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40276ESYSFluor® 594 EdU Fluorescence Imaging Flow C
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 40276ES 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：63更新時(shí)間：2025-11-07 18:27:28
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
|---|
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品介紹
細(xì)胞增殖檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。常用的檢測(cè)細(xì)胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測(cè)是Brdu方法的升級(jí)和突破。EdU（5-溴-2-脫氧niao嘧啶）是一種嘧啶類似物，可在DNA合成期整合入DNA雙鏈。EdU法檢測(cè)是基于“點(diǎn)擊"反應(yīng)，一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價(jià)反應(yīng)。
產(chǎn)品特色
試劑盒中EdU試劑含有炔烴，而Yefluor 594 Azide染料試劑含有疊氮化合物。點(diǎn)擊法的EdU標(biāo)記增殖快速有效，易于使用。只需少量的疊氮化染料即可有效地標(biāo)記出整合的EdU。標(biāo)準(zhǔn)化的戊二醛固定和去污劑促滲可以使檢測(cè)試劑進(jìn)入細(xì)胞，而Brdu方法則需要DNA變性（如酸變性、熱變性或者用DNase消化）去暴露BrdU從而方便BrdU抗體結(jié)合。
本試劑盒包含EdU法檢測(cè)所需要的所有組份，可以檢測(cè)細(xì)胞增殖與細(xì)胞周期分析，適用于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測(cè)。對(duì)于細(xì)胞周期的分析，試劑盒提供了細(xì)胞核染料Hoechst 33342。
存儲(chǔ)條件
-25~-15℃避光儲(chǔ)存，有效期1年。開(kāi)封后，組分A（10 mM EdU）需-25~-15℃儲(chǔ)存，組分B（Yefluor 594 Azide）需-25 ~-15℃避光儲(chǔ)存，其余組分2-8 ℃存儲(chǔ)即可。
FAQ
Q:可以做體外嗎？客戶樣本是組織。細(xì)胞樣本可以嗎？
A: 體外是可以，但是組織不可以，必須要保證能增殖，有DNA 合成。能進(jìn)行增殖的細(xì)胞就可以。
Q: EdU 和Brdu 檢測(cè)區(qū)別？
A: BrdU 免疫檢測(cè)需要變性DNA 后才能與抗體結(jié)合，而 EdU 因?yàn)槠?/span> 的炔羥基團(tuán)可以與一些熒光染料發(fā)生“Click"化學(xué)反應(yīng)，無(wú)需變形，從而將細(xì)胞標(biāo)記上熒光，因此應(yīng)用更廣泛。
Q:能否在活細(xì)胞中進(jìn)行 Click-iT EdU 檢測(cè)？
A: 不可以。雖然 EdU 是對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行代謝標(biāo)記，但是疊氮化物檢測(cè)試劑和緩沖液組分是細(xì)胞非透過(guò)型，檢測(cè)信號(hào)時(shí)的Click 反應(yīng)必須在固定和通透的樣品上進(jìn)行。
Q: 觀測(cè)到較高的本底干擾，這是什么原因所致？如何減少本底干擾？
A: 疊氮化物和炔烴類間 Click 反應(yīng)非常有選擇性，生物體內(nèi)幾乎不可能有副反應(yīng)發(fā)生，所以本底較高一般是由洗滌不充分造成的。減少本底干擾的優(yōu)良方法是增加BSA 洗滌的次數(shù)。同時(shí)， 也可在同樣的檢測(cè)條件下設(shè)置一組同等處理的無(wú)染料或無(wú)Click 反應(yīng)對(duì)照，以排除自發(fā)熒光干擾。此外，您還可在無(wú) EdU 體系中進(jìn)行完整的 Click 反應(yīng)，驗(yàn)證Click 反應(yīng)信號(hào)的特異性。
Q: 為什么標(biāo)記樣品無(wú)信號(hào)或特異性信號(hào)非常低？如何提高信號(hào)？
A:
請(qǐng)保證試劑使用時(shí)為無(wú)色的狀態(tài)，不要使用已經(jīng)變黃的添加劑或緩沖液；
為確保 Click 反應(yīng)試劑能夠到達(dá)核內(nèi)，細(xì)胞需要充分地固定和通透；
由于銅離子能結(jié)合到部分試劑上，這會(huì)導(dǎo)致催化 Click 反應(yīng)的有效濃度降低。所以在 Click 反應(yīng)前，不要在任何緩沖液或試劑中引入金屬螯合劑（例如 EDTA、EGTA、檸檬酸鹽等），對(duì)某些含有這些物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)樣品來(lái)說(shuō)，進(jìn)行Click 反應(yīng)前，可能需要增加額外的洗滌步驟；
當(dāng)銅離子在合適的化合價(jià)時(shí)，Click 反應(yīng)才有效。Click 反應(yīng)中用到的銅離子為二價(jià)銅(Cu2+)。
延長(zhǎng)Click 反應(yīng)的時(shí)間至超過(guò) 30 分鐘也并不會(huì)提高信號(hào)。建議使用新鮮的Click 反應(yīng)試劑再次進(jìn)行 30 分鐘的孵育，可更有效地提高標(biāo)記效率。
