在生物醫(yī)藥研發(fā)、免疫功能研究、診斷試劑開發(fā)及精準(zhǔn)醫(yī)療領(lǐng)域中，免疫球蛋白G（Immunoglobulin G, IgG）作為人體免疫系統(tǒng)的核心組成，既是解析免疫機制的關(guān)鍵研究對象，也是治療性抗體、標(biāo)準(zhǔn)品制備的核心原料。與人源化抗體藥物研發(fā)、自身免疫病研究等場景深度綁定的它，其純度和活性直接決定實驗數(shù)據(jù)的可靠性、藥物研發(fā)的成功率。相應(yīng)的，食蟹猴因生理特征與人類高度契合，其免疫球蛋白G也是非人靈長類臨床前研究核心模型。因此，IPHASE作為體外研究生物試劑引-領(lǐng)者，依托親和層析（Protein A/G）核心技術(shù)，針對性研發(fā)生產(chǎn)出高純度純化人IgG（Purified Human IgG）和高純度食蟹猴IgG（Purified Cynomolgus IgG）試劑，完-美適配不同科研場景的高要求，幫大家避開純化路上的各類“坑”。

圖片來源：參考文獻【1】

01    純化IgG的重要性

免疫球蛋白G（Immunoglobulin G, IgG）是機體體液免疫中最核心、含量最高、功能最-全面的抗體亞型，廣泛存在于血清、血漿等體液中。其重要性分為基礎(chǔ)生理免疫功能與生物醫(yī)藥科研應(yīng)用價值兩大維度，既是機體免疫防御的核心載體，也是抗體藥物研發(fā)、臨床前實驗、免疫檢測的核心關(guān)鍵物質(zhì)。

IgG是人體與食蟹猴等靈長類動物體內(nèi)的主力免疫抗體，血清濃度最高、半衰期最長、分布最-廣，承擔(dān)機體主要免疫防御與免疫調(diào)節(jié)功能，包括核心抗感染防御、長效免疫記憶應(yīng)答、母嬰被動免疫保護、免疫調(diào)節(jié)與疾病診斷和多重免疫效應(yīng)機制等5種核心作用。

而在抗體藥物研發(fā)、臨床前動物實驗、免疫檢測、診斷試劑開發(fā)等場景中，高純度、高活性的純化人IgG、食蟹猴IgG是生物醫(yī)藥研究的剛需核心原料，核心應(yīng)用場景全覆蓋：

抗體藥物臨床前研發(fā)：作為標(biāo)準(zhǔn)品、空白對照、參比抗體，用于評估治療性單抗、融合蛋白的結(jié)合活性、純度、穩(wěn)定性及免疫原性，是生物藥藥效評價的核心參照；

免疫機制研究：可精準(zhǔn)用于解析抗體介導(dǎo)的ADCC、CDC免疫效應(yīng)、免疫細胞互作機制，支撐自身免疫病、感染性疾病的機制研究；

診斷試劑開發(fā)：高純度IgG可作為特異性抗原或捕獲抗體，用于研發(fā)各類免疫檢測試劑盒，直接決定診斷產(chǎn)品的檢測精度與可靠性；

生物制品生產(chǎn)質(zhì)控：是人源免疫球蛋白制劑、人源化抗體藥物生產(chǎn)過程中，純度、活性質(zhì)控檢測的關(guān)鍵基準(zhǔn)物質(zhì)。

02    純化IgG的方法

純化IgG的核心目標(biāo)是：在保持其天然結(jié)構(gòu)和生物活性的前提下，最-大化去除雜質(zhì)，獲得高純度、高回收率的IgG。結(jié)合科研實操場景，以下4種方法最為常用，各有適配場景：

【親和層析法（Protein A/G）】利用Protein A/G與IgG Fc段的特異性可逆結(jié)合，通過改變緩沖液條件實現(xiàn)洗脫，其中Protein G可結(jié)合所有人類IgG亞型，適配性更廣泛。

優(yōu)點：黃金標(biāo)準(zhǔn)！一步可達＞95%純度，條件溫和，能最-大-程度保留IgG活性，操作高效，可放大應(yīng)用，也是上市抗體品種生產(chǎn)的主流選擇。

