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生物試劑優(yōu)選白介素10(IL-10)ELISA試劑盒精準(zhǔn)測(cè)樣
在生命科學(xué)研究領(lǐng)域，白介素10（IL-10）作為一種多功能負(fù)性調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，主要由Th2細(xì)胞、活化的B細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，兼具強(qiáng)效抗炎與免疫調(diào)節(jié)功能，是炎癥反應(yīng)與免疫耐受調(diào)控的核心分子，深度參與腫瘤發(fā)生發(fā)展、感染性疾病進(jìn)程、自身免疫病發(fā)病機(jī)制等多個(gè)生理病理過程，其濃度變化已成為相關(guān)研究的關(guān)鍵檢測(cè)指標(biāo)。Elabscience®憑借深厚的研發(fā)積淀，推出的小鼠白介素10（IL-10）ELISA試劑盒，為小鼠生物樣本檢測(cè)設(shè)計(jì)，以嚴(yán)格的品質(zhì)控制、優(yōu)異的檢測(cè)性能，成為科研人員開展小鼠IL-10相關(guān)研究的優(yōu)選工具，為精準(zhǔn)獲取實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、推動(dòng)研究進(jìn)展提供可靠支撐。
一、試劑盒核心用途
本試劑盒專為體外定量檢測(cè)Mouse（小鼠）血清、血漿或其他生物體液中天然及部分重組IL-10濃度而設(shè)計(jì)，可精準(zhǔn)捕捉樣本中IL-10的含量變化，適配小鼠相關(guān)的炎癥、免疫、腫瘤等各類科研場(chǎng)景，為解析IL-10在小鼠模型中的調(diào)控機(jī)制、評(píng)估實(shí)驗(yàn)干預(yù)效果等提供精準(zhǔn)的量化數(shù)據(jù)支撐，助力科研人員深入探索IL-10在生理病理過程中的作用——作為免疫系統(tǒng)中具代表性的負(fù)調(diào)控細(xì)胞因子，IL-10通過與其特異性受體復(fù)合物結(jié)合，激活相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，調(diào)控免疫細(xì)胞的分化、活化與效應(yīng)功能，其表達(dá)異常與多種疾病密切相關(guān)。
二、檢測(cè)原理解析
本試劑盒采用經(jīng)典且成熟的雙抗體夾心ELISA法，該方法特異性強(qiáng)、靈敏度高，是細(xì)胞因子定量檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，其核心原理基于抗原與抗體的特異性結(jié)合及生物素-親和素的高效偶聯(lián)作用，具體流程科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，確保檢測(cè)數(shù)據(jù)可靠，步驟如下：
- 包被與結(jié)合：將抗小鼠IL-10抗體預(yù)先包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)加入樣品或標(biāo)準(zhǔn)品，其中的小鼠IL-10會(huì)與包被抗體特異性結(jié)合，隨后通過洗滌去除未結(jié)合的游離成分，避免干擾檢測(cè)結(jié)果。
- 免疫復(fù)合物形成：依次加入生物素化的抗小鼠IL-10抗體和辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的親和素，生物素化抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠IL-10特異性結(jié)合，同時(shí)生物素與親和素發(fā)生特異性結(jié)合，形成穩(wěn)定的免疫復(fù)合物，再次洗滌去除游離成分，進(jìn)一步提升檢測(cè)特異性。
- 顯色與定量：加入顯色底物（TMB），TMB在HRP的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加入終止液后反應(yīng)終止，溶液變?yōu)辄S色。使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定OD值，IL-10濃度與OD450值呈正相關(guān)，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)計(jì)算出樣品中IL-10的具體濃度。
三、核心性能參數(shù)
試劑盒的檢測(cè)性能直接決定實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，本產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格優(yōu)化與質(zhì)檢，各項(xiàng)參數(shù)均達(dá)到科研級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，適配小鼠樣本的檢測(cè)需求，具體如下：
| 參數(shù)名稱 | 具體規(guī)格/性能 |
|---|---|
| 反應(yīng)類型 | 夾心法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應(yīng)時(shí)間 | 3.5h，全程操作高效，大幅提升實(shí)驗(yàn)效率 |
| 反應(yīng)性 | Mouse（僅針對(duì)小鼠源樣本檢測(cè)，適配小鼠各類生物體液） |
