斑馬魚磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
適用范圍
實驗原理
試劑盒組成
30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶
酶標試劑 6ml×1瓶
酶標包被板 12孔×8條
樣品稀釋液 6ml×1瓶
顯色劑A液 6ml×1瓶
顯色劑B液 6ml×1瓶
終止液 6ml×1瓶
標準品(16U/L) 0.5ml×1瓶
標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
說明書 1份
封板膜 2張
樣本要求
樣本采集后應盡快完成前處理,處理完成后優(yōu)先即刻開展實驗;無法立即實驗的樣本,可置于-20℃條件保存,避免反復凍融。
本試劑盒不適用含NaN?的樣本,NaN?會抑制辣根過氧化物酶(HRP)活性,干擾檢測結果。
操作步驟
1. 標準品梯度稀釋
5號標準品 8U/L:150μl原倍標準品 + 150μl標準品稀釋液
4號標準品 4U/L:150μl 5號標準品 + 150μl標準品稀釋液
3號標準品 2U/L:150μl 4號標準品 + 150μl標準品稀釋液
2號標準品 1U/L:150μl 3號標準品 + 150μl標準品稀釋液
1號標準品 0.5U/L:150μl 2號標準品 + 150μl標準品稀釋液
2. 加樣
空白對照孔:不加入標準品、待測樣本及酶標試劑,其余操作與其余孔一致
標準品孔:每孔準確加入50μl對應濃度標準品
待測樣本孔:先加入40μl樣品稀釋液,再加入10μl待測樣本,樣本最終稀釋倍數(shù)為5倍
3. 第一次溫育
4. 洗滌液配制
5. 第一次洗滌
6. 加酶標試劑
7. 第二次溫育
8. 第二次洗滌
9. 顯色
10. 反應終止
11. 吸光度測定
結果計算
注意事項
試劑盒從低溫冷藏環(huán)境取出后,需在室溫環(huán)境平衡1小時后再使用;酶標包被板開封后未使用完畢的板條,需及時裝入密封袋密封保存。
濃縮洗滌液低溫存放可能出現(xiàn)結晶析出,稀釋時可水浴加溫助溶,處理后不影響檢測結果。
實驗加樣需使用校準合格的加樣器具,控制單次加樣時長,減少操作誤差。
每次實驗均需同步制備標準曲線,樣本檢測值超出線性范圍時,可先行稀釋后再檢測,結果計算時乘以對應總稀釋倍數(shù)。
封板膜為一次性使用用品,避免交叉污染;顯色底物需避光存放。
實驗需嚴格按照本說明書流程操作,檢測結果以酶標儀實測讀數(shù)為準。
實驗樣本、洗滌液及實驗廢棄物,需按實驗室相關規(guī)范處理。
不同生產(chǎn)批號的試劑盒組分不可混用。
保存條件及有效期
試劑盒保存條件:2-8℃低溫冷藏
有效期:6個月
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