化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
移動端訪問更便捷
廣州艾迪基因科技有限責(zé)任公司作為基因編輯/細(xì)胞單克隆專家，公司專注于發(fā)展和優(yōu)化基于CRISPR/Cas的基因組編輯技術(shù)，依托*的單克隆打印平臺，為用戶提供高質(zhì)量的技術(shù)服務(wù)和基因編輯產(chǎn)品。
查看更多產(chǎn)品簡介
CRISPR檢測服務(wù)詳細(xì)信息
▍CRISPR檢測服務(wù)
艾迪基因基于CRISPR檢測開發(fā)的高靈敏度、高特異性、快速恒溫核酸檢測技術(shù)——FASST快速檢測技術(shù)，解決了傳統(tǒng)CRISPR檢測中存在的問題，如操作復(fù)雜、易污染、靈敏度低和耗時長。通過自主開發(fā)的蛋白質(zhì)純化平臺優(yōu)化Cas酶結(jié)構(gòu)，開發(fā)crRNA設(shè)計(jì)邏輯，生產(chǎn)高效crRNA，并使用自主設(shè)計(jì)的reporter，實(shí)現(xiàn)更高靈敏檢測，簡化操作步驟，減少污染風(fēng)險(xiǎn)。可根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)需求選擇：分步定制或全套定制檢測服務(wù)。
▍服務(wù)詳情
| 服務(wù)內(nèi)容 | 服務(wù)說明 | 交付標(biāo)準(zhǔn) |
|---|---|---|
| 制備靶標(biāo)基因模板 | 合成靶標(biāo)質(zhì)粒 | 靶標(biāo)質(zhì)粒 |
| crRNA和RPA恒溫?cái)U(kuò)增引物的設(shè)計(jì)與合成 | 根據(jù)靶標(biāo)序列設(shè)計(jì)crRNA和RPA引物 | crRNA，2 OD |
| RPA恒溫?cái)U(kuò)增引物的活性篩選 | 多對RPA引物分別擴(kuò)增靶標(biāo)序列，確認(rèn)效率好的引物對 | RPA恒溫?cái)U(kuò)增引物，2 OD |
| crRNA的活性篩選 | 多條crRNA進(jìn)行活性分析，確認(rèn)效率好的crRNA | 結(jié)題報(bào)告與原始數(shù)據(jù) |
| crRNA和RPA恒溫?cái)U(kuò)增引物的實(shí)驗(yàn)體系建立和優(yōu)化 | 對RPA引物對和crRNA的組合進(jìn)行靈敏度測試、特異性測試和準(zhǔn)確性測試 | 結(jié)題報(bào)告與原始數(shù)據(jù) |
| FASST檢測整套服務(wù) | / | 結(jié)題報(bào)告，50個反應(yīng)的試劑CRISPR配套試劑盒 |
▍FASST快速檢測平臺
FASST（Fast, accurate, specific, and simple test）是?種基于CRISPR檢測開發(fā)的下?代?靈敏度、?特異性、快速恒溫的單管核酸檢測技術(shù)。FASST依靠多種酶類在常溫下協(xié)同作?，實(shí)現(xiàn)核酸的快速擴(kuò)增和檢測，具有雙重特異性和雙重信號放大優(yōu)點(diǎn)，是真正的POCT技術(shù)。
傳統(tǒng)CRISPR檢測主要包括兩管反應(yīng)和單管反應(yīng)兩種形式。其中，兩管反應(yīng)操作復(fù)雜、易受污染；單管反應(yīng)雖然簡便且污染風(fēng)險(xiǎn)小，但靈敏度低、耗時。FASST技術(shù)基于艾迪基因自主開發(fā)的蛋白質(zhì)純化平臺，通過優(yōu)化升級Cas酶結(jié)構(gòu)，采用不同的crRNA設(shè)計(jì)邏輯，生產(chǎn)高效crRNA以及reporter，形成單管反應(yīng)檢測，在降低污染風(fēng)險(xiǎn)的情況下，將檢測限提高到amol級別，將檢測時間縮短至十分鐘，實(shí)現(xiàn)了靈敏特異、快速準(zhǔn)確的核酸檢測，解決了傳統(tǒng)CRISPR檢測的痛點(diǎn)。
原理圖
▍技術(shù)優(yōu)勢
▍技術(shù)對比
| 項(xiàng) 目 | FASST | PCR | LAMP等恒溫?cái)U(kuò)增 | 傳統(tǒng)CRISPR檢測 |
|---|---|---|---|---|
| 反應(yīng)溫度 | 37-42℃ 恒溫 | 95℃-55℃-72℃ 變溫 | 65℃ 恒溫 | 37-42℃ 恒溫 |
| 運(yùn)行時間 | 5-20 mins | 1-2h | 40-60mins | 30-60 mins |
