cube biotech HighSpec Rho1D4 Agarose
關(guān)鍵理化參數(shù)
基質(zhì):6% 交聯(lián)瓊脂糖微球,粒徑 40–100 μm
配體:共價固定抗 Rho1D4 單克隆抗體
動態(tài)結(jié)合容量:≥3 mg Rho1D4 標記蛋白 /mL 樹脂
解離常數(shù) KD≈20 nM,特異性強,雜蛋白非特異吸附極低
耐受體系:兼容各類去垢劑、SMALP 聚合物、變性 / 天然緩沖液
供貨形態(tài):50% 樹脂漿液(20% 乙醇防腐)
流速推薦:0.25–1 mL/min,最大耐受 6 mL/min
完整純化流程(三步法)
結(jié)合(Bind)
SMALP 增溶后的膜蛋白裂解液與樹脂批量孵育,抗體特異性捕獲 Rho1D4 標簽?zāi)さ鞍祝s蛋白游離在液相。
洗滌(Wash)
洗滌緩沖液去除未結(jié)合雜蛋白、脂質(zhì)、SMALP 聚合物,大幅提升蛋白純度(最終純度>85%)。
溫和洗脫(Elute)
加入游離 Rho1D4 多肽競爭性結(jié)合抗體,溫和釋放目標蛋白;無需強酸強堿,完整保留膜蛋白天然構(gòu)象與脂質(zhì)環(huán)境,適配冷凍電鏡樣品制備
儲存與凍融穩(wěn)定性(Freeze-thaw stable 說明)
長期儲存:4℃避光,20% 乙醇緩沖液,有效期 2 年;嚴禁冷凍,Not freeze-thaw stable,凍融會破壞瓊脂糖微球結(jié)構(gòu),喪失結(jié)合能力。
短期存放:使用后 4℃冷藏,禁止反復(fù)凍融。
運輸:冷鏈低溫發(fā)貨,不可干冰冷凍運輸。
cube biotech HighSpec Rho1D4 Agarose
實驗結(jié)果
Rho1D4標簽純化產(chǎn)品在純化低豐度蛋白質(zhì)方面尤其實用。其中一大類蛋白質(zhì)是膜蛋白。即使?jié)舛冗^高,也遠不及可溶性對應(yīng)物。
圖1展示了四種不同膜蛋白的純化過程。每次純化都帶來了
高的純度和大量蛋白質(zhì)。

| 特色 |
|
|---|
| 用途 | Rho1D4標記蛋白的特異性結(jié)合與純化 |
| 特異性 | 對Rho1D4標記蛋白(TETSQVAPA)的親和力 |
| 結(jié)合能力 | >3 mg/ml(用150 kDa的Rho1D4標記膜蛋白測定) |
| 珠配體 | 抗Rho1D4抗體 |
| 珠粒尺寸 | 50-150微米,球形 |
| 矩陣 | 6%交聯(lián)瓊脂糖 |
| 耐壓 | ≥300 kPa(床高15厘米時)/td> |
| 最大流量 | ≥1000厘米/小時(床高15厘米時)n |
| 填充量 | 懸掛為50%版本 |
| 存儲緩沖區(qū) | 20 mM Sodium Acetate,含20%乙醇,pH值6.6 |
| 尺寸排除限制 | 4 x 106是的 |
| 短期存儲 | 在中性緩沖液中(例如50 mM磷酸鹽,pH 7.0) |
| 長期儲存 | 在20 mM Sodium Acetate與20%乙醇中,pH值為6.6 |
| 穩(wěn)定性 | 未開封發(fā)貨后兩年 |
| 運輸條件 | 藍冰 |
| 所需設(shè)備 | |
上海寶葉生物科技有限公司
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