臺(tái)盼藍(lán)染色液(即用型)詳細(xì)介紹
貨號(hào):C0041
規(guī)格:100 mL
保存:2-8℃保存,有效期1年。
產(chǎn)品介紹:
臺(tái)盼藍(lán) (Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭、錐蟲藍(lán),是細(xì)胞活性染料,常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存 活率,是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。通常正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠 排斥臺(tái)盼藍(lán),細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色;而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。其中凋亡小 體同樣具有拒染特性,而巨噬細(xì)胞能通過胞吞的形式攝入臺(tái)盼藍(lán)。
本產(chǎn)品為低濃度即用型臺(tái)盼藍(lán)染色液,采用改良緩沖體系,穩(wěn)定性強(qiáng)沉淀少,通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù) 或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。染色時(shí)間只需3-5 分鐘,操作簡(jiǎn)單。 操作步驟:(僅供參考)
1 . 收集細(xì)胞:
對(duì)于貼壁細(xì)胞先用胰酶消化處理;對(duì)于懸浮細(xì)胞,則可以直接收集細(xì)胞。把收集的細(xì)胞在1000-2000rpm 離心3分鐘,棄上清,加入適量PBS 重新懸起細(xì)胞,制備單細(xì)胞懸液。
2. 臺(tái)盼藍(lán)染色:
細(xì)胞懸液與臺(tái)盼藍(lán)染色液(即用型)以1:9比例混勻,染色3分鐘(染色3分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠,但染 色時(shí)間可以更長(zhǎng)一些,但不宜超過10分鐘)。
3. 細(xì)胞計(jì)數(shù):
吸取少量經(jīng)過染色的細(xì)胞,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大,無光澤;活細(xì)胞不著色并保 持正常形態(tài),有光澤。通常要比較精確地進(jìn)行定量,每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500 個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞存活率(%)=活細(xì)胞總數(shù)/(活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù))×100%
注意事項(xiàng):
1. 染色時(shí)間不能太長(zhǎng),否則活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而著色,使檢測(cè)結(jié)果偏低。
2. 染色前染液若有沉淀,需過濾除掉沉淀后再用。
3. 有潛在致癌危險(xiǎn),為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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