CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)是將冠醚衍生物鍵合在硅膠表面而制得。本產(chǎn)品對(duì)鉀離子及類似大小的離子結(jié)合是不可逆的，即便微量進(jìn)柱，也會(huì)造成識(shí)別位點(diǎn)被占據(jù)，任何樣品都無保留。因此，在使用前一定要徹di清洗儀器管路、正確配制流動(dòng)相和樣品溶液，并確認(rèn)樣品中無鉀離子及類似大小的離子。在使用本產(chǎn)品前請(qǐng)仔細(xì)閱讀包裝盒中的英文版使用說明書。

在連接該手性柱進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)按以下步驟操作：

1．使用前：

1.1 確認(rèn)儀器各部件狀態(tài)：

• 校準(zhǔn)各泵的流速看是否準(zhǔn)確。強(qiáng)烈推薦使用單泵（即只使用一個(gè)泵），所用的流動(dòng)相請(qǐng)手配，混合均勻。

1.2 使用溶劑及配制：

• 使用的水溶劑為色譜級(jí)純凈水，高氯酸為色譜純或分析純。

• 配制時(shí)建議采用以下操作：往水溶液中滴加入高氯酸，充分混勻，倒出約 50mL 到燒杯中，用 PH 計(jì)檢測(cè)燒杯中的待測(cè)溶液，此操作是為避免 PH 計(jì)與待配流動(dòng)相接觸，以免 PH 計(jì)中殘留的鉀離子污染待配流動(dòng)相而導(dǎo)致柱子失去選擇性。如此反復(fù)操作。配好后充分混勻后請(qǐng)?jiān)俅螜z測(cè)，以確保溶劑 PH 值在實(shí)驗(yàn)規(guī)定的范圍內(nèi)。

• 如果文獻(xiàn)方法不是滴定法，請(qǐng)照文獻(xiàn)方法配制好流動(dòng)相(同樣要充分?jǐn)嚢?以后再用 PH 計(jì)檢測(cè)（檢測(cè)方法同上），確認(rèn)該溶液 PH 值是否在我們規(guī)定的使用范圍內(nèi)。說明書稱重法配制的流動(dòng)相也按此操作。

• CR-I(+)/CR-I(-)柱所使用的高氯酸水溶液的 PH 范圍為 PH1.0-7.0，通常為 PH1.0-2.0。

1.3 樣品的配制：

• 建議使用流動(dòng)相溶解樣品，或者純水、或者與流動(dòng)相組成比例接近的水和有機(jī)相來溶解樣品。

• 樣品溶解后，需要用 0.45µm 孔徑的濾膜過濾，確保在使用前無沉淀。

1.4 溶劑切換：

      請(qǐng)?jiān)谶B接色譜柱前，按下述要點(diǎn)徹di做好溶劑切換

• 根據(jù) HPLC 系統(tǒng)中不同的當(dāng)前流動(dòng)相，采用不同的沖洗方法清洗所有管路：包括所有溶劑入口、泵、進(jìn)樣裝置和其他連接管路（在進(jìn)樣器和檢測(cè)器之間用兩通代替色譜柱連接起來）。

• 如果當(dāng)前流動(dòng)相是正相流動(dòng)相（如正己烷/醇），要先用無水乙醇或異丙醇沖洗約 80mL，再用純水沖洗約 80mL，然后用配制好的測(cè)試流動(dòng)相沖洗 50mL，最后連接上 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)色譜柱。

• 如果當(dāng)前流動(dòng)相是反相流動(dòng)相（如水/乙腈、緩沖液/甲醇），要先用純水徹di沖洗（約 100 mL）以除去其中存在的有機(jī)溶劑或緩沖液，然后用配制好的測(cè)試流動(dòng)相沖洗約 50 mL，最后連接上 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)色譜柱。

• 注意：其余未用的流路也bi須過渡為純水系統(tǒng)，以免誤操作時(shí)讓其他溶劑進(jìn)入系統(tǒng)，造成嚴(yán)重后果。

2．使用中：

2.1 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)柱一般以高氯酸水溶液(PH 1.0-2.0)為流動(dòng)相，其他的酸也可以使用，如三氟yi酸、硝酸、甲酸和乙酸。但一般推薦使用高氯酸，多數(shù)情況下，分離度更好，紫外吸收也更低。CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)柱為鍵合柱，可在流動(dòng)相中添加有機(jī)相，具體使用請(qǐng)見說明書。

2.2 該手性柱不能接觸 K＋離子，K＋離子會(huì)占據(jù)冠醚的手性空穴從而不可逆的損壞手性柱的分離能力。

2.3 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)柱的使用溫度范圍為：-5℃-40℃，柱壓上限為 30MPa，為了您的手性柱有更長(zhǎng)的壽命，建議在 10MPa 以內(nèi)使用。

2.4 強(qiáng)烈推薦使用 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)說明書上提到的保護(hù)濾器（Guard filter）。

3．使用后：

測(cè)試完成后請(qǐng)用 5%甲醇水溶液以 0.3mL/min 沖洗柱子 100min, 為延長(zhǎng)手性柱的使用壽命，請(qǐng)將手性柱保存于 3-6℃冰箱中。

使用中常見問題及解決措施：

1. 樣品峰出現(xiàn)分叉情況：

• 可能造成此現(xiàn)象的原因：

    a) 柱子使用過程中流速過大、壓力劇增

    b) 分析樣品過程中有殘?jiān)廴局^

    c) 保護(hù)柱損壞

• 可采取的應(yīng)對(duì)方法：

    a) 若有保護(hù)柱請(qǐng)將保護(hù)柱取下后再驗(yàn)柱

    b) 若還是有分叉現(xiàn)象，請(qǐng)將柱子反接后驗(yàn)柱

若問題依然存在，請(qǐng)及時(shí)與供應(yīng)商聯(lián)系。

2. 出峰不斷提前：

出峰不斷提前是填料不斷流失的表現(xiàn)，主要是由于流動(dòng)相的 PH 低于 1.0 或有鉀離子進(jìn)柱，以上情況造成的填料流失是不可逆的損壞，柱子將無法修復(fù)。

• 可能造成此現(xiàn)象的原因：

    a) 泵的抽力不正常

    b) 配制的高氯酸水溶液密度不均勻

    c) 在使用前未用純水徹di沖洗整個(gè)系統(tǒng)（注意：包括所有溶劑入口、泵、進(jìn)樣裝置和其他連接管路）

    d) 流動(dòng)相及樣品溶液中有 K+存在

3. 樣品沒有保留，在 2.0min 左右出峰：

初步斷定是手性填料wan全流失的表現(xiàn)，柱子對(duì)手性樣品沒有分離能力，這種損壞是無法修復(fù)的。

為了避免以上 2、3 所述情況的出現(xiàn)，請(qǐng)?jiān)陂喿x英文版說明書注意事項(xiàng)的基礎(chǔ)上，嚴(yán)格按照我們的中文補(bǔ)充說明操作。

建議客戶在拿到柱子后嚴(yán)格按照大賽璐公司的驗(yàn)柱報(bào)告用標(biāo)準(zhǔn)品檢驗(yàn)柱子，確認(rèn)柱子性能。