一、范圍本規(guī)范適用于硅膠基質（C18、PSA、氨基、氰基、硅膠、混合型填料）、高分子聚合物基質（HLB、WAX、WCX）各類常規(guī)固相萃取小柱，涵蓋倉儲保存、實驗前標準預處理、使用后再生清洗、重復復用判定全流程操作要求，可作為實驗室樣品前處理 SOP、耗材管控、成本優(yōu)化技術依據。
二、術語與基礎說明
預處理（活化平衡）：通過有機溶劑、水溶液依次浸潤填料，恢復吸附位點活性，建立與樣品匹配的親水 / 疏水環(huán)境，防止目標物吸附損失。
再生復用：單次使用后通過梯度溶劑沖洗去除基質雜質、殘留目標物，恢復填料吸附性能，實現多次重復使用。
穿透容量：小柱可穩(wěn)定吸附目標物的最大樣品量，再生多次后穿透容量下降至標準下限則報廢。
基質殘留：樣品色素、油脂、蛋白、腐殖酸等雜質不可逆吸附在填料孔隙，造成回收率降低、基線抬升、交叉污染。
三、固相萃取小柱標準化保存規(guī)范
3.1 未開封全新小柱倉儲保存
環(huán)境條件
存儲環(huán)境溫度 5～30℃，相對濕度 40%～70%；避光、通風，遠離有機溶劑揮發(fā)、酸堿試劑、臭氧環(huán)境。
分類存放要求
硅膠鍵合相小柱（C18、氨基、氰基）：嚴禁長期高濕存放，避免硅羥基水解、填料鍵合相脫落；開封前原鋁箔袋密封保存。
聚合物 HLB、離子交換柱（WAX/WCX）：耐潮濕，但不可直接接觸水汽、冷凝水，整盒密封存放。
正相填料（硅膠、氧化鋁、佛羅里硅土）：嚴格干燥保存，受潮會大幅降低吸附選擇性，開封后盡快用完。
堆放禁忌
禁止重壓堆疊，防止篩板變形、填料壓實堵塞；避免與強酸、氧化劑同柜存放。
3.2 開封未使用完小柱短期保存（1～7 天）
兩端密封：小柱上下兩端配套堵頭密封，放入原裝密封袋，加入干燥劑。
反相類（C18、HLB）：柱內保留少量甲醇 / 乙腈潤濕填料，防止填料干死失活；
正相類（硅膠、Florisil）：排空柱內溶劑，干燥密封，防止吸水失活；
離子交換柱：留存對應緩沖鹽平衡液密封，避免電荷位點失效。
3.3 長期閑置保存（7 天以上）
反相小柱：甲醇沖洗后，低速抽干至微潤濕狀態(tài)，兩端密封冷藏（4℃）；
正相填料：純氮氣吹干填料，干燥器內避光保存；
離子交換固相萃取柱：水洗→甲醇脫水，干燥密封冷藏；
禁止冷凍保存，低溫會造成填料孔隙結構不可逆損傷。
3.4 已上樣使用中途暫停保存（樣品吸附狀態(tài)）
目標物保留在填料上，不可完全抽干；
加入少量弱淋洗溶劑浸潤填料，兩端密封，4℃冷藏，靜置時長不超過 24h；
油脂、高色素樣品不可靜置過夜，雜質會發(fā)生不可逆吸附。
四、不同類型 SPE 小柱標準化預處理（活化平衡）操作流程
4.1 反相固相萃取小柱（C18、C8、HLB）通用預處理
適用：水體、食品中弱極性、非極性有機物（農殘、多環(huán)芳烴、油脂）
活化：甲醇 / 乙腈 3～5 倍柱體積，低速過柱，浸潤全部填料；
平衡：純水或樣品初始緩沖液 5 倍柱體積，置換有機相；
禁止活化后抽干填料，填料干燥會造成疏水吸附位點塌陷，目標物回收率暴跌。
4.2 正相固相萃取小柱（硅膠、Florisil、氨基、氰基）預處理
適用：油脂、植物油、脂溶性維生素、極性雜質分離
活化：二氯甲烷 / 乙酸乙酯 5 倍柱體積；
平衡：與樣品溶劑極性匹配的正相溶劑（正己烷、石油醚）；
全程保持干燥，嚴禁水相進入填料，吸水會直接喪失分離能力。
4.3 混合型離子交換小柱（WAX/WCX/MCX/MAX）預處理
適用：水體、生物樣品中酸堿類極性化合物、獸藥、有機酸
活化：甲醇 4 倍柱體積；
平衡：對應 pH 緩沖溶液 5 倍柱體積，調節(jié)填料電荷環(huán)境；
上樣前保證柱內無氣泡，氣泡會造成局部通路、富集不均。