| 檢測(cè)方法 | Colormetric（比色法），操作簡(jiǎn)便，無需復(fù)雜檢測(cè)設(shè)備 |
| 檢測(cè)范圍 | 15.63—1000 pg/mL，覆蓋小鼠樣本中IL-10的常規(guī)濃度范圍，可滿足不同實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景需求 |
| 靈敏度 | 9.38 pg/mL，具備較高靈敏度，可精準(zhǔn)檢測(cè)低濃度樣本中的IL-10，適用于微量檢測(cè)場(chǎng)景 |
| 樣本體積 | 100μL，樣本用量少，可減少珍貴小鼠樣本的損耗 |
| 樣本類型 | 血清、血漿或其他生物體液，適用范圍廣泛，適配多種小鼠樣本處理方式 |
| 特異性 | 可特異性檢測(cè)樣本中的小鼠IL-10，與其他相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)，有效避免干擾，確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)專一 |
| 重復(fù)性 | 板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%，遠(yuǎn)低于行業(yè)常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性優(yōu)異，可有效減少實(shí)驗(yàn)誤差，保障數(shù)據(jù)一致性 |
四、典型數(shù)據(jù)與精密度驗(yàn)證
（一）典型標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)
需注意，由于實(shí)驗(yàn)操作條件的差異（如操作者技能、移液精度、洗板技術(shù)及溫育條件等），標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所不同，以下數(shù)據(jù)僅供參考，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)條件建立標(biāo)準(zhǔn)曲線：
| IL-10濃度 (pg/mL) | OD值1 | OD值2 | Average（平均值） | Corrected（校正值） |
|---|---|---|---|---|
| 1000 | 2.414 | 2.448 | 2.431 | 2.366 |
| 500 | 1.623 | 1.625 | 1.624 | 1.559 |
| 250 | 0.940 | 0.904 | 0.923 | 0.858 |
| 125 | 0.428 | 0.448 | 0.438 | 0.373 |
| 62.5 | 0.269 | 0.251 | 0.26 | 0.195 |
| 31.25 | 0.167 | 0.165 | 0.166 | 0.101 |
| 15.63 | 0.11 | 0.124 | 0.117 | 0.052 |
| 0 | 0.062 | 0.068 | 0.065 | -- |
（二）精密度驗(yàn)證
精密度是評(píng)估試劑盒穩(wěn)定性的核心指標(biāo)，本試劑盒通過板內(nèi)、板間雙重驗(yàn)證，確保檢測(cè)結(jié)果的一致性和可靠性，具體驗(yàn)證方案及結(jié)果如下：
- 板內(nèi)精密度：選取低、中、高三種濃度的小鼠樣本，在同一塊酶標(biāo)板上分別檢測(cè)20次，計(jì)算變異系數(shù)（CV%）；
- 板間精密度：選取低、中、高三種濃度的小鼠樣本，在3塊不同的酶標(biāo)板上分別檢測(cè)20次，計(jì)算變異系數(shù)（CV%）。
| Intra-assay Precision（板內(nèi)精密度） | Inter-assay Precision（板間精密度） | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample（樣本） | n（檢測(cè)次數(shù)） | Mean (pg/mL)（平均值） | CV (%)（變異系數(shù)） | Sample（樣本） | n（檢測(cè)次數(shù)） | CV (%)（變異系數(shù)） |
| 1（低濃度） | 20 | 51.00 | 5.29 | 1（低濃度） | 20 | 6.77 |
| 2（中濃度） | 20 | 125.60 | 4.78 | 2（中濃度） | 20 | 5.11 |
| 3（高濃度） | 20 | 414.80 | 2.99 | 3（高濃度） | 20 | 4.60 |
驗(yàn)證結(jié)果顯示，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%，其中板內(nèi)高濃度樣本變異系數(shù)僅為2.99%，板間高濃度樣本變異系數(shù)為4.60%，遠(yuǎn)優(yōu)于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，充分證明試劑盒穩(wěn)定性優(yōu)異，可有效保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性和重復(fù)性，為科研結(jié)論提供有力支撐。
五、回收率與線性驗(yàn)證
（一）回收率驗(yàn)證
