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移動(dòng)端訪問更便捷美國Becton,DickinsonandCompany(BD公司)是一家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售醫(yī)療設(shè)備、醫(yī)療系統(tǒng)和試劑的醫(yī)療技術(shù)公司,專注于改進(jìn)藥物傳輸,提高傳染性疾病和癌癥診斷的質(zhì)量和速度,推進(jìn)新型藥物和疫苗的研發(fā)與生產(chǎn)。
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公眾號(hào):chem17
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| 面議 |
BD/美國
代理商
792
江蘇南京市
2025/7/29 13:39:22
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 兩周 | 規(guī)格 | 支 |
BD Phosflow裂解/固定緩沖液(5X)558049,BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer 5X
用途
本產(chǎn)品用于全血裂解與固定,適用于細(xì)胞內(nèi)流式細(xì)胞術(shù)分析。例如,在使用激酶激活劑(如佛波酯)刺激細(xì)胞后,BD Phosflow™ 裂解/固定緩沖液可一步完成紅細(xì)胞裂解與白細(xì)胞固定,使研究者能夠快速滅活激酶、磷酸酶和/或蛋白酶,從而檢測細(xì)胞內(nèi)的真實(shí)磷酸化狀態(tài)。
特性
經(jīng)測試可保留細(xì)胞的光散射特性
適用于人源及小鼠全血樣本
在淋巴細(xì)胞亞群分析中,全血裂解效果與密度梯度離心法分離PBMCs相當(dāng)
兼容性說明
多數(shù)情況下,磷酸化特異性抗體可與細(xì)胞表面標(biāo)志物(如CD標(biāo)志物)同步染色。但請(qǐng)注意,并非所有表面標(biāo)志物均與本產(chǎn)品兼容。
BD Phosflow裂解/固定緩沖液(5X)558049,BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer 5X
流式細(xì)胞術(shù)操作步驟
樣本處理
使用EDTA或肝素抗凝管采集正常人外周血,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求加入相應(yīng)激活劑處理。
工作液配制
2. 將BD Phosflow™裂解/固定緩沖液(5X濃縮液)按1:5比例用去離子水/蒸餾水(室溫)稀釋為1X工作液,37°C預(yù)熱。工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,實(shí)驗(yàn)剩余溶液應(yīng)棄置。
裂解固定
3. 按1:20比例(血樣:工作液)混合抗凝血與預(yù)熱的1X工作液,強(qiáng)力顛倒混勻8-10次,37°C水浴孵育10分鐘。
細(xì)胞洗滌
4. 500×g離心8分鐘,棄上清,用Hank's solution洗滌細(xì)胞一次。
透膜處理
5. 渦旋重懸細(xì)胞,邊震蕩邊緩慢加入透膜試劑(如預(yù)冷的BD Phosflow™ Perm Buffer II),冰上孵育30分鐘后離心。
抗體標(biāo)記
6. 洗滌細(xì)胞兩次,用BD Pharmingen™ Staining Buffer染色緩沖液重懸。
7. 加入相應(yīng)抗體室溫避光染色30-60分鐘,洗滌后準(zhǔn)備上機(jī)檢測。
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