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核酸標(biāo)記與檢測
核酸標(biāo)記和檢測
| DIG標(biāo)記及檢測 試劑盒 | 原理：用DIG-dUTB為底物，隨機(jī)摻入法進(jìn)行DNA標(biāo)記，通過酶聯(lián)免疫雜交的方法檢測。該試劑盒可以標(biāo)記25次反應(yīng)，每次標(biāo)記的DNA量為10ug-20ug，并可做50張10x10cm膜的雜交和檢測?！ ?yīng)用：非放射性DNA標(biāo)記及檢測試劑盒以檢測0．1pg的同源DNA，能檢測1ug哺乳動(dòng)物DNA中的單拷貝基因。跟放射性標(biāo)記系統(tǒng)比較，此試劑盒能快速得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而且消除了放射性同位素的不安全問題。從DNA標(biāo)記和雜交能見到檢測結(jié)果，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程24小時(shí)內(nèi)能完成。這試劑盒的靈敏度與特異性使它適用于所有的雜交技術(shù)以替代放射性同位素標(biāo)記和放射自顯影術(shù)。這個(gè)標(biāo)記方法和檢測系統(tǒng)適用于DNA-印跡轉(zhuǎn)移、菌落雜交、噬斑雜交及原位雜交。 |
| DIG（地高辛）DNA標(biāo)記及檢測試劑盒 DIG DNA labeling and Detection Kit | |
| 產(chǎn)品號：1093657 | 規(guī)格：Kit |
| DIG DNA標(biāo)記試劑盒 | 用DIG-11-dUTP對DNA作隨機(jī)引物擴(kuò)增法標(biāo)記。帶DIG標(biāo)記的探針可用于各種類型膜雜交，標(biāo)記的探針通過酶聯(lián)免疫法檢測。 |
| DIG DNA Labeling Kit | |
| 產(chǎn)品號：1175033 | 規(guī)格：Kit（40個(gè)標(biāo)記反應(yīng)） |
| DIG標(biāo)記試劑 | DIG High Prime |
| 產(chǎn)品號：1585606 | 規(guī)格：160ul（40個(gè)標(biāo)記反應(yīng)） |
| DIGDNA標(biāo)記及檢測Starter Kit I | Roche公司現(xiàn)為用戶提供一種新的DIG標(biāo)記及檢測試盒DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I．與原有的DIG DNA Labeling and Detection Kit （Cat．093657）比較，本產(chǎn)品有以下特點(diǎn)： ※ 能對10x10cm印跡作12個(gè)標(biāo)記反應(yīng)及24個(gè)顯色檢測反應(yīng)，是DIG DNA Labeling and Detection Kit（Cat．093657）份量的一半。所以特別適合初用者及需處理較少量樣品的用戶使用。 ※ 試劑盒采用的是DIG標(biāo)記試劑（Cat． 585606），其標(biāo)記效率是標(biāo)準(zhǔn)DIG隨機(jī)引物標(biāo)記法的3-10倍，而且預(yù)混了標(biāo)記需要的所有試劑，即開即用，令操作更簡單和方便。 ※ 試劑盒中還包括了DIG定量／對照試紙條，令您能在30分鐘內(nèi)只用小量試劑便可估計(jì)DIG標(biāo)記探針的濃度，方便您取得理想的信噪比。 ※ 用于顯色的NBT／BCIP底物為預(yù)混的濃縮液，而封閉液則以10倍濃度形式供應(yīng)，簡化了操作程序 |
| DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I | |
| 產(chǎn)品號：1745832 | 規(guī)格：Kit |
| DIGDNA標(biāo)記及檢測Starter KitⅡ | 對于需要使用化學(xué)發(fā)光法檢測的用戶，我公司現(xiàn)提供了此新的DIG標(biāo)記及檢測試劑盒。 與上述的StarterKitI不同，此新的StarterKitⅡ所含的底物為CSPD，但它同樣有以下特點(diǎn)： ※ 能對10 x10cm印跡膜作12個(gè)標(biāo)記反應(yīng)及24個(gè)檢測反應(yīng)，所以特別適合初用者及需處理較少樣品的用戶使用。 ※ 包含DIG標(biāo)記試劑，令標(biāo)記效率更高，操作更方便。 ※ 包括DIG定量／對照試紙條及NBT／BCIP濃縮液，令您更易估計(jì)探針濃度，從而取得理想的信噪比。 |
| DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter KitⅡ | |
| 產(chǎn)品號：1585614 | 規(guī)格：Kit |
| DIG發(fā)光檢測試劑盒（可做50張10X10cm膜檢測反應(yīng)） | DIG Luminescent Detection Kit（for nucleic acids） |
| 產(chǎn)品號：1363514 | 規(guī)格：Kit |
| DIG核酸檢測 試劑盒 | 用DIG標(biāo)記的核酸作探針，按常規(guī)方法進(jìn)行雜交?？勺?0張膜檢測反應(yīng)。 |
| DIG Nucleic Acid Detection Kit | |
| 產(chǎn)品號：1175041 | 規(guī)格：Kit |
| DIG系統(tǒng)是您 理想的核酸標(biāo)記及 檢測工具 | 經(jīng)過近千年的開發(fā)和*化．DIG系統(tǒng)現(xiàn)已成為產(chǎn)品zui齊備，在國內(nèi)外zui被接受和zui常被文獻(xiàn)引述的非放射性系統(tǒng)，其優(yōu)點(diǎn)包括： ※ 靈敏度高：在所有的應(yīng)用中，DIG系統(tǒng)能提供與用同位素相同的靈敏度，例如在基因組Southern雜交時(shí)對單拷貝基因作常規(guī)檢測。 ※ 快速：采用同位素需要3天才能完成的實(shí)驗(yàn)，DIG系統(tǒng)在2小時(shí)內(nèi)便能完成。 ※ 安全：非放射性方法，不影響環(huán)境及個(gè)人健康。 ※ 靈活：完備的產(chǎn)品系列，可配合各種不同需要，而且標(biāo)記好的探針可保存超過一年．令您可隨時(shí)進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)而無需重復(fù)標(biāo)記探針。此外，您更可重復(fù)進(jìn)行探針剝離和重探，進(jìn)一步提高工作效率。 ※ 方便：不需要操作同位素的防護(hù)措施及處理廢料的麻煩，也不象同位素，要提早計(jì)劃訂購。 ※ 節(jié)?。簺]有同位素衰變造成的浪費(fèi)。 |
| DIG寡核苷酸3' 末端標(biāo)記試劑盒 | 利用末端轉(zhuǎn)移酶在14bp到100bp的寡核苷酸的3'末端標(biāo)記DIG-11-ddUTP．標(biāo)記好的探針可用于各種膜雜交和原位雜交。有如下優(yōu)點(diǎn)： ※ 由于探針短，雜交所需時(shí)間也短。 ※ 探針為單鏈，雜交過程中不存在探針自我組合復(fù)性。 ※ 探針短小，容易迅速滲入固定的組織，因而特別適用于作原位雜交?！ ?※ 可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇探針的序列。 |
| DIG Oligonucleotide 3'-End Labeling Kit | |
| 產(chǎn)品號：3353575 | 規(guī)格：Kit（25個(gè)標(biāo)記反應(yīng)） |
| PCR DIG探針合成 試劑盒 | 標(biāo)記的探針可在Southern雜交后從5-10ug的人基因級別DNA檢測出單拷貝基因，是從少量DNA模板制備大量探針的zui有效、的方法。 |
| PCR DIG Probe Synthesis Kit | |
| 產(chǎn)品號：1636090 | 規(guī)格：Kit（25個(gè)標(biāo)記反應(yīng)） |
| DIG RNA標(biāo)記試劑盒 | RNA是由SP6或T7RNA聚合酶催化的體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)里被標(biāo)記的。在轉(zhuǎn)錄反應(yīng)過程中， 核苷酸類似物Digoxigenin-11-UTP（DIG-UTP）是被利用來替代UTP（或其它放射性標(biāo)記了的核苷酸）的角色。在新合成的RNA中，約每25個(gè)堿基便摻入了DIG-UTP。可標(biāo)記轉(zhuǎn)錄反應(yīng)2x10標(biāo)記反應(yīng)后，DIG-標(biāo)記RNA可用于各種雜交技術(shù)，包括： ※ Northern印跡 ※ Southern印跡 ※ Dot/Slot印跡 ※ 菌落篩選 ※ 噬菌斑雜交 ※ 原位雜交 |
| DIG RNA Labeling Kit（SP6／T7） | |
| 產(chǎn)品號：1175025 | 規(guī)格：Kit |
