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Thermo賽默飛Qubit4熒光計做實(shí)驗(yàn)時需要哪些試劑和耗材
Qubit熒光計采用特定的熒光染料,這些染料會選擇性地與不同種類的生物分子(DNA、RNA、蛋白等)結(jié)合,并發(fā)出熒光。其熒光強(qiáng)度與樣品中靶分子的濃度成正比。因此,您必須使用賽默飛為Qubit系統(tǒng)開發(fā)的檢測試劑盒,而不能使用其他品牌的熒光染料或傳統(tǒng)紫外分光光度法所需的耗材。
一、必需試劑:檢測試劑盒 (Assay Kits)
1、Qubit dsDNA HS (高靈敏度) Assay Kit (貨號: Q32854)
用途: 用于低濃度雙鏈DNA (dsDNA) 的精準(zhǔn)定量,范圍是0.2 ng/mL 至 100 ng/mL。這是常用的試劑盒,適用于下一代測序 (NGS) 文庫、微量基因組DNA、ChIP-DNA等的定量。
包含: 緩沖液、染料、標(biāo)準(zhǔn)品#1和#2。
2、Qubit dsDNA BR (寬范圍) Assay Kit (貨號: Q32853)
用途: 用于較高濃度的雙鏈DNA定量,范圍是2 ng/mL 至 1000 ng/mL。適用于濃度較高的DNA樣品,如質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA等。
3、Qubit RNA HS Assay Kit (貨號: Q32852)
用途: 用于精準(zhǔn)定量RNA,范圍是5 ng/mL 至 100 ng/mL??商禺愋宰R別RNA,不受DNA干擾。
4、Qubit RNA BR Assay Kit (貨號: Q32855)
用途: 用于較高濃度的RNA定量,范圍是20 ng/mL 至 1000 ng/mL。
5、Qubit Protein Assay Kit (貨號: Q33211/Q33212)
用途: 用于蛋白質(zhì)溶液的定量,范圍是0.06 µg/mL 至 5 µg/mL (微孔板模式) 或 0.25 µg/mL 至 5 µg/mL (管式檢測模式)。
6、其他專用試劑盒:
miRNA Assay Kit: 用于microRNA定量。
ssDNA Assay Kit: 用于單鏈DNA定量。
HR (高范圍) Assay Kits: 用于濃度更高的特定樣品。
二、必需耗材 (Consumables)
1、Qubit檢測管 (Qubit Assay Tubes) (貨號: Q32856)
描述: 這是專用的0.5 mL薄壁PCR管,光學(xué)特性經(jīng)過優(yōu)化,能確保讀數(shù)準(zhǔn)確。
重要性: 強(qiáng)烈建議使用原廠檢測管。使用普通PCR管可能會由于管壁厚度和透光性不一致導(dǎo)致讀數(shù)不準(zhǔn),甚至刮擦樣品倉。
2、無粉手套
描述: 在配制工作液和操作樣品時必須佩戴。手上的油脂、核酸酶或污染物會嚴(yán)重影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
三、 輔助試劑與耗材
1、Qubit試管架 (Qubit Tube Rack) (貨號: 貨號可能隨包裝變化,通常試劑盒會附帶一個)
描述: 一個黑色的塑料架,專門用于放置Qubit檢測管,方便操作和避免管壁污染。
2、去離子水或TE緩沖液
用途: 用于稀釋標(biāo)準(zhǔn)品和樣品,以及作為空白對照。確保水質(zhì)純凈,無核酸酶污染。
3、移液器及匹配的吸頭
要求: 需要精確的移液器(如0.5-10 µL, 2-20 µL, 20-200 µL)和高質(zhì)量、無污染、無RNase/DNase的吸頭。準(zhǔn)確的移液是保證結(jié)果可靠的關(guān)鍵。
4、擦拭紙
用途: 用于清潔濺出的液體或擦拭管壁。推薦使用無絨屑的實(shí)驗(yàn)室擦拭紙。
四、總結(jié)清單:
為了運(yùn)行一次成功的Qubit檢測,您需要準(zhǔn)備:
1個 針對您目標(biāo)分子的 Qubit檢測試劑盒。
數(shù)支 Qubit專用檢測管。
無粉手套。
純凈水/TE緩沖液。
精確的移液器和吸頭。
建議始終訪問賽默飛或咨詢供應(yīng)商,以獲取新的產(chǎn)品貨號和詳細(xì)信息。
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