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09-10 2015實(shí)驗(yàn)試劑生理鹽水（或PBS）弗氏*佐劑（Freund’scompleteadjuvant，F(xiàn)CA）弗氏不*佐劑（Freund’sincompleteadjuvant，F(xiàn)IA）二甲苯，酒精棉，脫脂棉，2%NaN3實(shí)驗(yàn)設(shè)備剪刀（剪兔毛用）一把、彎頭眼科手術(shù)鑷子（游離血管用）一把、直頭眼科手術(shù)剪（剪血管用）一把，手術(shù)刀架，手術(shù)刀片，注射器（1ml、10ml，25ml）附針頭，兔子固定架，滅菌三角燒瓶（200ml）或平皿（直徑18cm）、彎頭止血鉗四把，直頭止血鉗兩把，手術(shù)縫合線，塑料放血管，紗布等。實(shí)
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09-10 2015實(shí)驗(yàn)原理分子生物研究中，zui常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因植物拷貝數(shù)的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機(jī)引物合成法。切口平移法(nicktranslation)當(dāng)雙鏈DNA分子的一條鏈上產(chǎn)生切口時(shí),E.coliDNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的3'羥基末端。同時(shí)該酶具有從5'→3'的核酸外切酶活性,能從切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同時(shí)又在切口的3'端補(bǔ)上核苷酸,從而使切口沿著DNA鏈移動(dòng),用放射性核苷酸代替原先無放
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09-10 2015實(shí)驗(yàn)原理線粒體是細(xì)胞內(nèi)一種重要細(xì)胞器，是細(xì)胞進(jìn)行呼吸作用的場所。細(xì)胞的各項(xiàng)活動(dòng)所需要的能量，主要是通過線粒體呼吸作用來提供的?；铙w染色是應(yīng)用無毒或毒性較小的染色劑真實(shí)地顯示活細(xì)胞內(nèi)某些結(jié)構(gòu)而又很少影響細(xì)胞生命活動(dòng)的一種染色方法。詹納斯綠B是線垃體的專一性活體染色劑。線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)呈藍(lán)綠色，而在周圍的細(xì)胞質(zhì)中染料被還原，成為無色狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)試劑1.l／300詹納斯綠B染液2.Ringer氏液(哺乳類用)實(shí)驗(yàn)設(shè)備1.顯微鏡2.手術(shù)器材一套3.解剖盤4.小平皿5.載片6.蓋片7
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10-12 2013
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：分子克隆的常用載體
DNA段的克隆需要合適的載體，載體或是質(zhì)粒，或是噬菌體，或是病毒，通常大多經(jīng)過人工改造[地的。作為載體必須具備兩條件：一是該載體在細(xì)胞內(nèi)必須能自主復(fù)制，即必須具備復(fù)制原點(diǎn)；二是該載體必須具備適合的酶切位點(diǎn)，且這些酶切位點(diǎn)不在復(fù)制原點(diǎn)區(qū)域內(nèi)。以上兩條，保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆，載體上常有篩選標(biāo)記，如對(duì)抗菌素的抗性，某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等。一、質(zhì)粒常用的有pBR322，pUC系列質(zhì)粒等。（一）pBR322質(zhì)粒是4362bp的環(huán)狀雙鏈DNA載體，有2個(gè)抗藥性基因（四環(huán)素和 -
10-12 2013
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：基因組DNA甲基化分析
早期的基因組DNA甲基化分析技術(shù)，如SssI甲基轉(zhuǎn)移酶分析法、氯乙醛反應(yīng)法、免疫學(xué)抗體技術(shù)等，已經(jīng)不能滿足現(xiàn)代表觀遺傳學(xué)研究的需求。今年來常用的基因組甲基化的方法有以下兩種。1.甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性實(shí)驗(yàn)甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性實(shí)驗(yàn)技術(shù)被用于檢測雙向型真菌的DNA甲基化，它是在擴(kuò)增片段長度多態(tài)性技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來、基本程序是：提取高質(zhì)量的基因組DNA，分別用EcoRⅠ/HpaⅡ，EcoRⅠ/MspⅠ兩種酶組合對(duì)基因組DNA進(jìn)行雙酶切，并連上相應(yīng)的限制性內(nèi)切酶的接頭，然后以接頭序列設(shè)計(jì)的預(yù)擴(kuò)增引物，進(jìn)
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