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ABV-A10S
411
上海市
2026/6/24 17:33:55
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 一個(gè)月 | 貨號(hào) | ABV-A10S |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
ABVector ProEasy A10S 試劑
ProEasy™是一種改良的桿狀病毒基因組DNA，在操作簡(jiǎn)便和蛋白質(zhì)生產(chǎn)規(guī)模化時(shí)可靠且高水平的靶蛋白表達(dá)方面，極大地優(yōu)于傳統(tǒng)桿狀病毒技術(shù)。由于操作簡(jiǎn)單，它也非常適合高通量應(yīng)用。這一改進(jìn)之所以能實(shí)現(xiàn)，是因?yàn)橛H本ProEasy™杯狀病毒含有一種基因敲除，在用于重組桿狀病毒生成和傳播的標(biāo)準(zhǔn)條件下無(wú)法復(fù)制病毒（見(jiàn)圖1）。因此，任何背景可能性，即父母非重組桿狀病毒污染的可能性都已被排除。ProEasy™無(wú)法在昆蟲(chóng)細(xì)胞中發(fā)起感染，除非其與編碼感興趣蛋白質(zhì)的質(zhì)粒載體DNA重組。市售的ProEasyDNA™也通過(guò)Bsu36.I限制性核酸酶線(xiàn)性化，以促進(jìn)與轉(zhuǎn)運(yùn)載體的重組。在強(qiáng)多面體啟動(dòng)子的控制下，目標(biāo)基因插入到桿狀病毒DNA的多面體位點(diǎn)。這能實(shí)現(xiàn)桿狀病毒系統(tǒng)中靶向蛋白質(zhì)合成的最高速率。
| 圖1。核心技術(shù)與ProEasy™技術(shù)的比較。 答：核心技術(shù)。親本桿狀病毒中的多面體位點(diǎn)由大腸桿菌b-半乳糖苷酶基因占據(jù)，該基因通過(guò)商業(yè)化的BacPAK6™和BaculoGold™載體通過(guò)Bsu36.I消化去除。少量由未消化DNA產(chǎn)生的親本桿狀病毒，在轉(zhuǎn)染后可能污染桿狀病毒后代，因?yàn)樗芨咝У貍鞑ァ?br _mstmutation="1" _istranslated="1"/>B. ProEasy™ 技術(shù)。親本桿狀病毒的多面體位點(diǎn)被一個(gè)致死基因占據(jù)，該基因不允許親本桿狀病毒傳播。因此，獲得的重組桿狀病毒株是100%重組的。 | ||||
推薦的質(zhì)粒轉(zhuǎn)移載體。AB Vector提供大量質(zhì)粒轉(zhuǎn)移載體，用于ProEasy™桿狀病毒基因組載體DNA（見(jiàn)圖2）。所有質(zhì)粒轉(zhuǎn)移載體都具有相同的“主鏈”，使大腸桿菌中復(fù)制質(zhì)粒DNA成為可能，且僅在多面體啟動(dòng)子的下游部分有所不同。目標(biāo)蛋白可以通過(guò)GST、His、GFP、MBP或雙重His/MBP標(biāo)簽表達(dá)，也可以使用pVL1393質(zhì)粒載體表達(dá)，也可以在無(wú)標(biāo)簽的情況下表達(dá)。我們還提供具有高效信號(hào)序列（pAB-bee™、pAB-bee-8xHis™、pAB-bee-FH™）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)移載體，以促進(jìn)分泌蛋白和膜蛋白的表達(dá)。C端標(biāo)簽是可選的，前提是目標(biāo)基因ORF末端有終止密碼子;舉例說(shuō)明pAB-bee™載體，顯示兩次目標(biāo)基因克隆，帶或無(wú)C端Heas標(biāo)記。使用pAcAB3載體最多可表達(dá)3個(gè)靶蛋白（未顯示）。任何與BacPAK6™和BaculoGold™載體兼容的質(zhì)粒轉(zhuǎn)移載體也兼容ProEasy™ DNA。
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| 圖2。與ProEasy™兼容的質(zhì)粒轉(zhuǎn)移載體。目標(biāo)基因可以克隆到任一這些質(zhì)粒載體中，并通過(guò)“強(qiáng)制重組”轉(zhuǎn)移到ProEasy™桿狀病毒基因組DNA中。點(diǎn)擊下方的病媒名稱(chēng)鏈接，獲取有關(guān)病體的詳細(xì)信息。 |
| ProEasy™相較于其他桿狀病毒技術(shù)的優(yōu)勢(shì)。使用核心桿狀病毒技術(shù)獲得的重組桿狀病毒庫(kù)存中，總含有少量非重組桿狀病毒。因此，建議通過(guò)終末稀釋或斑塊純化純化病毒庫(kù)存，尤其是在目標(biāo)蛋白具有細(xì)胞毒性或用于大規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)時(shí)。在這種情況下，少量親本桿狀病毒可能因選擇優(yōu)勢(shì)而在病毒群體中擴(kuò)散，而該病毒表達(dá)的目標(biāo)蛋白可能傳播效率較低。然而，菌斑純化的BaculoGold™或BacPAK6™病毒庫(kù)在多段過(guò)程中具有可靠性，且適合在實(shí)驗(yàn)室中持續(xù)使用。 Invitrogen基于巴克米德的技術(shù)，尤其是Bac-to-Bac™技術(shù)，常被青睞，因?yàn)樗鼈冊(cè)谵D(zhuǎn)染后幾乎能生成100%的真正重組體。然而，由于存在轉(zhuǎn)座子序列，Bac-Bac™重組體據(jù)報(bào)道可能不穩(wěn)定，導(dǎo)致重組桿狀病毒中目標(biāo)基因缺失，病毒傳播過(guò)程中重組蛋白表達(dá)減少甚至最終喪失（Pijlman G.P.等，《Verol雜志》，84： 2669-2678,2003）。當(dāng)目標(biāo)蛋白略有細(xì)胞毒性或最初過(guò)度表達(dá)時(shí)，這種效應(yīng)尤為明顯。由于存在轉(zhuǎn)座子序列，重組桿狀病毒本身不穩(wěn)定，無(wú)法通過(guò)菌株純化可靠修復(fù)此類(lèi)菌株。 ABVector ProEasy A10S 試劑 ProEasy™技術(shù)沒(méi)有這些缺點(diǎn)。它促進(jìn)了100%純度穩(wěn)定的重組桿狀病毒菌株的生成。使用ProEasy™技術(shù)獲得的重組桿狀病毒不含任何遺傳元素，如轉(zhuǎn)座子，這些元素會(huì)導(dǎo)致重組桿狀病毒不穩(wěn)定。此外，使用ProEasy™生成重組桿狀病毒比使用其他載體更為簡(jiǎn)單，且操作簡(jiǎn)單。據(jù)我們所知，該產(chǎn)品在昆蟲(chóng)細(xì)胞中沒(méi)有遺傳致病性，也沒(méi)有與其他桿狀病毒載體不同的蛋白質(zhì)表達(dá)特性。 |
上海寶葉生物科技有限公司
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