| DIG標(biāo)記反應(yīng)試劑 | 抗地高辛（DIG）堿性磷酸酶復(fù)合物 Anti-DIG-AP |
| 產(chǎn)品號：1093274 | 規(guī)格：150u（200u1） |
| CSPD化學(xué)發(fā)光底物 | 背景低，15分鐘曝光即可獲得清晰的結(jié)果。 |
| CSPD Chemiluminescent Substrate | |
| 產(chǎn)品號：1655884 | 規(guī)格：1m1 |
| CDP-Star 化學(xué)發(fā)光底物 | ※ 是目前zui快速、zui靈敏的化學(xué)發(fā)光底物，曝光時(shí)間只需15-60秒。 ※ 是以下操作的理想底物： ?。?、檢測哺乳動(dòng)物的單拷貝基因。 ?。病⒃贜orthern雜交以RNA探針檢測稀有的mRNA。 ?。?、檢測極少量的靶DNA，如制作指紋圖譜及法醫(yī)分析。 |
| CDP-Star Chemiluminescent Substrate | |
| 產(chǎn)品號：1685627 | 規(guī)格：1m1 |
| DIG對照試紙條 | ※ DIG對照和定量試紙條（Cat．669958）能方便估計(jì)DIG標(biāo)記探針的濃度，以取得理想的信噪比 ※ 省時(shí)：能在30分鐘內(nèi)測定DIG標(biāo)記DNA或RNA的濃度。 ※ 令您在估計(jì)探針產(chǎn)量時(shí)，可節(jié)省大量試劑。 |
| DIG Control Teststrips | |
| 產(chǎn)品號：1669966 | 規(guī)格：25條 |
| DIG DNA標(biāo)記混合物 | DIG DNA Labeling Mix |
| 產(chǎn)品號：1277065 | 規(guī)格：50ul（25個(gè)反應(yīng)） |
| DIG簡便雜交液 | ※ 預(yù)混、無毒（不含甲酰胺）、即開即用的雜交液。 ※ 省時(shí)：能大量減少雜交時(shí)間，令您可在一天內(nèi)完成常規(guī)的Southern Blot或文庫篩選。 ※ 使用方便：只要將DIG標(biāo)記探針加進(jìn)DIGEasy-Hyb無需再進(jìn)行任何*化處理。 ※ 適用范圍廣：適用于DIG系統(tǒng)的各種膜雜交，可采用多種不同的溫度及任何類型的探針（但在原位雜交的效果有待驗(yàn)證）?！ ?※ 雜交效果好，背景低，更適宜做多次雜交。 |
| DIG Easy-Hyb | |
| 產(chǎn)品號：1603558 | 規(guī)格：500ml |
| DIG清洗及 阻斷緩沖液組合 | ※ 是適用于清洗、阻斷及檢測的濃縮液。 ※ 使用前稀釋即可，即使阻斷試劑亦是預(yù)制的。 ※ 經(jīng)過消毒及檢測，確保不含DNase RNase及污染物。 ※ 包含以馬來酸為基礎(chǔ)的緩沖液，以降低Northern Blot的背景，亦能改善其它應(yīng)作用中的檢測結(jié)果。 |
| DIG Wash and Block Buffer Set | |
| 產(chǎn)品號：1585762 | 規(guī)格：1set（30blots） |
| 阻斷試劑 | BlocMngReagent |
| 產(chǎn)品號：1096176 | 規(guī)格：50g |
| DIG標(biāo)記的UTP | DIG-11-UTP |
| 產(chǎn)品號：1209256 | 規(guī)格：250nmol（25u1） |
| DIG標(biāo)記的dUTP | DIG-11-dUTP |
| 產(chǎn)品號：1093088 | 規(guī)格：25nmol（25u1） |
| DIG標(biāo)記的ddUTP | DIG-11-ddUTP |
| 產(chǎn)品號：1363905 | 規(guī)格：25nmol（25u1） |
| 尼龍雜交轉(zhuǎn)印膜，帶正電荷 | 因其帶正電荷，能緊密結(jié)合DNA而使背景降至zui低，且能迅速轉(zhuǎn)移和結(jié)合DNA，較高機(jī)械強(qiáng)度的膜能進(jìn)行多次探針剝離及重雜交。 |
| Nylon Membranes，Positively Charged | |
| 產(chǎn)品號1209299/1417240 | 規(guī)格:20張（10x15cm）/1卷（30cmx3m） |
