很多同學(xué)覺(jué)得GFP和EGFP、avGFP都是綠色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)應(yīng)該都一樣，用便攜式熒光蛋白激發(fā)光源的450nm波段去觀察GFP的表達(dá)，但有時(shí)候無(wú)法看到gfp的熒光表達(dá)，不知道是設(shè)備原因還是沒(méi)有表達(dá)成功。

   大家在觀察熒光蛋白表達(dá)之前，一定要看自己質(zhì)粒圖譜用的到底是哪種GFP，如果是GFP、wtGFP、avGFP必須用紫外光源去激發(fā)（365nm波段，LUYOR-3280UV），如果的eGFP、mEGFP那要藍(lán)光波段(450nm LUYOR-3280RB)去激發(fā)。

 下面是幾種綠色熒光蛋白的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)圖譜：

  GFP又名 wtGFP， avGFP， gfp10， 綠色熒光蛋白

  GFP綠色熒光蛋白是一種基本的（構(gòu)成熒光的）長(zhǎng)斯托克斯位移熒光蛋白，發(fā)表于1992年，來(lái)源于Aequorea victoria。它對(duì)酸的敏感性低。GFP激發(fā)光的波長(zhǎng)是395nm，mEGFP發(fā)射光的波長(zhǎng)是509nm。

  圖一：wtGFP， avGFP熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光

  EGFP又名增強(qiáng)型GFP，GFPmut1

  EGFP綠色熒光蛋白是1996年發(fā)表的一種堿性（構(gòu)成性熒光）綠色熒光蛋白，來(lái)源于Aequorea victoria。據(jù)報(bào)道，它是一種快速成熟的弱二聚體，具有中等酸敏感性。mEGFP激發(fā)光的波長(zhǎng)是488nm，mEGFP發(fā)射光的波長(zhǎng)是507nm

  圖二：eGFP熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光

  mEGFP綠色熒光蛋白

  mEGFP綠色熒光蛋白是2002年發(fā)表的一種堿性（構(gòu)成性熒光）綠色熒光蛋白，來(lái)源于Aequorea victoria。它具有中等酸敏感性。mEGFP激發(fā)光的波長(zhǎng)是488nm，mEGFP發(fā)射光的波長(zhǎng)是507nm。

   圖三：mEGFP熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光

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圖五：GFP在水稻種子上的表達(dá)

  綠色熒光蛋白的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)

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