在新藥臨床試驗(yàn)申請（IND）或生物制品許可上市申請（BLA）過程中，哪個環(huán)節(jié)是讓研發(fā)、注冊和QA團(tuán)隊(duì)同時關(guān)注的呢？答案里面一定含病毒清除驗(yàn)證。

病毒清除驗(yàn)證的結(jié)果不能依靠主觀判斷，需要標(biāo)準(zhǔn)化的量化數(shù)據(jù)，其中病毒下降因子是核心指標(biāo)之一。下降因子核算邏輯對不上、統(tǒng)計(jì)學(xué)評估方式不合規(guī)，將會直接觸發(fā)監(jiān)管發(fā)補(bǔ)甚至核查不通過。

怎么算才精準(zhǔn)？怎么評才合規(guī)？ICH Q5A (R2)已制定了嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。接下來，我們就逐步展開。

1.病毒下降因子：衡量工藝病毒清除能力的核心指標(biāo)

病毒下降因子是指工藝處理前后，物料中病毒含量比值的對數(shù)值，通常用log10表示。數(shù)值越高，表示對應(yīng)工藝步驟的病毒清除、滅活效果越強(qiáng)。

但在實(shí)際操作中，我們可能會漏掉一些細(xì)節(jié)，比如單步工藝的病毒下降因子核算。在計(jì)算時，我們不能只參考病毒滴度的變化，還應(yīng)該結(jié)合實(shí)驗(yàn)前后樣本體積的差異進(jìn)行綜合計(jì)算，才能還原工藝的真實(shí)清除能力。

同時，還有一個小細(xì)節(jié)需要我們注意，就是病毒下降因子的英文簡寫。在ICH Q5A原文中，病毒下降因子是Virus Reduction Factor，簡寫為VRF。但在行業(yè)的日常報(bào)告常常會寫成：LRV（Log Reduction Value）。在企業(yè)內(nèi)部研究報(bào)告或?qū)嶒?yàn)記錄中，可用LRV。而在申報(bào)注冊文件中，則建議與指導(dǎo)原則術(shù)語保持一致，使用VRF。

2.工藝總清除能力：不能簡單相加

工藝的整體總病毒清除能力，由所有有效工藝步驟的下降因子匯總所得。在核算總下降因子時，有兩條重要的合規(guī)紅線：

· 病毒清除機(jī)制一致的工藝步驟，不建議隨意合并計(jì)算。

· 單步下降因子數(shù)值低于1 log10的工藝步驟，禁止納入總因子核算。

3.統(tǒng)計(jì)學(xué)評價：讓數(shù)據(jù)站穩(wěn)腳跟

病毒下降因子的計(jì)算只是第-一步，我們還需要考慮這些數(shù)據(jù)是否穩(wěn)定、是否可信、是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)支撐？

ICH Q5A (R2)對數(shù)據(jù)變異范圍有明確限定：單次實(shí)驗(yàn)內(nèi)部的數(shù)據(jù)波動，95%置信區(qū)間需控制在±0.5 log10以內(nèi)。不同批次、不同場次之間的平行實(shí)驗(yàn)差異，也需同樣控制在這一范圍內(nèi)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)評價將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)波動量化。對于生產(chǎn)場景中的真實(shí)病毒、用于替代驗(yàn)證的特異模型病毒，檢測數(shù)據(jù)都應(yīng)配套95%置信區(qū)間分析。

4.單劑量病毒顆粒數(shù)核算

如果你的產(chǎn)品表達(dá)體系是CHO等嚙齒類動物細(xì)胞，還有一項(xiàng)專屬的硬性核查指標(biāo)需要進(jìn)行：單劑量病毒顆粒數(shù)核算。ICH Q5A（R2）要求，成品藥物的單劑量病毒顆粒限值需小于等于10-6顆粒/劑量，將潛在病毒暴露的風(fēng)險控制在可接受范圍內(nèi)。

該指標(biāo)的核算邏輯可以概述為：

單劑量病毒顆粒數(shù)量=未加工收獲液的病毒濃度×單劑用藥料液體積÷整套工藝的總病毒下降因子

所有商業(yè)化的產(chǎn)品，最終核算結(jié)果都必須滿足既定安全閾值，才能通過合規(guī)審核。

5.合規(guī)申報(bào)

病毒下降因子核算與統(tǒng)計(jì)學(xué)評價，是生物藥病毒安全領(lǐng)域的通用合規(guī)語言。再完-善的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，如果缺乏精準(zhǔn)的數(shù)據(jù)計(jì)算和規(guī)范的統(tǒng)計(jì)分析，也難形成有申報(bào)價值的技術(shù)證據(jù)。

我們應(yīng)該從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)起就充分考慮監(jiān)管要求，嚴(yán)格遵循指導(dǎo)原則，完成數(shù)據(jù)測算、嚴(yán)控?cái)?shù)據(jù)變異誤差。數(shù)據(jù)有來源、結(jié)論有統(tǒng)計(jì)學(xué)支持，我們才能順利通過NMPA、FDA、EMA等主流監(jiān)管機(jī)構(gòu)的審核。

病毒清除驗(yàn)證選擇體系合規(guī)和項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)豐富的平臺，可以減少方案反復(fù)和資料補(bǔ)充風(fēng)險。

義翹神州生物安全檢測實(shí)驗(yàn)室

作為深耕生物安全檢測領(lǐng)域的專業(yè)力量，義翹神州已為眾多公司提供了病毒清除工藝驗(yàn)證服務(wù)。我們累計(jì)完成8000多次驗(yàn)證，涵蓋100多個IND項(xiàng)目及20余個BLA項(xiàng)目，一次性通過評審。我們的實(shí)驗(yàn)室已通過CMA、CNAS認(rèn)證，嚴(yán)格按照GLP規(guī)范進(jìn)行設(shè)計(jì)和管理，支持國內(nèi)申報(bào)與中外雙報(bào)。