專家級(jí)超薄切片技術(shù)，精準(zhǔn)洞察和優(yōu)異性能

說(shuō)到超薄切片技術(shù)，很少有人能像Helmut Gnaegi這樣*。作為金剛石切片刀公司Diatome的聯(lián)合創(chuàng)始人，Helmut花了數(shù)十年時(shí)間*切片的藝術(shù)和科學(xué)。在這次專訪中，他分享了自己在聚合物切片方面的深厚專業(yè)知識(shí)——從刀具幾何形狀的細(xì)微差別到低溫技術(shù)的挑戰(zhàn)。無(wú)論您是經(jīng)驗(yàn)豐富的顯微鏡專家，還是剛剛起步，Helmut的見解都能為您提供實(shí)用的指導(dǎo)和靈感，幫助您實(shí)現(xiàn)切割。

主要經(jīng)驗(yàn):

超薄切片確保結(jié)構(gòu)完整性——是制作高質(zhì)量、無(wú)損傷聚合物切片的理想選擇。

低溫切片需要精準(zhǔn)的操作——需要專用工具技術(shù)。

正確的樣品固定方法至關(guān)重要——可防止樣品變形并保持材料特性。

切片刀的選擇必須與應(yīng)用相匹配——使用針對(duì)低溫或室溫條件選擇合適的切片刀。

精確修塊是基礎(chǔ)——實(shí)現(xiàn)干凈、一致的切片條帶。

根據(jù)應(yīng)用目的選擇方法——根據(jù)成像目標(biāo)（表面結(jié)構(gòu)與內(nèi)部結(jié)構(gòu)）定制方法。

切刀片背后故事：Helmut Gn?gi對(duì)聚合物超薄切片的專業(yè)見解——Diatome

Helmut Gn?gi是世界上尤其值得信賴的金剛石切片刀公司之一的聯(lián)合創(chuàng)始人，他花了幾十年時(shí)間打磨超薄切片技術(shù)。我們與他坐在一起，從切片刀的幾何形狀到低溫挑戰(zhàn)，了解聚合物切片的微妙之處。

您是如何進(jìn)入超薄切片領(lǐng)域的？

Helmut Gn?gi：我最初是一名機(jī)械工程師，但后來(lái)迷上了超薄切片技術(shù)。我們?cè)缙谥圃斓亩际鞘謩?dòng)拋光機(jī)，我看到了可以改進(jìn)的地方。那時(shí)，像 Fernández-Morán這樣的研究人員需要大腦切片用于TEM觀察。這一挑戰(zhàn)成為我畢生的事業(yè)。

如今，人們?yōu)槭裁词褂贸∏衅夹g(shù)，而不是FIB或低溫等離子或其他技術(shù)？

Helmut Gn?gi：超薄切片仍然是獲得高質(zhì)量聚合物切片的最干凈的方法。FIB和等離子方法會(huì)造成損傷--高溫、離子和變形。而超薄切片則能保持材料的特性，特別是對(duì)于精細(xì)或多層聚合物。

重要見解

超薄切片技術(shù)可提供無(wú)損傷、薄而光滑的切片，是TEM、AFM和表面敏感技術(shù)（如原子力顯微鏡）的理想之選。詳見徠卡顯微系統(tǒng)公司最新推出的超薄切片機(jī)UC Enuity。

室溫和低溫下聚合物切片的主要區(qū)別是什么？

Helmut Gn?gi：在室溫下，切片是漂浮的——你可以看到它們，也很容易拿起它們。而在低溫下，情況就不同了。它們?nèi)菀拙砬?，更難處理。你需要技巧和合適的工具，比如用睫毛來(lái)壓平或引導(dǎo)它們。

聚合物在切片前應(yīng)如何固定？有什么技巧嗎？

Helmut Gn?gi：正確的固定方式非常重要。如果樣品彎曲，結(jié)構(gòu)可能會(huì)發(fā)生變化。在進(jìn)行超薄切片之前，應(yīng)小心修剪聚苯乙烯等易碎聚合物。對(duì)于薄的聚合物薄膜，我一直建議使用凝膠將其夾在金屬框架之間。對(duì)于精細(xì)的低溫樣品，OCT效果很好，但不要讓它影響成像。

在聚合物切片時(shí)，人們最容易犯的錯(cuò)誤是什么？

Helmut Gn?gi： 他們用錯(cuò)了刀，或者刀已經(jīng)不鋒利了。并不是所有的金剛石切片刀性能都一樣，尤其是在低溫條件下。有些金剛石切片刀是為了切割包埋樹脂而制造的，而不是進(jìn)行干切。此外，修塊也經(jīng)常被省略或做得不好。

提示：始終根據(jù)切片條件（低溫與常溫）選擇合適的刀具類型，并確保精確修塊，以獲得干凈的切片條帶。

對(duì)于聚合物切片新手，您最大的建議是什么？

Helmut Gn?gi：了解您要切割的是什么，為什么要切割。是為了表面成像？?jī)?nèi)部結(jié)構(gòu)？每種用途都需要不同的設(shè)置，而且要始終尊重切片刀。不了解應(yīng)用，就無(wú)法制造出好的切片刀。

專家提示

• 避免彎曲堅(jiān)硬的聚合物；扣住，而不要切斷。

• 使用AFM樣品夾和膠水夾來(lái)固定薄箔樣品。

• 修塊質(zhì)量很重要，要使用適合低溫和室溫的修塊刀。

• 在冷凍過(guò)程中，要準(zhǔn)備好處理可能比較棘手的波浪狀切片（準(zhǔn)備好毛發(fā)、睫毛或粘在木棍上的達(dá)爾馬提亞狗毛發(fā)）。

• 并不是所有的金剛石切片刀都是一樣的，請(qǐng)向您的供應(yīng)商詢問(wèn)干切實(shí)驗(yàn)的兼容性（直接聯(lián)系 DIATOME 或通過(guò)您當(dāng)?shù)氐?Leica 銷售專家）。

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UC Enuity超薄切片機(jī)

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