著色劑又稱食品色素，可以使食品具有悅目的色澤，對增加食品的嗜好性及刺激食欲有著重要意義。合成著色劑因其價格低廉、顏色豐富、酸堿性條件下穩(wěn)定、易量產(chǎn)等特點，在各類食品中有著廣泛的應(yīng)用。我國現(xiàn)行的《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760-2014），其中明確規(guī)定了食品色素的使用原則、允許使用的色素種類、各種類的使用范圍、最大使用量或殘留量等事項。合格食品中色素的使用，必須得符合該國家標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)要求，才能很好地保證食品的安全。本文依據(jù)《GB 5009.35-2023 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測定》，建立食品中5種常見合成著色劑的超高效液相色譜檢測方法，為食品中合成著色劑的含量檢測提供參考。

01 實驗儀器

EXPEC 5180 超高效液相色譜儀（具體配有二元超高壓輸液泵ULC 580、自動進(jìn)樣器AS 580、柱溫箱CH 582、二極管陣列檢測器DAD 580，溶劑盤ET 580）

02 前處理方法

參照《GB 5009.35-2023 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測定》標(biāo)準(zhǔn)，試樣中的合成著色劑用乙醇氨水溶液提取，經(jīng)固相萃取凈化后氮吹復(fù)溶，過0.45μm濾膜后待測。

03 色譜圖

采用EXPEC 5180檢測獲得的5種著色劑色譜圖如下：

圖1 檸檬黃/莧菜紅/胭脂紅/日落黃/亮藍(lán)5種著色劑標(biāo)準(zhǔn)系列疊加色譜圖

04 標(biāo)準(zhǔn)曲線

用水逐級稀釋標(biāo)準(zhǔn)儲備液得到一系列濃度的5種合成著色劑混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（0.2μg/mL 、0.5 μg/mL、1μg/mL、2 μg/mL、5μg/mL 和 10 μg/mL），從低到高濃度依次進(jìn)樣分析，以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，其對應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，建立校準(zhǔn)曲線，5種合成著色劑線性相關(guān)系數(shù)均≥0.999。

圖2 5種著色劑的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

05 方法檢出限

配置0.5μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，按照S/N=10和S/N=3計算定量限和檢出限，結(jié)果如下表所示，五種著色劑檢出限均在0.03μg/mL以下，定量限均在0.095μg/mL以下，滿足且優(yōu)于標(biāo)準(zhǔn)要求0.3μg/mL的檢出限及1.0μg/mL的定量限。

06 精密度

配制濃度為 1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL 的合成著色劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣 6 針，分析各組樣品保留時間和峰面積的 RSD 以考察儀器精密度，結(jié)果如下表所示：保留時間 RSD范圍 0.06~0.35%，峰面積 RSD 范圍 0.30~3.67%，滿足且優(yōu)于國家標(biāo)準(zhǔn)要求的精密度≤10%。

07 回收率（準(zhǔn)確度）

對空白樣品進(jìn)行加標(biāo)實驗，通過實測濃度與加標(biāo)濃度比較，計算回收率。結(jié)果如下表所示：加標(biāo)回收率（n=6）范圍 96.5%~100.5%。