FastDigest BspOI限制性內(nèi)切酶的特性
我可以將 FastDigest 緩沖液儲(chǔ)存在 4 攝氏度嗎?
FastDigest 緩沖液可在 4 攝氏度下儲(chǔ)存至少 6 個(gè)月。為了長期儲(chǔ)存直至過期,我們建議將 FastDigest 和 FastDigest 綠色緩沖液儲(chǔ)存在 -20 攝氏度。
如何使用 FastDigest 限制性內(nèi)切酶進(jìn)行大規(guī)模酶解?
我們的一般建議是在 500 μL 中使用 5-10 μL 含有 100 μg DNA 的 FastDigest 酶,在 1 mL 中使用含有 100 μg DNA 的 10-20 μL FastDigest 酶。在推薦溫度下將反應(yīng)孵育16小時(shí)(如果特定酶容易產(chǎn)生星形活性,則為最長推薦的孵育時(shí)間)。最佳條件可能會(huì)有所不同,因?yàn)?DNA 的消化取決于特定 FastDigest 限制性內(nèi)切酶和 DNA 底物的性質(zhì)。
如何以 FastDigest 酶為單位轉(zhuǎn)換或計(jì)算反應(yīng)數(shù)?
FastDigest 酶的濃度是專有信息。FastDigest 酶活性通過 FastDigest 單元 (FDU) 測(cè)量:1 μL 酶 (1 FDU) 在 20 μL 1X FastDigest 緩沖液中在 37 攝氏度下 5-15 分鐘內(nèi)裂解 1 μg DNA 底物。
FastDigest 和 FastDigest 綠色緩沖液是否單獨(dú)提供?
是的,F(xiàn)astDigest 緩沖液(Cat.不。B64)和 FastDigest 綠色緩沖液(Cat.不。B71)可以單獨(dú)購買。
FastDigest 緩沖液和 FastDigest 綠色緩沖液有什么區(qū)別?
FastDigest 綠色緩沖液具有與無色 FastDigest 緩沖液相同的性能,但可以將反應(yīng)混合物直接上樣到凝膠上。10X FastDigest 綠色緩沖液包括一種密度試劑和兩種用于直接上樣的示蹤染料。藍(lán)色染料在 1% 瓊脂糖凝膠中與 3-5 kb DNA 片段一起遷移,激發(fā)峰為 424 nm。黃色染料在 1% 瓊脂糖凝膠中的遷移速度比 10 bp DNA 片段快,激發(fā)峰為 615 nm。
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