臺盼藍染色液(0.4%)詳細介紹
貨號:C0040
規(guī)格:50 mL/100mL/500mL
保存:2-8℃保存,有效期1年。
產(chǎn)品介紹:
臺盼藍 (TrypanBlue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍,是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性與細胞的存 活率,是組織和細胞培養(yǎng)中常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞細胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥 臺盼藍,細胞不會被染成藍色;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜 完整性喪失,即可認為細胞已經(jīng)死亡。
臺盼藍可被巨噬細胞吞噬,故可用于巨噬細胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺盼藍拒染現(xiàn)象。臺盼藍 染色后,通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù),就可以對細胞存活率進行比較精確的定量:臺盼 藍染色液,0.4%常用于顯微鏡下細胞計數(shù),染色時間只需3-5 分鐘,操作簡單。
操作步驟:(僅供參考
1. 收集細胞:
對于貼壁細胞先用胰酶消化處理;對于懸浮細胞,則可以直接收集細胞。把收集的細胞在1000-2000rpm 離心3分鐘,棄上清,加入適量PBS 重新懸起細胞,制備單細胞懸液。
2. 臺盼藍染色:
細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1 比例混勻(終濃度0 . 04%),染色3分鐘(染色3分鐘時間已經(jīng) 足夠,但染色時間可以更長一些,但不宜超過10分鐘)。
3. 細胞計數(shù):
吸取少量經(jīng)過染色的細胞,用血細胞計數(shù)板計數(shù)。死細胞著藍色并膨大,無光澤:活細胞不著色并保 持正常形態(tài),有光澤。通常要比較精確地進行定量,每個細胞樣品至少數(shù)500 個細胞。
細胞存活率(%)=活細胞總數(shù)/(活細胞總數(shù)+死細胞總數(shù))×100%
注意事項:
1. 染色時間不能太長,否則活細胞也會逐漸積累染料而著色,使檢測結(jié)果偏低。
2. 染色前染液若有沉淀,需過濾除掉沉淀后再用。
3. 有潛在致癌危險,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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31800 RPMIMedium1640
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相關(guān)文獻:
[1]Dan Xiao,Yue Zhang.RuI Wang,et al Emodinalleviates cardac fibrosis by suppressing activation of cardi-acfibroblasts via upregulating metastasis associated protein 3.Acta Pharmaceutica Sinica B April 2019(IF 5.808)
[2]Chunping Yang,Tianxing Lv,Bin Wang,et al The Damaging Effects of Pedunsaponin A on Pomacea cana-liculata Hemocytes Toxins.July 2019(IF 3.895)
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