志賀氏菌增菌肉湯的制備方法及使用注意事項(xiàng)
志賀氏菌增菌肉湯是用于食品/樣品中志賀氏菌的前增菌,在抑制雜菌的同時(shí),讓志賀氏菌優(yōu)先增殖,提升檢出率。
制備方法:
稱量與溶解:按照配方稱取各成分,加熱攪拌溶解于蒸餾水中。
分裝:將溶解后的培養(yǎng)基分裝至三角瓶中,每瓶225mL。
滅菌:121℃高壓滅菌15分鐘。
加入新生霉素:冷卻至50-55℃時(shí),每225mL培養(yǎng)基中加入1支無(wú)菌新生霉素溶液,混勻備用。
志賀氏菌增菌肉湯的用途:
食品、水樣、糞便、飼料等樣品中志賀氏菌的選擇性增菌。
抑制大腸菌群、革蘭氏陽(yáng)性菌,允許志賀氏菌有限生長(zhǎng),提高其在菌群中的占比。
使用注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備:確保志賀氏菌增菌肉湯、無(wú)菌試管、接種環(huán)等實(shí)驗(yàn)材料齊全且無(wú)菌。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境設(shè)定:在無(wú)菌操作臺(tái)中進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的無(wú)菌狀態(tài),避免污染。
儀器設(shè)備校準(zhǔn):檢查并校準(zhǔn)培養(yǎng)箱、顯微鏡等儀器設(shè)備,確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
新生霉素溶液制備:新生霉素溶液需用0.22μm過(guò)濾膜除菌,如不立即使用,可在2-8℃條件下儲(chǔ)存一個(gè)月。
常見(jiàn)問(wèn)題:
培養(yǎng)液不混濁:樣品中志賀氏菌數(shù)量極低或無(wú),需延長(zhǎng)培養(yǎng)至24h或重新采樣。
培養(yǎng)液嚴(yán)重混濁:大腸桿菌或其他雜菌過(guò)度生長(zhǎng),可能樣品污染嚴(yán)重或培養(yǎng)溫度不當(dāng)。
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