DMEM是生物實(shí)驗(yàn)室使用頻率最高的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基，由 Dulbecco 改良 Eagle 配方研制，整體氨基酸、營(yíng)養(yǎng)濃度偏高，配方側(cè)重滿足貼壁附著型細(xì)胞的生長(zhǎng)代謝需求。DMEM根據(jù)葡萄糖含量分為高糖 DMEM（4.5g/L）與低糖 DMEM（1g/L）兩大品類，二者配方差異直接決定適用細(xì)胞類型，也是新手細(xì)胞培養(yǎng)最容易出錯(cuò)的關(guān)鍵點(diǎn)。

成分區(qū)別：

l 從配方構(gòu)成來(lái)看，高糖 DMEM 葡萄糖 4500mg/L，充足碳源支撐細(xì)胞高速增殖，富含甘氨酸、絲氨酸等優(yōu)勢(shì)氨基酸；緩沖系統(tǒng)僅依靠碳酸氫鈉，必須在 5%~10% CO?培養(yǎng)箱內(nèi)才能穩(wěn)定培養(yǎng)液 pH，脫離 CO?環(huán)境容易出現(xiàn) pH 升高，損傷細(xì)胞。

l 低糖 DMEM 葡萄糖僅 1000mg/L，低葡萄糖環(huán)境能夠抑制細(xì)胞過(guò)快分裂，配方基礎(chǔ)氨基酸種類和高糖一致，但整體能量供給偏弱，不適合增殖旺盛的腫瘤細(xì)胞。

適用細(xì)胞類型：

在細(xì)胞應(yīng)用場(chǎng)景中，高糖 DMEM 是實(shí)體貼壁腫瘤細(xì)胞標(biāo)配培養(yǎng)液：宮頸癌 HeLa、乳腺癌 MCF-7 固定使用高糖 DMEM 培養(yǎng)；肝癌 HepG2 可選 DMEM 單用或搭配 MEM 混合培養(yǎng)；肺癌 A549 優(yōu)選 F-12K，缺少試劑時(shí)可臨時(shí)用高糖 DMEM 替代。除腫瘤細(xì)胞外，3T3 胚胎成纖維細(xì)胞、HEK293、原代成纖維細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等高代謝貼壁細(xì)胞，全部?jī)?yōu)先選用高糖 DMEM，質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、慢病毒包裝等體外實(shí)驗(yàn)，高糖環(huán)境可以顯著提升細(xì)胞活性與轉(zhuǎn)染效率。

低糖 DMEM 多用于生長(zhǎng)速率平緩的原代細(xì)胞、干細(xì)胞培養(yǎng)，依靠低糖限制細(xì)胞異常增殖，嚴(yán)禁用于各類腫瘤細(xì)胞長(zhǎng)期傳代，腫瘤細(xì)胞長(zhǎng)期在低糖 DMEM 中會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)停滯、細(xì)胞皺縮、大量漂浮死亡。

實(shí)驗(yàn)室配制DMEM完-全培養(yǎng)液統(tǒng)一添加 10% 胎牛血清 + 青霉素鏈霉素雙抗，降低微生物污染風(fēng)險(xiǎn)。

實(shí)操總結(jié)：快速選型口訣，腫瘤貼壁細(xì)胞選高糖 DMEM，低代謝原代細(xì)胞選用低糖 DMEM，切勿隨意替換糖型，保障細(xì)胞穩(wěn)定傳代。

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