回收率是評(píng)估試劑盒準(zhǔn)確性的關(guān)鍵指標(biāo)，用于判斷小鼠樣本基質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾程度，理想回收率范圍為80%-120%，越接近100%說明準(zhǔn)確性越高。本試劑盒通過向5個(gè)不同小鼠樣本中添加已知濃度的IL-10目標(biāo)蛋白，進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn)，具體結(jié)果如下：
| Sample Type（樣本類型） | Range (%)（回收率范圍） | Average Recovery (%)（平均回收率） |
|---|---|---|
| Serum (n=8)（小鼠血清） | 96-108 | 102 |
| EDTA plasma (n=8)（小鼠EDTA血漿） | 88-102 | 94 |
| Cell culture media (n=8)（小鼠細(xì)胞培養(yǎng)液） | 86-97 | 92 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，三種常見小鼠樣本類型的回收率均在理想范圍內(nèi)，平均回收率最高達(dá)102%，說明小鼠樣本基質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾極小，試劑盒準(zhǔn)確性優(yōu)異，可精準(zhǔn)反映樣本中IL-10的真實(shí)濃度，避免因基質(zhì)干擾導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差。
（二）線性驗(yàn)證
線性驗(yàn)證用于評(píng)估試劑盒對(duì)不同稀釋倍數(shù)樣本的檢測(cè)適用性，確保樣本稀釋后仍能精準(zhǔn)檢測(cè)IL-10濃度，實(shí)驗(yàn)方案為：將5個(gè)小鼠樣本分別稀釋2倍、4倍、8倍、16倍，進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率，具體結(jié)果如下：
| 稀釋倍數(shù) | 檢測(cè)指標(biāo) | Serum (n=5)（小鼠血清） | EDTA plasma (n=5)（小鼠EDTA血漿） | Cell culture media (n=5)（小鼠細(xì)胞培養(yǎng)液） |
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%)（回收率范圍） | 87-98 | 96-111 | 90-102 |
| Average (%)（平均回收率） | 93 | 102 | 95 | |
| 1:4 | Range (%)（回收率范圍） | 95-111 | 82-94 | 95-109 |
| Average (%)（平均回收率） | 102 | 88 | 101 | |
| 1:8 | Range (%)（回收率范圍） | 98-116 | 82-95 | 92-104 |
| Average (%)（平均回收率） | 106 | 89 | 98 | |
| 1:16 | Range (%)（回收率范圍） | 102-117 | 85-97 | 98-112 |
| Average (%)（平均回收率） | 108 | 91 | 104 |
線性驗(yàn)證結(jié)果顯示，小鼠血清、EDTA血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液在1:2至1:16的稀釋范圍內(nèi)，回收率均保持在82%-117%的理想?yún)^(qū)間，平均回收率在88%-108%之間，說明試劑盒對(duì)不同稀釋倍數(shù)的小鼠樣本均有良好的適配性，可滿足高濃度樣本稀釋后的精準(zhǔn)檢測(cè)需求，進(jìn)一步擴(kuò)大了試劑盒的應(yīng)用場(chǎng)景。
六、試劑盒組成及保存條件
（一）試劑盒組成
本試劑盒包含實(shí)驗(yàn)所需全部核心試劑，無需額外自行配制關(guān)鍵組分，開箱即可使用，大幅簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程，具體組成如下：
| 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶標(biāo)板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃，可存放6個(gè)月 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | Reference Standard | 2 支 | -20℃(避光)，可存放6個(gè)月 |
| 濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6個(gè)月 |
| 濃縮HRP酶結(jié)合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6個(gè)月 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃，可存放6個(gè)月 |
| 生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | 2-8℃，可存放6個(gè)月 |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | 2-8℃，可存放6個(gè)月 |
| 濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | 2-8℃，可存放6個(gè)月 |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光)，可存放6個(gè)月 |
