很多做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的朋友都聽(tīng)過(guò)“程序降溫盒能實(shí)現(xiàn)每分鐘1℃的精準(zhǔn)降溫”，但你知道嗎？這個(gè)說(shuō)法其實(shí)是對(duì)程序降溫盒的誤解——它根本做不到“勻速”，反而會(huì)形成“前期降溫快、后期降溫慢”的不規(guī)則曲線，直接影響細(xì)胞存活率！

誤區(qū)1：程序降溫盒的“勻速”是假的！

目前市場(chǎng)上有兩種程序降溫盒：

一種使用異丙醇做為導(dǎo)熱材料，認(rèn)為導(dǎo)丙醇具有高比熱容，吸收熱量多，降溫慢，可充當(dāng)“溫度緩沖劑”。

另一種使用高隔熱的外層泡沫材料和內(nèi)層高導(dǎo)熱的金屬內(nèi)芯，外部的泡沫的隔熱，避免急速降溫，利用金屬材料的高導(dǎo)熱實(shí)現(xiàn)內(nèi)部溫度的均衡。

無(wú)一例外，兩類產(chǎn)品均宣稱他們的樣品在放入-80℃冰箱后，均可以實(shí)現(xiàn)約-1℃/min的降溫，但事實(shí)是這樣嗎？

T1、T2為內(nèi)卷凍存管樣品溫度，T3為外圈凍存樣品管溫度，T4腔體內(nèi)溫。

可以看到前期，樣品溫度下降快，可達(dá)XX℃，在低于XX℃，降溫速度逐漸下降。以上主要原因是，

（1）無(wú)論異丙醇，還是外泡沫盒，其導(dǎo)熱系數(shù)均是恒定的，在放入冰箱前期，其內(nèi)外溫差大，可達(dá)100℃，到后期內(nèi)外溫度逐漸減小，其降溫速度也趨于接近于0。

（2）當(dāng)程序降溫盒內(nèi)部裝入凍存管數(shù)量不一致時(shí)，由于降溫盒本身導(dǎo)熱系數(shù)和初始溫差是不變的，也同樣會(huì)影響其降溫的速度；即不同凍存管數(shù)量下，其降溫速度也是變化的。

（3）由于熱量是由外部導(dǎo)入內(nèi)部，不可避免會(huì)導(dǎo)致外圈降溫快于內(nèi)圈。

這種“前快后慢”的曲線，根本不是細(xì)胞冷凍需要的“等速降溫”！有時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞凍存失敗的致命傷。

誤區(qū)2：細(xì)胞冷凍需要的是“精準(zhǔn)等速”，不是“大概降溫”

為什么細(xì)胞冷凍必須要“1℃/min”的勻速？為何執(zhí)著于-1℃/min？

細(xì)胞凍存時(shí)，降溫速率至關(guān)重要：

（1）降溫過(guò)快（如直接投入液氮）：細(xì)胞內(nèi)部水分來(lái)不及滲出就結(jié)冰，形成細(xì)胞內(nèi)冰晶，會(huì)刺破細(xì)胞膜和細(xì)胞器，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

（2）降溫過(guò)慢（如傳統(tǒng)分階段降溫）：細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間處于高滲環(huán)境，可能引發(fā)“溶液效應(yīng)”，導(dǎo)致細(xì)胞脫水、蛋白質(zhì)變性等損傷。

（3）-1℃/分鐘 被認(rèn)為是許多細(xì)胞類型（包括多種普通細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞株等）凍存的“黃金速率”。它能平衡冰晶形成和溶液效應(yīng)的矛盾，讓細(xì)胞有足夠時(shí)間脫水，避免細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量冰晶，從而保證較高的細(xì)胞復(fù)蘇活率。

因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)的水分在降溫時(shí)會(huì)形成冰晶——如果降溫太快（>1℃/min），細(xì)胞內(nèi)會(huì)迅速形成大冰晶，直接刺破細(xì)胞膜；如果降溫太慢（<1℃/min），細(xì)胞外的水分會(huì)慢慢滲透進(jìn)細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞腫脹破裂。

只有“每分鐘精準(zhǔn)降低1℃”的等速降溫，才能讓細(xì)胞內(nèi)形成細(xì)小的冰晶，既不會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，又能保持細(xì)胞的活性。

真相：只有細(xì)胞程序降溫儀能實(shí)現(xiàn)“等速降溫”

和程序降溫盒的“被動(dòng)導(dǎo)熱”不同，細(xì)胞程序降溫儀采用主動(dòng)控溫技術(shù)（如液氮制冷、機(jī)械制冷等），通過(guò)傳感器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)溫度，然后調(diào)整制冷功率，確保冷凍底座的降溫速率始終穩(wěn)定在±0.5℃/min，將根據(jù)需要將降溫速度設(shè)定在0.5℃/min~5℃/min區(qū)間，適應(yīng)不同類細(xì)胞的凍存需求。

比如，智矩未來(lái)的細(xì)胞程序降溫儀，在10℃到-60℃的關(guān)鍵區(qū)間，降溫速率波動(dòng)不超過(guò)0.2℃/min，能讓干細(xì)胞、胚胎細(xì)胞的存活率比程序降溫盒高30%-50%！

別讓“假勻速”毀了你的實(shí)驗(yàn)！

如果你正在用程序降溫盒做細(xì)胞冷凍，趕緊停手——它的“前快后慢”會(huì)讓你的細(xì)胞存活率大打折扣，甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)重復(fù)失?。?/span>

記?。?/span>細(xì)胞冷凍的核心是“精準(zhǔn)等速”，只有細(xì)胞程序降溫儀才能做到這一點(diǎn)。別再為了省錢踩坑，你的細(xì)胞值得更好的保護(hù)！

關(guān)注我，帶你避開(kāi)更多細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的“隱形坑”！