| 引物數(shù)量 | 2條 | 2條 | 4-6條 | 2條 |
| 試劑狀態(tài) | 液體/凍干 | 液體 | 液體 | 液體/凍干 |
| 設(shè)備要求 | 恒溫設(shè)備(金屬浴，水浴等) | PCR擴(kuò)增儀 | 恒溫設(shè)備 | 恒溫設(shè)備(金屬浴，水浴等） |
| 操作性 | 操作極為簡單可實(shí)現(xiàn) 真正意義上的便攜 | 專業(yè)操作要求,高設(shè)備操作復(fù)雜 | 操作簡單 | 操作極為簡單 可實(shí)現(xiàn)真正意義上的便攜 |
| 氣溶膠污染 | 單管反應(yīng)，污染風(fēng)險(xiǎn)低 | 存在氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn) | 存在氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn) | 兩管反應(yīng)，存在氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn) |
▍實(shí)驗(yàn)流程
▍CRISPR檢測相關(guān)產(chǎn)品
● Cas酶
艾迪基因提供高純度、高活性的 Cas 酶，其靈敏度和活性均處于行業(yè)前沿水平。
● crRNA
● DNA恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒
DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒是基于一種常溫恒溫核酸快速擴(kuò)增技術(shù)開發(fā)的試劑盒，適用于實(shí)驗(yàn)室級別的DNA擴(kuò)增以及其他檢測用途的DNA擴(kuò)增使用。具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、反應(yīng)時間短等優(yōu)點(diǎn)，反應(yīng)組分為干粉狀態(tài)，操作簡便，易于保存。使用金屬浴、水浴鍋等即可進(jìn)行反應(yīng)操作，無需購買PCR儀等價格高昂的設(shè)備。
● RNA恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒是基于一種恒溫核酸快速擴(kuò)增技術(shù)開發(fā)的試劑盒，適用于實(shí)驗(yàn)室級別的RNA擴(kuò)增以及其他檢測用途的RNA擴(kuò)增使用。具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、反應(yīng)時間短（僅需30 min）等優(yōu)點(diǎn)，反應(yīng)組分為干粉狀態(tài)，操作簡便，易于保存。使用金屬浴、水浴鍋等即可進(jìn)行反應(yīng)操作，無需購買PCR儀等價格高昂的設(shè)備。
● 試紙條
● 探針
● T7體外轉(zhuǎn)錄試劑盒
● RNase 抑制劑
▍應(yīng)用案例
① 非洲豬瘟病毒檢測
結(jié)果：使用ASFV 1070檢測非洲豬瘟病毒，CRISPR/Cas12a一管法檢測技術(shù)可在10min內(nèi)檢測到100 copies的核酸;可在20min內(nèi)檢測到10-50 copies的核酸。
② 鸚鵡博爾納病毒檢測
結(jié)果：CRISPR/Cas12a兩管法檢測技術(shù)(RPA反應(yīng)30min，CRISPR檢測10min)可在40min內(nèi)檢測到10 copies的鸚鵡博爾納病毒核酸。
③ 流產(chǎn)布魯桿菌檢測
結(jié)果: CRISPR/Cas12a兩管法檢測技術(shù)(RPA反應(yīng)30min，CRISPR檢測10min)可在40min內(nèi)檢測到100 copies的流產(chǎn)布魯桿菌核酸。
▍FAQ
1、 如何提高Cas酶的檢測靈敏度？
1）設(shè)計(jì)高效的crRNA序列。通過合理的設(shè)計(jì)以及在線網(wǎng)站結(jié)構(gòu)預(yù)測，選擇合適的crRNA,以獲得良好的Cas酶反式切割活性。
2）選擇合適的信號報(bào)告底物。有關(guān)研究指出，使用15 nt的單鏈DNA（ssDNA）作為報(bào)告底物時，Cas12a的切割反應(yīng)速率達(dá)到一個高的值，相較于常用的5-nt ssDNA，反應(yīng)速率顯著提升。
3）優(yōu)化反應(yīng)條件和緩沖液。通過優(yōu)化CRISPR反應(yīng)的條件如Cas酶與crRNA比例、Cas酶使用濃度、反應(yīng)溫度等可以在一定程度上提高檢測效果。
