使用賽默飛NanoDrop Ultra C FL時，如果遇到“樣品體積不足或位置偏移”的問題，通常和移液操作、儀器狀態(tài)或樣品本身有關(guān)。別擔(dān)心，這通常是些小問題，我來幫你一步步解決。

一、核心原因與快速排查

這個問題大多數(shù)時候是由以下幾個原因?qū)е碌模?/span>

1、樣品體積不足

說明：點樣量低于儀器要求的低體積，無法在上下基座間形成完整、穩(wěn)定的液柱。吸光度模式（Abs）低需要 1 µL，熒光模式（FL）低需要 2 µL。

2、移液操作不當(dāng)

原因：吸樣時吸入氣泡，或打出樣品時用力過猛產(chǎn)生氣泡。樣品未點在基座中心區(qū)域，導(dǎo)致光路無法覆蓋。

3、基座疏水性變差

原因：長期使用或接觸表面活性劑等試劑后，基座表面的疏水涂層受損，導(dǎo)致樣品無法形成圓形液滴而是平攤開，難以形成液柱。

4、樣品特性問題

原因：樣品過于粘稠（如高濃度蛋白或未充分溶解的DNA），不容易形成完整液柱。

二、一步一步解決問題

你可以按照下面的順序來檢查和解決：

1、檢查并調(diào)整操作：確認(rèn)點樣量是否在 1.5-2 µL 范圍內(nèi)，對于蛋白質(zhì)樣品，建議點樣 2 µL。點樣時，將吸頭頂部輕輕接觸下基座表面，平穩(wěn)打出。吸液時，吸頭應(yīng)插入液面下，避免吸入氣泡；打液時只按到移液器第一擋，切勿按到第二擋吹出氣泡。點樣后應(yīng)立刻閉合檢測臂，以防樣品蒸發(fā)。

2、判斷并修復(fù)基座：點樣后觀察，如果液滴平攤開來而不是形成飽滿的“水珠”，就說明基座疏水性變差。此時需要使用賽默飛提供的PR-1基座修復(fù)試劑盒。取微量修復(fù)液均勻涂在上下基座上，等待約30秒后，用無塵紙擦凈即可恢復(fù)疏水性。

3、排除其他干擾：對于一些粘稠或大分子（如基因組DNA）樣品，點樣前應(yīng)充分混勻，可溫和渦旋震蕩，或置于 55°C - 63°C 加熱幾分鐘，以確保樣品均一。每次測量后，用濕潤的無塵紙單向擦拭上下基座；測量不同樣品前，務(wù)必清潔，防止交叉污染。測量前請做空白校正（Blank），注意空白溶劑應(yīng)與樣品溶解液一致。

三、智能預(yù)警，防患于未然

NanoDrop Ultra C FL 內(nèi)置的 Acclaro 樣品智能檢測技術(shù) 是個很省心的功能。檢測過程中，如果儀器內(nèi)置攝像頭發(fā)現(xiàn)樣品中有氣泡，軟件會通過實時畫面發(fā)出警告，及時提醒你。

希望這些步驟能幫你解決問題。如果在排查時發(fā)現(xiàn)基座疏水性問題是反復(fù)出現(xiàn)的困擾，也可以考慮定期使用PR-1試劑盒進(jìn)行維護(hù)，讓它恢復(fù)到狀態(tài)。