| 反應(yīng)終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃，可存放6個(gè)月 |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | 常溫保存 |
| 產(chǎn)品說明書 | Product Description | 1 份 | 常溫保存 |
| 質(zhì)檢報(bào)告 | Certificate of Analysis | 1 份 | 常溫保存 |
（二）保存注意事項(xiàng)
- 未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；若一周后使用，需拆開試劑盒，按照上述表格中的條件分別保存各組分，避免試劑失效。
- 所有試劑瓶蓋須旋緊，防止試劑蒸發(fā)和微生物污染，影響檢測(cè)性能，確保試劑穩(wěn)定性。
- 試劑體積以實(shí)際發(fā)貨版說明書為準(zhǔn)，相關(guān)試劑在分裝時(shí)會(huì)比標(biāo)簽標(biāo)明的體積稍多，使用時(shí)需量取，不可直接倒出，避免試劑浪費(fèi)和用量不準(zhǔn)確，保障實(shí)驗(yàn)一致性。
- 需避光保存的試劑（如濃縮HRP酶結(jié)合物、凍干標(biāo)準(zhǔn)品、底物溶液TMB）需嚴(yán)格避光存放，防止試劑降解失效。
七、實(shí)驗(yàn)所需自備物品
為確保實(shí)驗(yàn)順利開展，除試劑盒自帶組分外，實(shí)驗(yàn)者需自備以下物品，適配小鼠樣本檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)需求：
- 酶標(biāo)儀：需配備450nm波長(zhǎng)濾光片，用于OD值的精準(zhǔn)測(cè)定；
- 高精度移液器及配套耗材：包括0.5-10 μL、2-20 μL、20-200 μL、200-1000 μL規(guī)格的高精度移液器，以及EP管、一次性吸頭，確保移液精準(zhǔn)，減少實(shí)驗(yàn)誤差；
- 恒溫設(shè)備及純水：37℃恒溫箱（用于實(shí)驗(yàn)溫育，保障反應(yīng)充分進(jìn)行），雙蒸水或去離子水（用于試劑稀釋、洗板等操作）；
- 吸水紙：用于洗板后吸干酶標(biāo)板孔內(nèi)殘留液體，避免殘留液體影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
八、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)總結(jié)
小鼠白介素10（IL-10）ELISA試劑盒依托專業(yè)的研發(fā)技術(shù)和嚴(yán)格的質(zhì)檢流程，聚焦小鼠樣本檢測(cè)需求，核心優(yōu)勢(shì)突出，成為科研人員的優(yōu)選試劑，具體優(yōu)勢(shì)如下：
- 精準(zhǔn)可靠：采用雙抗體夾心ELISA法，特異性強(qiáng)，可精準(zhǔn)檢測(cè)小鼠IL-10，與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)；靈敏度達(dá)9.38 pg/mL，板內(nèi)板間重復(fù)性優(yōu)異，回收率、線性驗(yàn)證均達(dá)標(biāo)，可精準(zhǔn)反映小鼠樣本中IL-10的真實(shí)濃度，契合IL-10作為疾病相關(guān)生物標(biāo)志物的檢測(cè)需求，助力科研人員獲取可靠實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
- 適配性強(qiáng)：檢測(cè)范圍覆蓋15.63—1000 pg/mL，可適配小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液等多種生物體液，且對(duì)1:2至1:16稀釋的樣本均有良好檢測(cè)效果，適配不同實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景，滿足多樣化科研需求。
- 便捷高效：試劑盒組分齊全，開箱即可使用，無需自行配制核心試劑；樣本用量?jī)H100μL，反應(yīng)時(shí)間僅3.5h，操作流程清晰，無需復(fù)雜技術(shù)儲(chǔ)備，大幅提升實(shí)驗(yàn)效率，節(jié)省科研時(shí)間。
- 品質(zhì)保障：經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)量控制，試劑穩(wěn)定性強(qiáng)，各組分保存條件明確，可長(zhǎng)期存放（-20℃條件下可存放6個(gè)月），不同批次間性能一致性好，有效降低實(shí)驗(yàn)成本和試劑浪費(fèi)，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。
在小鼠炎癥、免疫、腫瘤等領(lǐng)域的科研探索中，精準(zhǔn)的IL-10檢測(cè)數(shù)據(jù)是解析疾病機(jī)制、評(píng)估實(shí)驗(yàn)效果的關(guān)鍵。Elabscience®小鼠白介素10（IL-10）ELISA試劑盒以優(yōu)異的檢測(cè)性能、便捷的操作設(shè)計(jì)，適配小鼠各類生物樣本的檢測(cè)需求，為科研人員開展相關(guān)研究提供精準(zhǔn)、可靠的核心支撐。
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