| 配合原位雜交技術(shù)發(fā)展的* DIG產(chǎn)品 | 原位雜交技術(shù)的發(fā)展迅速，亦不斷推出新的產(chǎn)品配合新的研究方向，除了各種不同的抗體復(fù)合物外，還提供以下產(chǎn)品： DNA探針，人染色體特異 羅氏（原寶靈曼）現(xiàn)供應(yīng)多種不同的人染色體特異DIG標(biāo)記探針，方便您進(jìn)行熒光原位雜交（FISH）。寶靈曼的探針為包含人衛(wèi)星DNA的質(zhì)粒．在嚴(yán)格的條件下，每個(gè)探針只在原位與目的染色體的著絲粒雜交。除了供應(yīng)DIG探針．方便以抗DIG-熒光色素作較靈敏的間接檢測外，還提供熒光素標(biāo)記的探針作直接檢測。這些探針可用于： ※ 鑒別在中期散開物或新間期核階段的個(gè)別染色體 ※ 鑒別非整倍體細(xì)胞，雜交細(xì)胞或腫瘤 ※ 染色體作圖研究 PRINS反應(yīng)組合: PRINS（Primed in Site Labeling）可替代傳統(tǒng)的原位雜交方法，只須幾個(gè)步驟便能快速鑒別人染色體。寶靈曼的PRlNS反應(yīng)組合，結(jié)合PRINS與DIG技術(shù)，令您能準(zhǔn)確地在原位對特異人染色體定位。人染色體首先被變性，與無標(biāo)記的序列特異寡核苷酸退火．利用此退火的寡核苷酸作引物，可進(jìn)行DIG-dUTP的標(biāo)記反應(yīng)，之后便可對DIG標(biāo)記作檢測。PRINS反應(yīng)組合的特點(diǎn)包括： ※ 靈活：提供個(gè)別的特異引物配合您的需要，而且可方便dTTP的濃度．提高靈敏度．更可與標(biāo)準(zhǔn)的原位雜交技術(shù)結(jié)合，取得更多資料 ※ 使用方便 ※ 可靠：經(jīng)過應(yīng)用于人染色體的測試，確保能取得可靠 的結(jié)果 |
| 操作DIG的系統(tǒng)的技術(shù)提示 | DIG系統(tǒng)具有安全、方便、快捷、靈活、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，而且DIG系統(tǒng)所涉及的操作步驟基本上與同位素方法相同，用戶要取得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并不困難，但有一些事項(xiàng)必須特別注意，以下列出了一些技術(shù)提示。 1、模板的制備 ※ 須作CsCl-酚一氯仿一乙醇抽提（或zui低限度作酚-氯仿-乙醇抽提）純化模板。 ※ 插入子沒有載體序列，以避免交叉雜交。 ※ 玻璃奶方法純化得到的核酸，須在經(jīng)過酚-氯仿-乙醇的抽提后，才可用于標(biāo)記（Highprime）。 2、標(biāo)記 ※ 在使用隨機(jī)引物標(biāo)記法時(shí)，須留意變性步驟要在水浴中進(jìn)行，并須立刻冷卻。 ※ 在每次標(biāo)記后都必須檢測標(biāo)記效率（可用產(chǎn)品DIG定量試紙條Cat．669958和對照試紙條1669966）。 ※ 如在標(biāo)記前模板未經(jīng)前述步驟純化，在雜交前建議對探針進(jìn)行純化?？衫玫鞍酌窴作處理，并在變性及加入預(yù)先加溫的DIG簡便雜交液（不可用含封阻試劑的緩沖液）之后以0.45um醋酸纖維素濾膜過濾。 3、印跡 ※ 應(yīng)盡量采用羅氏的帶正電雜交膜，以降低背景和得到*的信噪比。 ※ 處理雜交膜時(shí)必須特別小心，并須使用無粉末手套。 ※ 應(yīng)根據(jù)不同的核酸種類，采用合適的轉(zhuǎn)移條件。 4、雜交 ※ 須根據(jù)GC含量及同源性計(jì)算應(yīng)采用的雜交溫度。 ※ 在預(yù)雜交及zui后清洗之間的所有時(shí)間，雜交膜均應(yīng)保持濕潤。 ※ 可使用雜交袋或烘箱．但不可使用無蓋的盤。 ※ 在封閉雜交袋前，必須將雜交液中的氣泡清除。 ※ 切勿使用過量的探針，以避免過高的背景。一般DNA探針濃度為25ng/ml，RNA探針則為100ng/ml，如使用CDP-Star作底物，探針濃度應(yīng)減低一半或以上。 ※ 應(yīng)盡量采用DIG簡便雜交液。 ※ 如作Northern印跡： ▽ 須使用十分嚴(yán)格的條件。 ▽ 特別建議采用DIG簡便雜交液。 ▽ 應(yīng)盡量使用RNA探針，因?yàn)橛肈NA探針產(chǎn)生的訊號弱50-100倍?！ 。?、檢測 ※ 在使用Anti-DIG-AP前，應(yīng)在微離心機(jī)以10000rpm離心5分鐘，然后在表面抽取該抗體使用。 ※ 如要保存經(jīng)稀釋的化學(xué)發(fā)光底物，應(yīng)將它消毒過濾，并加入0.1M*。 ※ 在加入化學(xué)發(fā)光底物前應(yīng)避免有過量的Buffer3留在膜上，可使用已消毒的Whatman紙，在120℃烘2小時(shí)輕輕將膜稍為弄干或直接讓Buffer3滴出。 |
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