什么是相位對(duì)比顯微鏡？

相差顯微鏡是一種光學(xué)顯微鏡，它將光的相位差轉(zhuǎn)換為對(duì)比度并進(jìn)行觀察。

在普通光學(xué)顯微鏡中，樣品各部分中光的反射和吸收光譜差異被觀察為光影和顏色（對(duì)比度）的差異。 然而，當(dāng)觀察幾乎無(wú)色透明的材料，如活細(xì)胞、微生物和細(xì)菌時(shí)，這些對(duì)比幾乎不存在，因此無(wú)法獲得形狀等信息。

即使它是無(wú)色透明的材料，如果折射率與周圍環(huán)境不同，光的衍射也會(huì)發(fā)生在邊界處。 相位差顯微鏡利用衍射光與光線直接穿過(guò)材料的相位差，制造光暗對(duì)比，從而觀察到無(wú)色透明材料。

相差顯微鏡應(yīng)用

相位對(duì)比顯微鏡在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域廣泛用于觀察培養(yǎng)細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。 牙周病細(xì)菌檢測(cè)在牙科診所是公眾熟悉的應(yīng)用。 通過(guò)讓患者了解自己的口腔細(xì)菌，有助于提升他們對(duì)口腔護(hù)理的積極性。

通過(guò)相差顯微鏡，你可以觀察活細(xì)胞，而無(wú)需給樣本染色。 在用普通光學(xué)顯微鏡觀察無(wú)色透明細(xì)胞時(shí)，采用染色和觀察樣品的方法，但這種方法存在染色和活細(xì)胞死亡的缺點(diǎn)。

此外，相差顯微鏡在分析石棉這一有害物質(zhì)方面也很有效。 JIS A 1481規(guī)定了幾種石棉分析方法作為官f方方法。 其中一種方法是用相差顯微鏡照射具有特定折射率的浸沒(méi)晶體，并根據(jù)產(chǎn)生的顏色判斷是否為石棉（色散染色法）。

相差顯微鏡原理

在相差顯微鏡中，相板僅放置在直射光穿過(guò)物鏡與成像平面之間的位置，且直射光的相位會(huì)提前1/4λ或延遲1/4λ。 同時(shí)，插入一種稱為環(huán)形ND濾光片的濾光片，直接降低光的強(qiáng)度，但繞射后的光不會(huì)改變其相位或亮度。

這些操作導(dǎo)致直射光與衍射光之間的相位差為1/2λ或0，互相干涉，形成光與暗之間的對(duì)比。

換句話說(shuō)，當(dāng)衍射光產(chǎn)生時(shí)折射率突然變化的區(qū)域看起來(lái)很暗，因?yàn)橄辔徊顬?/2λ，直射光和衍射光相互干涉。 這就是黑暗的對(duì)比。 另一方面，當(dāng)相位差為0時(shí)，直射光和衍射光會(huì)相互干涉，因此折射率突然變化的區(qū)域看起來(lái)更亮。 這就是明亮的對(duì)比。