細(xì)胞因子是免疫細(xì)胞或非免疫細(xì)胞合成和分泌的具有生物活性的多肽或蛋白質(zhì)。

檢測(cè)細(xì)胞因子的方法就是ELISA。這個(gè)實(shí)驗(yàn)的具體原理咱們就不說了哈。

ELISA測(cè)的細(xì)胞因子是從細(xì)胞內(nèi)分泌到胞外的游離細(xì)胞因子，它可以明確定量這群細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的能力，同時(shí)也可以證明這群細(xì)胞除了能合成出這種細(xì)胞因子，還能把它分泌出胞外產(chǎn)生作用。

圖：sanquin以上是ELISA能做的，但它做不到的是什么呢？

它無法區(qū)分出樣本細(xì)胞中的哪一種或哪幾種細(xì)胞、細(xì)胞亞群能合成細(xì)胞因子，因?yàn)榧?xì)胞因子都分泌出來到外面了嘛。

而另一種實(shí)驗(yàn)方法則互補(bǔ)了這個(gè)分析需求——流式胞內(nèi)染色。

其原理是利用熒光素偶聯(lián)的抗細(xì)胞因子的單抗，如果細(xì)胞能合成該細(xì)胞因子，那么抗體與細(xì)胞因子結(jié)合時(shí)，細(xì)胞就帶上熒光素，并在相應(yīng)激光激發(fā)后產(chǎn)生熒光信號(hào)。

圖：sanquin它和流式檢測(cè)細(xì)胞表面抗原很像。但區(qū)別在于活細(xì)胞是排斥這些熒光素偶聯(lián)抗體的，直接標(biāo)記做不到。

因此只能先固定細(xì)胞，讓它保持一定的形狀，接著破壞細(xì)胞膜——本質(zhì)上不是破壞整個(gè)膜，而是在膜上打孔。這樣，抗體就能進(jìn)入胞內(nèi)和細(xì)胞因子結(jié)合了。

所以，流式胞內(nèi)染色測(cè)細(xì)胞因子，能明確知道某個(gè)細(xì)胞因子來自哪些細(xì)胞，并且可以算出這些細(xì)胞在整個(gè)樣本中的比例。兩種方法各有千秋，不能說哪種方法絕對(duì)更好。流式胞內(nèi)染色更像是一種定性分析，

先明確細(xì)胞是否能產(chǎn)生細(xì)胞因子，后續(xù)再根據(jù)需要進(jìn)一步分選或定量分析而ELISA就是妥妥的定量分析工具，可以作為胞內(nèi)染色分析之后的下一步分析。

圖：Linkedln例如，要敲定某個(gè)細(xì)胞是否能合成和分泌特定的細(xì)胞因子時(shí)，可以用這兩種方法配合分析。如果兩種方法都能得到陽(yáng)性結(jié)果，就可以明確結(jié)論。

最后，一句話總結(jié)一下今天的內(nèi)容：測(cè)細(xì)胞因子，流式胞內(nèi)染色能知道它來自什么細(xì)胞，這些細(xì)胞的比例如何；ELISA能給出細(xì)胞因子的量。