一、內(nèi)容概要

二、TNF-β 研究背景介紹

1. 自身免疫疾病：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周體液 TNF-β 表達(dá)顯著上調(diào)，協(xié)同 TNF-α 促進(jìn)滑膜增生、自身抗體生成，介導(dǎo)骨關(guān)節(jié)與多臟器損傷，是評(píng)估炎癥活動(dòng)度的重要標(biāo)志物；

2. 腫瘤微環(huán)境：TNF-β 具備雙向調(diào)控效應(yīng)，既可直接誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡發(fā)揮抑癌作用，也可通過激活 NF-κB 通路促進(jìn)腫瘤血管新生、腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移，是腫瘤轉(zhuǎn)移、免疫逃逸機(jī)制研究核心靶點(diǎn)；

3. 感染與慢性炎癥：細(xì)菌、病毒感染引發(fā)的全身炎癥反應(yīng)中，TNF-β 同步釋放，參與急性期免疫應(yīng)答，可用于區(qū)分感染輕重程度；

4. 藥物研發(fā)：靶向 TNF 通路抗炎、抗腫瘤候選藥物研發(fā)中，體液 TNF-β 定量是藥效評(píng)價(jià)、劑量篩選的核心檢測指標(biāo)。

三、產(chǎn)品基礎(chǔ)信息介紹

• 產(chǎn)品全稱：未包被人腫瘤壞死因子 β（TNF-β）酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

• 貨號(hào)：E-UNEL-H0389

• 檢測種屬：人

• 反應(yīng)模式：夾心 Sandwich-ELISA、比色法

• 檢測范圍：15.63–1000 pg/mL

• 檢測靈敏度：3.81 pg/mL

• 單次樣本用量：100 μL

• 適配樣本：血清、血漿、各類生物體液

• 總反應(yīng)周期：24 h

• 儲(chǔ)存條件：-20℃避光密封保存

• 有效期：未開封儲(chǔ)存 12 個(gè)月

四、檢測原理

1. 實(shí)驗(yàn)人員使用試劑盒內(nèi)捕獲抗體自行包被酶標(biāo)板，低溫孵育過夜后封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)；

2. 向孔內(nèi)加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品或待測生物樣本，樣本中 TNF-β 抗原與固相捕獲抗體特異性結(jié)合；

3. 洗去未結(jié)合雜質(zhì)后，加入生物素化抗人 TNF-β 檢測抗體，形成 “捕獲抗體 - TNF-β- 生物素標(biāo)記檢測抗體” 免疫復(fù)合物；

4. 加入 HRP 標(biāo)記親和素，依靠生物素 - 親和素特異性結(jié)合連接酶標(biāo)記物，再次洗板去除游離酶結(jié)合物；

5. 加入 TMB 顯色底物，在 HRP 催化下底物呈藍(lán)色，室溫 37℃避光孵育 15 min；

6. 終止液終止顯色反應(yīng)，溶液轉(zhuǎn)為黃色；酶標(biāo)儀 450 nm 波長讀取各孔 OD 值；

7. TNF-β 濃度與 OD450 數(shù)值呈正向線性相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合計(jì)算樣本內(nèi) TNF-β 精確含量。

五、標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟

1. 包被：每孔添加 100 μL 捕獲抗體工作液，2–8℃孵育過夜；棄液后加入 200 μL 封閉液，37℃封閉 60 min；

2. 抗原結(jié)合：甩干封閉液，每孔加入 100 μL 標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本，37℃孵育 90 min；

3. 一抗結(jié)合：棄液后直接加入 100 μL 生物素化抗體工作液，37℃孵育 60 min；

4. 洗板：棄液，洗板 3 次；

5. 酶結(jié)合：每孔 100 μL HRP 親和素工作液，37℃孵育 30 min，棄液后洗板 5 次；

6. 顯色：每孔 90 μL TMB 底物，37℃避光反應(yīng) 15 min；

7. 終止讀數(shù)：加入 50 μL 終止液混勻，即刻 450 nm 測定 OD 值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。

六、核心應(yīng)用領(lǐng)域

1. 基礎(chǔ)免疫學(xué)研究

2. 腫瘤免疫與轉(zhuǎn)移機(jī)制

3. 自身免疫與炎癥疾病

4. 抗感染免疫研究

5. 新藥研發(fā)與藥效評(píng)價(jià)

6. 臨床生物標(biāo)志物探索

七、產(chǎn)品核心優(yōu)勢

1. 實(shí)驗(yàn)自由度高，支持體系自主優(yōu)化

2. 長期使用成本可控，適配高通量實(shí)驗(yàn)

3. 檢測性能穩(wěn)定，低豐度樣本可檢出

4. 特異性良好，減少結(jié)果干擾

5. 樣本兼容廣泛，操作門檻友好

6. 配套體系完shan，實(shí)驗(yàn)一站式配齊

總結(jié)