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輕松比對 western blot 蛋白質(zhì)分子量
 

LuminolPen魯米諾化學(xué)發(fā)光筆 (LuminolPen HRP System) 為 Western blotting筆，內(nèi)含*墨水，可于轉(zhuǎn)印膜表面標(biāo)記 pre-stained protein ladder 標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)位置與實驗信息，搭配化學(xué)發(fā)光試劑使用，墨水印跡可顯示于成像檢測系統(tǒng)或是 X-ray film，用戶可立即從影像上判斷目標(biāo)蛋白質(zhì)的分子量大小。
 

一、產(chǎn)品特點：

1. 創(chuàng)新的Western blotting筆

2. 提供Western blotting目標(biāo)蛋白質(zhì)的分子量位置

3. 可標(biāo)記各項訊息于轉(zhuǎn)印膜，記錄實驗信息

4. 可作為 ECL 化學(xué)冷光試劑的效能判斷指標(biāo)
 

二、實驗步驟：

1. 使用 Pre-stained protein ladder 與蛋白樣本一同進(jìn)行膠體電泳。

2. 將SDS-PAGE 轉(zhuǎn)印至PVDF或 Nitrocellulose membrane，轉(zhuǎn)印完成后，利用濾紙 (e.g. Whatman #50) 移除轉(zhuǎn)印膜上的殘留液體，但需維持轉(zhuǎn)印膜濕潤，避免過度干燥。

3. 以 LuminolPen 標(biāo)記轉(zhuǎn)印膜表面的 Pre-stained protein ladder位置，也可于空白處注記實驗信息。

4. 注記完成的轉(zhuǎn)印膜即可進(jìn)行Blocking 與后續(xù)Western blotting的實驗步驟。

5. 轉(zhuǎn)印膜以發(fā)光試劑處理后，LuminolPen 所標(biāo)記的訊號即可透過底片或影像系統(tǒng)進(jìn)行拍攝。

三、實驗操作圖：

四、實驗結(jié)果圖：

五、常見問題與建議

Q1：LuminolPen HRP System可以使用多少次?

A1：LuminolPen (LH03-50) 的容量約可以涂寫1000次轉(zhuǎn)印膜。
 

Q2：不同品牌或靈敏度的化學(xué)發(fā)光試劑都可以適用于LuminolPen HRP System嗎？

A2：LuminolPen可適用于不同品牌之高階或低階靈敏度的發(fā)光試劑，使用者*次使用時，建議在所需記號位置先畫一筆，之后使用時，可依據(jù)上次發(fā)光亮度強(qiáng)度，調(diào)整使用量，重復(fù)劃，可以使發(fā)光亮度變強(qiáng)。

Q3：請問使用 LuminolPen 對于底片曝光的使用者有什么優(yōu)點？

A3：LuminolPen HRP system 除了可以在轉(zhuǎn)印膜提供分子量大小標(biāo)示，也可以標(biāo)示每一個樣品編號、實驗時間和名稱并直接顯示在底片上，當(dāng)使用者進(jìn)行大量 X-ray Film 壓片時，不會因為在暗房中標(biāo)記不便而造成壓片后搞混 X-ray Film而無法區(qū)分實驗結(jié)果。

Q4：請問 LuminolPen HRP System 如何作為ECL 化學(xué)發(fā)光試劑的效能判斷指標(biāo)？

A4：在進(jìn)行Western blotting 實驗時擔(dān)心得到?jīng)]有影像的結(jié)果，造成無影像的其中一個原因是化學(xué)發(fā)光試劑失去活性。使用 LuminolPen 可以作為一個檢測指針，間接偵測化學(xué)發(fā)光試劑是否仍具備活性，如果化學(xué)發(fā)光試劑失活，則 LuminolPen 所做的記號將無法發(fā)光。