Conn改良Weigert革蘭染色液

產品貨號：R22094

產品規(guī)格：4×50ml

產品簡介：

革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生Christain Gram于1884年所發(fā)明，是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，亦是一種復染法。通過此法染色可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G+ )和革蘭陰性菌(G- )兩大類。細菌的不同顯色反應是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異，主要是肽聚糖層厚度和結構決定的。經結晶紫染色的細胞用碘液處理后形成不溶性復合物，乙醇能使它脫色。在同樣染色環(huán)境中利用細菌不同的等電點(Gram陽性細菌等電點為pH2.0~3.0，Gram陰性細菌等電點為pH4.0~5.0)，陽性細菌帶的負電荷比陰性細菌帶的負電荷多，與帶正電荷的堿性染料如結晶紫結合較牢，再加入媒染劑(碘)進入菌體后，與染料結合形成不溶于水的結晶紫-碘-蛋白復合物，并與陽性菌菌體內的核糖核酸鎂鹽結合，使已著色的細菌不易脫色。而分化劑(苯胺、丙酮等)不易透過陽性菌的細胞壁，故陽性菌不易退色；但分化劑容易進入陰性菌菌體內，溶解染料和碘復合物，使陰性菌脫色。

尚寶生物Conn改良Weigert 革蘭染色液是在經典的革蘭染色配方進行改進，使用胭脂紅染色液，該法也是在草酸銨結晶紫法演化過來的。臨床標本直接涂片，背景干凈，胞內吞噬體清晰易辨認，細菌染色特征典型?？梢詤^(qū)分Gram陽性細菌和陰性細菌，尤其適用于鑒別細菌和非細菌的藍色微顆粒狀物質(如鈣鹽)。

產品組成：

自備材料：

1. 10%福爾馬林固定液

2. 顯微鏡

操作步驟:（僅供參考）

1. 組織固定于10%福爾馬林中，常規(guī)脫水包埋。

2. 切片厚4μm，常規(guī)脫蠟至水。

3. 胭脂紅染色液滴染切片5min，傾去染液。

4. 酸性乙醇分化2～5s。

5. 流水沖洗5min。

6. 草酸銨結晶紫染色液滴染5min，傾去染液。

7. 用濾紙稍吸干切片周圍余液。

8. Weigert碘液處理切片1min，傾去碘液。

9. 用濾紙反復吸干切片內水分。

10. 苯胺二甲苯溶液分化至切片無紫色脫出，立即用二甲苯洗滌，并在鏡下觀察。

11. 滴入新的二甲苯反復洗滌多次，把苯胺洗去。

12. 中性樹膠封固。

染色結果：

革蘭陽性細菌和纖維素       藍紫色

革蘭陰性細菌               紅色

細胞核                     紅色

注意事項：

1. 切片在胭脂紅染色液中染色后不用水洗，直接滴入酸性乙醇進行分化并固定著染胭脂紅的顏色。

2. 用苯胺二甲苯溶液分化時，可輕輕搖動切片使分化均勻。如分化慢時可更換新的苯胺二甲苯。至切片無紫色脫出，立即傾去苯胺二甲苯，滴入新的二甲苯沖洗。

3. 經二甲苯沖洗后，應在鏡下觀察。如分化不足，可再滴入苯胺二甲苯繼續(xù)分化，至Gram陽性菌清晰為止，但注意不要分化過度。

4. 最后用二甲苯反復洗滌切片，把苯胺清除。切片若殘留少量苯胺，以后就容易褪色。

5. Gram染色陽性的細菌必須具有未受損的細菌壁，如細菌壁受破損，則染色呈陰性。

6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：6個月有效。