Oligo(dT) Primer和Random Primers的區(qū)別
1、Oligo(dT ) Primer也可稱為寡聚胸腺嘧啶引物,是只有胸腺嘧啶組成的寡居核苷酸鏈,長度范圍在10~20個堿基之間,常用的Oligo(dT )Primer有15堿基、16堿基和18堿基。
Oligo(dT ) Primer利用了堿基互補配對的原則以及mRNA含有poly(A)尾巴的特點,巧妙設計而成。由于這個特點,使得Oligo(dT ) Primer只能和mRNA配對,并在適宜的條件下完成反轉錄。原核生物的RNA,真核生物的rRNA和tRNA無poly(A)尾巴,因此用Oligo(dT ) Primer作為反轉錄引物時,這些RNA均不能作為模板。這限制了反轉錄后獲得的總cDNA的數(shù)量和種類。另外,若mRNA過長,可能會形成二級結構,這時Oligo(dT ) Primer擴增也會有一定的困難。同樣提示我們,在反轉錄時根據(jù)需要選擇引物。
2、Random Primers即隨機引物,常用長度是6堿基或9堿基,它是一種混合體,在每一個位置上四種堿基都可以隨機的出現(xiàn),如AATCGC,TTAAGCG等,如此可以有46或49種組合。
隨機引物可以根據(jù)堿基情況結合到幾乎所有的RNA上,包括mRNA、tRNA和rRNA。因此Random Primers適用于mRNA、tRNA和rRNA等所有RNA的反轉錄反應,適用于長的或具有發(fā)卡結構的RNA,對物種沒有限制,病毒、細菌、植物、動物等都可使用。
3、目前有的公司和實驗室提倡Oligo(dT)和Random Primers混合使用,以此保障獲得更為完整的cDNA。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號:chem17
掃碼關注視頻號















采購中心