Thremo賽默飛Qubit熒光計(jì)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照有哪些試劑?
Qubit熒光計(jì)使用特定的熒光染料,這些染料會(huì)選擇性地與不同種類(lèi)的核酸或蛋白結(jié)合。因此,您必須為您想要測(cè)量的物質(zhì)選擇對(duì)應(yīng)的檢測(cè)試劑盒(Assay Kit),每個(gè)試劑盒內(nèi)都包含了預(yù)先配制好的標(biāo)準(zhǔn)品(Standards)。
核心答案:Qubit的“標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照試劑”指的就是試劑盒中自帶的兩管濃度已知的標(biāo)準(zhǔn)品溶液(Standard #1 和 Standard #2),用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。您不能混用不同試劑盒或不同檢測(cè)類(lèi)型的目標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品。
一、常用的Qubit檢測(cè)試劑盒與對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品
每個(gè)Qubit檢測(cè)試劑盒通常包含:
基于熒光染料的定量工作液
標(biāo)準(zhǔn)品 #1 (濃度通常為 0 ng/mL)
標(biāo)準(zhǔn)品 #2 (濃度通常為 10 ng/μL 或 100 ng/μL,具體取決于試劑盒)
緩沖液
二、用于DNA定量
1、Qubit dsDNA HS Assay Kit (高靈敏度雙鏈DNA檢測(cè)試劑盒)
檢測(cè)范圍: 0.2 ng 至 100 ng
標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 ng/mL
標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 10 ng/μL (即10,000 ng/mL)
適用: 適用于低濃度樣本,如下一代測(cè)序(NGS)文庫(kù)、微量DNA提取物。
2、Qubit dsDNA BR Assay Kit (寬范圍雙鏈DNA檢測(cè)試劑盒)
檢測(cè)范圍: 2 ng 至 1000 ng
標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 ng/mL
標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 100 ng/μL (即100,000 ng/mL)
適用: 適用于濃度較高的樣本,如基因組DNA、PCR產(chǎn)物。
三、用于RNA定量
1、Qubit RNA HS Assay Kit (高靈敏度RNA檢測(cè)試劑盒)
檢測(cè)范圍: 5 pg 至 100 ng
標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 ng/mL
標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 10 ng/μL
適用: 總RNA、小RNA(如miRNA)的準(zhǔn)確定量。
2、Qubit RNA BR Assay Kit (寬范圍RNA檢測(cè)試劑盒)
檢測(cè)范圍: 20 ng 至 1000 ng
標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 ng/mL
標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 100 ng/μL
四、用于蛋白定量
1、Qubit Protein Assay Kit (蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑盒)
檢測(cè)范圍: 0.06 μg 至 5 μg
標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 μg/mL
標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 10 μg/μL (即10,000 μg/mL)
2、Qubit Protein BR Assay Kit (寬范圍蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑盒)
檢測(cè)范圍: 1 μg 至 50 μg
標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 μg/mL
標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 10 μg/μL
五、使用標(biāo)準(zhǔn)品的操作流程(以dsDNA HS為例)
1、準(zhǔn)備工作液: 將熒光染料與緩沖液按一定比例混合。
2、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線:
取兩支Qubit專(zhuān)用試管,分別加入199 μL的工作液。
在第一管中加入 1 μL 的 Standard #1 (0 ng/μL)。
在第二管中加入 1 μL 的 Standard #2 (10 ng/μL)。 混合均勻。
這兩管就是您的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照。
3、測(cè)量樣品: 用同樣的方法,將1 μL您的未知樣本與199 μL工作液混合。
4、上機(jī)讀數(shù):
在Qubit熒光計(jì)上選擇對(duì)應(yīng)的檢測(cè)程序(如dsDNA HS)。
儀器會(huì)首先提示測(cè)量?jī)蓚€(gè)標(biāo)準(zhǔn)品。完成后,儀器會(huì)自動(dòng)生成一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。
隨后再測(cè)量您的樣品管,儀器會(huì)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本的準(zhǔn)確濃度。
相關(guān)產(chǎn)品
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