4.4 預處理通用質控要點
溶劑流速控制：1～2 滴 /s，保證溶劑與填料充分接觸；
柱內無干層、無氣泡，出現干柱需重新完整活化；
活化、平衡溶劑純度≥色譜純，減少柱內雜質本底；
批量處理小柱時，同一批次統一溶劑、統一流速，保證平行性。
五、固相萃取小柱分級再生復用操作技術
5.1 適用與禁用復用場景
可再生復用小柱
僅適用于色素、油脂較少的水樣、清潔飲料、地表水等低基質干擾樣品；C18、HLB、硅膠、離子交換柱均可有限次再生。
不可再生、單次報廢場景
高腐殖質污水、污泥、肉制品、中藥提取液等高色素、高油脂樣品；
重金屬、強氧化劑、高濃度酸堿樣品污染后的小柱；
篩板變形、填料開裂、出現明顯穿透、回收率下降超 20% 的小柱。
5.2 一級輕度再生（常規(guī)水樣、低雜質樣品，可重復 3～5 次）
適用于僅吸附少量目標物，無明顯色素殘留的小柱
洗脫后，甲醇 5 倍柱體積沖洗，洗脫殘留待測物；
超純水 5 倍柱體積沖洗去除水溶性鹽類；
氮氣微吹干，按全新小柱預處理流程活化平衡，直接復用。
5.3 二級深度再生（輕微發(fā)黃、少量油脂殘留，最多復用 2～3 次）
梯度沖洗順序（全程慢速過柱）：
乙腈 / 甲醇（1:1）5 倍柱體積，洗脫有機殘留；
50% 甲醇水溶液沖洗去除水溶性雜質；
稀硝酸（0.05mol/L）過柱（硅膠 / 離子交換柱專用，HLB 可跳過），去除金屬離子吸附；
純水沖洗至中性；
甲醇脫水，微濕密封保存或直接活化復用。
5.4 三級強再生（僅聚合物 HLB 柱專用，硅膠柱禁止使用）
針對輕微色素吸附，硅膠基質經強有機溶劑處理易出現鍵合相流失：
甲醇→丙酮→甲醇梯度沖洗；
純水充分置換有機相；
常溫避光平衡后使用；
僅建議復用 1 次，再生后必須做回收率驗證。
5.5 正相填料專用再生流程（Florisil、硅膠）
正己烷沖洗去除脂類；
二氯甲烷沖洗極性雜質；
氮氣吹干，干燥密封保存。
六、再生后復用性能判定標準（達到以下方可重復使用）
外觀判定：填料無發(fā)黑、無大面積黃 / 綠色色素堆積，篩板無堵塞；
流速判定：同等負壓下流速與新柱偏差≤15%，無持續(xù)堵塞；
回收率驗證：標準品加標回收與新柱差值≤10%；
基線空白判定：空白溶劑過柱后色譜無明顯鬼峰、雜質峰；
最大復用次數限值
HLB 聚合物柱：≤5 次；
C18 硅膠反相柱：≤3 次；
離子交換柱：≤2 次；
Florisil / 硅膠正相柱：≤2 次。
超出次數統一報廢，防止交叉污染。
七、操作禁忌與故障防控
硅膠基質小柱禁止高濃度強酸長時間浸泡，會破壞硅烷鍵合相；
再生沖洗嚴禁高速抽干填料，填料干裂將降低吸附容量；
高色素樣品小柱不建議再生，色素不可逆吸附會持續(xù)造成交叉污染；
再生溶劑需依次由強到弱過渡，避免溶劑相分離產生氣泡；
再生后的小柱單獨存放、標記使用次數，不可與全新小柱混用。
八、記錄與管控要求
每根可復用小柱標注使用次數、再生日期、處理樣品基質；
建立耗材再生臺賬，記錄再生溶劑、再生等級、回收率驗證結果；
再生后不達標的小柱統一收集，按實驗室危廢規(guī)范處理；
定期對比新柱與再生柱平行樣品數據，評估復用可行性。
九、總結
固相萃取小柱的使用壽命、檢測穩(wěn)定性直接由保存方式、預處理標準化程度、再生工藝決定。
日常實驗中，清潔基質樣品可通過規(guī)范分級再生實現多次復用，有效降低耗材成本；高雜質、高色素基質樣品建議一次性使用，規(guī)避交叉污染風險。
嚴格執(zhí)行本規(guī)范的倉儲密封、梯度活化、分級再生、復用驗證流程，既能保證樣品前處理回收率與數據平行性，又可實現耗材精細化管控。
4
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務