缺點：成本較高，需配備色譜設(shè)備，柱再生需專業(yè)操作，部分Protein A洗脫條件較劇烈，可能影響部分抗體活性。

適用場景：常規(guī)科研制備、標(biāo)準(zhǔn)品生產(chǎn)、工業(yè)規(guī)模化純化，適合對純度和活性要求高的場景。

【免疫親和層析法】基于特異性抗原與IgG的抗原-抗體結(jié)合反應(yīng)，或針對特定IgG亞型的特異性配體結(jié)合，可精準(zhǔn)捕獲目標(biāo)亞型IgG。

優(yōu)點：特異性極-高，可精準(zhǔn)分離特定IgG亞型（如IgG4），純度可達99%以上，能有效去除亞型雜質(zhì)。

缺點：成本最高，配體可能滲漏，柱容量較低，操作流程復(fù)雜，不適合大規(guī)模制備。

適用場景：特定IgG亞型純化、極-高純度要求的實驗（如抗體結(jié)構(gòu)解析）。

【離子交換層析法】基于人IgG與雜質(zhì)蛋白在不同pH、離子強度下的電荷差異，實現(xiàn)分離純化，條件溫和且易于放大。

優(yōu)點：成本低，分辨率高，條件溫和，可處理大量樣品，適合親和層析后的精純步驟。

缺點：前期樣品處理繁瑣，純度依賴實驗條件優(yōu)化，易受雜蛋白電荷干擾，單步純度較低。

適用場景：大規(guī)模工業(yè)純化、親和層析后的精純步驟，適合對成本敏感的規(guī)模化制備。

【沉淀法（辛酸-硫酸銨）】利用辛酸、硫酸銨等試劑使IgG選擇性沉淀，通過離心分離獲得粗提IgG，是最基礎(chǔ)的純化方法。

優(yōu)點：成本極低，無需特殊設(shè)備，可處理大量樣品，操作簡單快速，適合粗提富集。

缺點：步驟繁瑣，純度較低（約80%），可能導(dǎo)致IgG變性，需后續(xù)精純，特異性差易共沉淀雜蛋白。

適用場景：抗體粗提、親和層析前的預(yù)處理，適合小規(guī)模、對純度要求不高的初步富集。

總之，對于絕大多數(shù)科研場景（尤其是抗體藥物研發(fā)、標(biāo)準(zhǔn)品制備），基于Protein G的親和層析法是純化人IgG（Purified Human IgG）和純化食蟹猴IgG（Purified Cynomolgus IgG）的首-選。其核心優(yōu)勢的是適配所有人類IgG亞型，且能在溫和條件下實現(xiàn)高效純化，既保證純度，又能最-大程度保留IgG的天然活性——通過適度樣品稀釋、低速上樣、流穿液重復(fù)上樣及嚴(yán)謹質(zhì)控，可獲得滿足法規(guī)要求的高純度IgG，為后續(xù)實驗奠定基礎(chǔ)。

03    IPHASE產(chǎn)品

綜上所述，結(jié)合科研人針對IgG純化的核心需求——高純度、高活性、高合規(guī)性，IPHASE以親和層析法（Protein A/G）為生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)，針對性研發(fā)純化人IgG和純化食蟹猴IgG試劑，完-美解決傳統(tǒng)純化流程繁瑣、純度不足、活性受損等痛點，適配不同科研場景的需求。

除純化人IgG和純化食蟹猴IgG產(chǎn)品外，IPHASE利用親和層析柱法，同步開發(fā)了高純度、高活性的去除IgG人血清、去除IgG食蟹猴血清及去除IgG人血漿產(chǎn)品，真正實現(xiàn)了為客戶提供“一站式”特殊基質(zhì)血液類樣本服務(wù)。

Keywords：免疫球蛋白G；純化人IgG；食蟹猴IgG；親和層析法；Immunoglobulin G, IgG；Purified Human IgG；Purified Cynomolgus IgG；Protein A/G;

參考文獻

【1】Sensi, S. and Goebel, A. (2022). Human Auto-IgG Purification from High Volume Serum Sample by Protein G Affinity Purification. Bio-protocol 12(23): e4562. DOI: 10.21769/BioProtoc.4562.