內(nèi)容概要

研究背景

1. 衰老調(diào)控：SIRT1 參與 DNA 損傷修復(fù)、干細(xì)胞衰老、染色質(zhì)表觀重塑，熱量限制延緩衰老的核心通路依賴 SIRT1 激活，缺失 SIRT1 會(huì)加速人體間充質(zhì)干細(xì)胞衰老進(jìn)程；

2. 神經(jīng)疾病：在阿爾茨海默病、焦慮癥模型中，SIRT1 可抑制 Aβ 沉積、調(diào)控應(yīng)激相關(guān)神經(jīng)通路，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，是神經(jīng)退行性疾病藥物靶點(diǎn)熱門方向；

3. 腫瘤與血液疾病：在骨髓增生異常綜合征、胰腺癌、多發(fā)性骨髓瘤中，SIRT1 表達(dá)水平直接關(guān)聯(lián)腫瘤干細(xì)胞存活、化療耐藥，靶向 SIRT1 抑制劑 / 激動(dòng)劑是抗腫瘤研發(fā)重要思路；

4. 代謝與炎癥：調(diào)控肝臟脂代謝、血管內(nèi)皮穩(wěn)態(tài)、肺部衰老相關(guān)炎癥，參與慢阻肺、纖維化、心血管損傷病理進(jìn)程。

基礎(chǔ)介紹

• 產(chǎn)品全稱：未包被人沉默調(diào)節(jié)蛋白 1（SIRT1）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

• 貨號(hào)：E-UNEL-H0391

• 反應(yīng)種屬：人源

• 檢測(cè)方法：雙抗體夾心 ELISA（比色法，450nm 讀數(shù)）

• 規(guī)格選擇：96T×5 / 96T×15 兩種規(guī)格

• 配套輔助試劑：可搭配輔助組分試劑盒（貨號(hào) E-ELIR-K001）使用

• 儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，有效期 12 個(gè)月

• 總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)：24h（含包被過夜孵育步驟）

檢測(cè)原理

1. 實(shí)驗(yàn)人員自主向酶標(biāo)板加入捕獲抗體工作液，低溫過夜包被，使抗人 SIRT1 抗體固定于板孔；封閉液封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)；

2. 加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本，樣本中 SIRT1 抗原與板孔捕獲抗體特異性結(jié)合；

3. 加入生物素化檢測(cè)抗體，與抗原另一表位結(jié)合，形成 “捕獲抗體 - SIRT1 - 生物素化檢測(cè)抗體” 夾心復(fù)合物；

4. 洗滌去除未結(jié)合游離組分，加入 HRP 標(biāo)記親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；

5. TMB 顯色底物在辣根過氧化物酶催化下生成藍(lán)色產(chǎn)物，終止液終止反應(yīng)后溶液轉(zhuǎn)為黃色；

6. 酶標(biāo)儀 450nm 波長(zhǎng)讀取 OD 值，SIRT1 濃度與吸光度呈正向相關(guān)，依托標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本蛋白濃度。

核心優(yōu)勢(shì)

1. 實(shí)驗(yàn)自由度高，支持條件自主優(yōu)化：區(qū)別于預(yù)包被成品試劑盒，未包被設(shè)計(jì)將包被濃度、孵育溫度、封閉時(shí)長(zhǎng)等參數(shù)調(diào)整權(quán)交還研究者，適配需要優(yōu)化反應(yīng)體系、開發(fā)個(gè)性化檢測(cè)方案的成熟實(shí)驗(yàn)室。

2. 成本友好，適配大批量樣本研究：提供 96T×5、96T×15 大包裝規(guī)格，長(zhǎng)期、多批次臨床樣本 / 動(dòng)物模型檢測(cè)可降低單樣本檢測(cè)成本，適合課題組長(zhǎng)期課題、高通量篩選實(shí)驗(yàn)。

3. 檢測(cè)性能均衡穩(wěn)定，質(zhì)控體系：低至 0.06 ng/mL 靈敏度可檢測(cè)低表達(dá)體液樣本；CV＜10%、回收率 80%–120%，梯度標(biāo)準(zhǔn)品線性區(qū)間寬，數(shù)據(jù)重復(fù)性符合期刊實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)要求。

4. 樣本兼容性廣：無需復(fù)雜前處理即可檢測(cè)人血清、血漿及腦脊液、肺泡灌洗液等多種生物體液，適配臨床隊(duì)列樣本、基礎(chǔ)動(dòng)物模型體液檢測(cè)需求。

5. 特異性強(qiáng)，減少實(shí)驗(yàn)干擾：雙抗體配對(duì)經(jīng)嚴(yán)格篩選，僅靶向人源 SIRT1，與 Sirtuin 家族其他亞型、同源蛋白無明顯交叉反應(yīng)，降低假陽性干擾。

6. 配套體系完整：可搭配 Elabscience 專用 ELISA 輔助試劑盒統(tǒng)一配套使用，試劑組分匹配度高，減少自行配制緩沖液帶來的實(shí)驗(yàn)誤差。

應(yīng)用領(lǐng)域

• 衰老與干細(xì)胞生物學(xué)：人體干細(xì)胞衰老、端粒穩(wěn)態(tài)、熱量限制干預(yù)、抗衰老天然產(chǎn)物 / 小分子藥物篩選，定量檢測(cè)干預(yù)前后體液 SIRT1 表達(dá)變化。

• 神經(jīng)科學(xué)與精神疾?。?/strong>阿爾茨海默病、帕金森病、慢性焦慮、抑郁模型隊(duì)列樣本檢測(cè)，探究 SIRT1 神經(jīng)保護(hù)、應(yīng)激調(diào)控機(jī)制。

• 腫瘤與血液疾病研究：胰腺癌、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征等疾病樣本 SIRT1 表達(dá)檢測(cè)，用于化療耐藥機(jī)制、靶向藥物藥效評(píng)價(jià)。

• 代謝與心血管疾?。?/strong>肥胖、非酒精性脂肪肝、動(dòng)脈粥樣硬化、血管損傷模型，分析 SIRT1 調(diào)控脂代謝、內(nèi)皮保護(hù)作用。

• 呼吸系統(tǒng)疾?。?/strong>慢阻肺、肺纖維化衰老相關(guān)炎癥機(jī)制，SIRT1 激動(dòng)劑肺部保護(hù)藥效評(píng)價(jià)。

• 臨床轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)：人體臨床大隊(duì)列血清 / 血漿樣本篩查，探索 SIRT1 作為疾病輔助診斷、預(yù)后評(píng)估潛在標(biāo)志物。

總結(jié)