 其他功能：PP6還參與DNA損傷應(yīng)答、mRNA剪接和細(xì)胞骨架調(diào)節(jié)等過(guò)程。

儲(chǔ)存與穩(wěn)定性注意事項(xiàng)

1. 保存溫度：2-8°C，請(qǐng)勿冷凍。反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致蛋白磷酸酶抗體變性及活性損失。

2. 有效期：收貨之日起1年內(nèi)穩(wěn)定。

3. 防腐劑：緩沖液中含有0.09%疊d化鈉，使用時(shí)應(yīng)遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范。

4. 分裝建議：由于抗體濃度為1000 µg/ml，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)頻率分裝成小份（如20-50 µl/管），仍保存于2-8°C，避免冷凍。

功能性?xún)?yōu)勢(shì)總結(jié)

1. 超高濃度（1000 µg/ml）：提供充足的抗體總量，適合大規(guī)模或長(zhǎng)期系列實(shí)驗(yàn)；高濃度有助于IP實(shí)驗(yàn)中高效捕獲低豐度PPP6C復(fù)合物。

2. C末端靶向表位（250-305）：該區(qū)域?yàn)镻PP6C催化亞基特y的C端延伸部分，與調(diào)節(jié)亞基結(jié)合及底物識(shí)別相關(guān)；抗體特異性識(shí)別人和小鼠PPP6C，不與其他PPP家族成員（如PP2A、PP4）發(fā)生顯著交叉反應(yīng)。

3. 寬WB稀釋范圍（1:1000-1:10,000）：提供極大實(shí)驗(yàn)靈活性，可根據(jù)不同細(xì)胞系或組織中PPP6C的表達(dá)豐度調(diào)整抗體用量。

4. 親和純化+高純度：抗原親和純化確?？贵w特異性，降低WB背景和IP非特異性沉淀。

5. IP-WB一體化方案：配套抗輕鏈HRP二抗及豬血清封閉建議，有效消除沉淀中重鏈干擾，便于檢測(cè)PPP6C與調(diào)節(jié)亞基的共沉淀。