2）選擇合適的信號報(bào)告底物。有關(guān)研究指出，使用15 nt的單鏈DNA（ssDNA）作為報(bào)告底物時，Cas12a的切割反應(yīng)速率達(dá)到一個高的值，相較于常用的5-nt ssDNA，反應(yīng)速率顯著提升。
3）優(yōu)化反應(yīng)條件和緩沖液。通過優(yōu)化CRISPR反應(yīng)的條件如Cas酶與crRNA比例、Cas酶使用濃度、反應(yīng)溫度等可以在一定程度上提高檢測效果。
2、 如何設(shè)計(jì)crRNA？
可根據(jù)以下步驟進(jìn)行設(shè)計(jì)
1）明確目的基因序列。
2）明確使用的Cas蛋白。不同的Cas蛋白，需要識別相應(yīng)的PAM（Protospacer Adjacent Motif）序列，例如Cas12a需要依靠“TTTV”PAM序列進(jìn)行靶標(biāo)識別。
3）選擇crRNA靶向區(qū)域。在目標(biāo)基因上選擇一個20nt核苷酸序列，該序列緊鄰PAM位點(diǎn)，且與crRNA的互補(bǔ)鏈配對。
4）選定的20nt靶向區(qū)域作為 target sequence（可變部分）加上scaffold sequence （固定部分）以設(shè)計(jì)crRNA序列。
5）使用在線工具如CRISPR design tool（例如CRISPOR、 Benchling等）來幫助設(shè)計(jì)crRNA。這些工具可以預(yù)測sgRNA的效率和特異性，避免可能的脫靶效應(yīng)。
6）設(shè)計(jì)完成后，可以通過合成生物學(xué)公司訂購合成的crRNA序列。
1）明確目的基因序列。
2）明確使用的Cas蛋白。不同的Cas蛋白，需要識別相應(yīng)的PAM（Protospacer Adjacent Motif）序列，例如Cas12a需要依靠“TTTV”PAM序列進(jìn)行靶標(biāo)識別。
3）選擇crRNA靶向區(qū)域。在目標(biāo)基因上選擇一個20nt核苷酸序列，該序列緊鄰PAM位點(diǎn)，且與crRNA的互補(bǔ)鏈配對。
4）選定的20nt靶向區(qū)域作為 target sequence（可變部分）加上scaffold sequence （固定部分）以設(shè)計(jì)crRNA序列。
5）使用在線工具如CRISPR design tool（例如CRISPOR、 Benchling等）來幫助設(shè)計(jì)crRNA。這些工具可以預(yù)測sgRNA的效率和特異性，避免可能的脫靶效應(yīng)。
6）設(shè)計(jì)完成后，可以通過合成生物學(xué)公司訂購合成的crRNA序列。
關(guān)聯(lián)品牌
留言咨詢
移動站：CRISPR檢測服務(wù)
內(nèi)容聲明：
您訪問的CRISPR檢測服務(wù)產(chǎn)品信息，由廣州艾迪基因科技有限責(zé)任公司自行發(fā)布提供，產(chǎn)品價格為面議，如您想了解更多關(guān)于CRISPR檢測服務(wù)型號、參數(shù)、用途等信息，歡迎咨詢。
該內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由發(fā)布會員負(fù)責(zé)，為保障安全，建議您在購買相關(guān)產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)以及產(chǎn)品質(zhì)量！
相關(guān)分類
Categories
該廠商其他產(chǎn)品
Other Products
相關(guān)技術(shù)文章
Tech Articles
- 巨噬細(xì)胞清除小鼠模型構(gòu)建試劑選購指南
- 《Nature》：巨噬細(xì)胞胞啃樣機(jī)制（trogocytosis）
- 如何解決批次差異？離體豬皮質(zhì)量控制與實(shí)驗(yàn)規(guī)范
- 人支氣管成纖維細(xì)胞核心優(yōu)勢：維持氣道功能的關(guān)鍵
- 什么是移動機(jī)器人？
- CRISPR文庫主流服務(wù)商綜合推薦
- 小動物體脂分析儀耗材與維護(hù)保養(yǎng)要點(diǎn)
- 肝微粒體實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)化與質(zhì)量控制要點(diǎn)
- 離體豬皮用于皮膚消毒劑安全性測試
- 離體人皮保存方法對角質(zhì)層完整性的影響
采購中心
用戶評論
發(fā)布評論