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Anti-ACA11樣本凍融3次后還能用嗎
?不建議繼續(xù)使用?，凍融3次后的Anti-ACA11樣本，靶標(biāo)蛋白降解比例已超過(guò)30%，抗體活性損失可達(dá)15%-45%，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，大概率出現(xiàn)假陰性錯(cuò)誤。
具體原因如下：
每經(jīng)過(guò)一次凍融，就會(huì)有5%-15%的活性位點(diǎn)發(fā)生不可逆損傷，凍融3次后，累計(jì)活性損失最高會(huì)超過(guò)40%，ACA11本身是低豐度蛋白，少量降解就會(huì)導(dǎo)致信號(hào)消失。
凍融3次后，蛋白聚集比例會(huì)從0.5%升高至12%以上，變性聚集的蛋白會(huì)增加非特異性干擾，容易導(dǎo)致結(jié)果誤判。
如果樣本珍貴無(wú)法重新提取，只能嘗試通過(guò)差速離心富集膜組分后做預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，確認(rèn)信號(hào)正常再使用，但結(jié)果偏差風(fēng)險(xiǎn)依然很高。
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