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美國Zeta life-Advanced RNA轉(zhuǎn)染試劑2026年升級
產(chǎn)品概述
Advanced RNA轉(zhuǎn)染試劑，產(chǎn)品貨號為AD300025，以下是其詳細的操作說明書。
一、試劑盒組分
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Advanced RNA轉(zhuǎn)染試劑：貨號AD30，是實現(xiàn)高效RNA轉(zhuǎn)染的關鍵成分。
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00003.
稀釋液：貨號X-DS，用于稀釋轉(zhuǎn)染試劑，以確保其在轉(zhuǎn)染過程中發(fā)揮最佳性能。
00004.
二、注意事項
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培養(yǎng)基使用：轉(zhuǎn)染復合物可直接轉(zhuǎn)入含有血清的培養(yǎng)基中進行轉(zhuǎn)染操作。轉(zhuǎn)染24小時后需更換培養(yǎng)基，48小時后收集細胞用于后續(xù)實驗。特別注意，轉(zhuǎn)染所用的含血清培養(yǎng)基中不應含有雙抗，以免影響轉(zhuǎn)染效果。
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00003.
siRNA純度：使用高純度的siRNA對提高轉(zhuǎn)染效率至關重要。高純度的siRNA能夠減少雜質(zhì)干擾，確保轉(zhuǎn)染過程順利進行。
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試劑用量：建議轉(zhuǎn)染試劑的用量為0.1 μL/pmol siRNA，以達到理想的轉(zhuǎn)染效果。
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00007.
siRNA濃度：siRNA的實驗濃度推薦為40 nM，在此濃度下能夠有效實現(xiàn)基因沉默等實驗目的。
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00009.
儲存條件：本產(chǎn)品應儲存于4°C環(huán)境中，嚴禁凍融，以保證其活性和穩(wěn)定性。產(chǎn)品的有效期為1年，請在有效期內(nèi)使用。
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三、簡易操作說明
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核酸準備要求：實驗中使用的RNA濃度需達到20 uM /L，確保RNA質(zhì)量和濃度符合實驗要求。
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操作流程
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細胞接種：提前1天進行細胞接種，確保在轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度達到70-90%，為轉(zhuǎn)染提供良好的細胞狀態(tài)。
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稀釋轉(zhuǎn)染試劑：根據(jù)參考用量，使用稀釋液（貨號X-DS）對Advanced RNA®轉(zhuǎn)染試劑進行稀釋，確保轉(zhuǎn)染試劑的濃度合適。
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加入siRNA溶液：向稀釋后的轉(zhuǎn)染試劑中加入siRNA溶液，并充分混勻，使轉(zhuǎn)染試劑與siRNA充分結合。
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孵育形成復合物：將siRNA與轉(zhuǎn)染試劑的混合液在室溫下孵育20-30分鐘，形成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染復合物。若希望達到更佳的轉(zhuǎn)染效果，也可在37℃下進行孵育。
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加入復合物到細胞中：根據(jù)參考用量，將孵育好的復合物加入到細胞中，確保復合物能夠有效進入細胞。
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結果分析：細胞繼續(xù)培養(yǎng)2-3天后，對轉(zhuǎn)染效果進行檢測和分析，評估轉(zhuǎn)染的效率和效果。
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四、以細胞培養(yǎng)板為例的轉(zhuǎn)染試劑及RNA用量梯度說明
培養(yǎng)器皿 | siRNA濃度 | 每孔體積 | 轉(zhuǎn)染試劑 | 轉(zhuǎn)染試劑稀釋液 | 20μM siRNA | 培養(yǎng)基 |
96-well | 100 nM | 100 μL | 1 μL | 10 μL | 0.5 μL | 88.5 μL |
96-well | 40 nM | 100 μL | 0.4 μL | 10 μL | 0.2 μL | 89.4 μL |
96-well | 20 nM | 100 μL | 0.2 μL | 10 μL | 0.1 μL | 89.7 μL |
96-well | 10 nM | 100 μL | 0.1 μL | 10 μL | 0.05 μL | 89.85 μL |
24-well | 100 nM | 500 μL | 5 μL | 50 μL | 2.5 μL | 442.5 μL |
24-well | 40 nM | 500 μL | 2 μL | 50 μL | 1 μL | 447 μL |
24-well | 20 nM | 500 μL | 1 μL | 50 μL | 0.5 μL | 448.5 μL |
24-well | 10 nM | 500 μL | 0.5 μL | 50 μL | 0.25 μL | 449.25 μL |
12-well | 100 nM | 1 mL | 10 μL | 100 μL | 5 μL | 885 μL |
12-well | 40 nM | 1 mL | 4 μL | 100 μL | 2 μL | 894 μL |
12-well | 20 nM | 1 mL | 2 μL | 100 μL | 1 μL | 897 μL |
12-well | 10 nM | 1 mL | 1 μL | 100 μL | 0.5 μL | 898.5 μL |
6-well | 100 nM | 2 mL | 20 μL | 200 μL | 10 μL | 1770 μL |
6-well | 40 nM | 2 mL | 8 μL | 200 μL | 4 μL | 1788 μL |
6-well | 20 nM | 2 mL | 4 μL | 200 μL | 2 μL | 1794 μL |
6-well | 10 nM | 2 mL | 2 μL | 200 μL | 1 μL | 1797 μL |
本產(chǎn)品僅用于科研用途，嚴禁用于臨床診斷或治療等其他用途。
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